胎儿低比率嵌合体产前诊断方法的比较_付爱红.pdf
《胎儿低比率嵌合体产前诊断方法的比较_付爱红.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《胎儿低比率嵌合体产前诊断方法的比较_付爱红.pdf(5页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、目的:探讨染色体微阵列分析、荧光原位杂交和细胞核型分析在胎儿羊水低比率嵌合体中的诊断差异性。方法方法:回顾分析我院 年月 年 月无创 产前筛查提示、为高风险(值),补充报告为性染色体可能异常的病例,并进一步联合运用、与细胞核型分析确诊其是否为异常核型及嵌合比例。结果结果:收集 例,检出率 (:),核型分析检出率(:),检出率 (:)。对于嵌合体的检测,核型分析与 方法有统计学差异(),与 检测也有统计学差异()。结论结论:对于无创 产前筛查提示、为高风险(值),或者性染色体数目存在异常的胎儿,可以作为确定嵌合类型以及异常核型嵌合比例的首选检测方法。关键词:胎儿低比率嵌合体;染色体微阵列分析;荧
2、光原位杂交;细胞核型分析中图分类号:文献标志码:文章编号:()开放科学(资源服务)标识码():o o o o o o o (,):(),()o :(),(),:,(:),(:),(:),(),()o o:(),o ;巴楚医学 年第卷第期 ,嵌合染色体是指不同细胞系存在于同一个体,这种情况可能导致流产、死产等。嵌合比率越大对机体的影响越大,嵌合发生在体细胞、生殖腺等不同组织对机体表型也不同。所有嵌合染色体中,绝大多数为假性或同源性嵌合。真性嵌合体主要是因细胞有丝分裂后期染色体单体滞留,导致个别细胞及其后代缺失一条染色体。对于无创 产前筛查(,)提示的染色体异常,通常采取羊水穿刺来实现临床诊断。检
3、测方法包括染 色 体 微 阵 列 分 析(,)、荧光原位杂交技术(,)与细胞核型分析,这些都是目前产前诊断的主要手段。比较基因组杂交测序是的其中一种类型,因其高分辨、高灵敏度、高通量及操作自动化等优势被临床广泛应用。羊水细胞染色体核型分析技术在嵌合体诊断中有着广泛的应用。但是核型分析体外培养周期长,同时存在原有部分细胞丢失或合并优势生长,导致此方法对低比率嵌合体容易漏检。技术是一种能在自然环境中定位特定核酸序列的分子细胞遗传学诊断技术,其原理是将分子生物探针与细胞核内的 靶序列进行杂交,从而获得细胞内多条染色体(或染色体片段)或多种基因状态的信息。与核型分析技术相比,该方法具有一些优势,主要体
4、现在无需培养细胞,可直接从羊水样本中检测细胞。对于部分怀疑嵌合的患者,取羊水或脐血直接进行 检测,可真实反映胎儿体内的细胞嵌合状况,对于判断胎儿预后会更有帮助。目前,在产前诊断已广泛应用,并被证实安全有效。本文通过回顾分析我院 例患者,探讨针对 提示、为高风险(值),或者性染色体数目存在异常,同时临床高度怀疑为低比率嵌合体染色体的人群,、和细胞核型分析诊断染色体嵌合类型以及异常核型嵌合比例的价值。对象与方法对象收集 年月 年 月于我院遗传实验室诊断为低比率嵌合体染色体共计 例患者,对其检测数据进行回顾性分析。所有纳入病例均为 提示、高风险(且值),随后接受了羊水穿刺进行产前诊断并结合多种遗传学
5、检测试验确诊为低比率嵌合染色体的孕妇。低比率嵌合以小于 为界限。孕妇年龄 岁,孕周 周。所有孕妇均提前告知检测目的与相关风险,且签署羊水穿刺知情同意书。本研究通过我院伦理审查委员会审查。方法染色体核型分析所有操作均按照实验室操规范严格执行。选择超声定位下羊膜腔穿刺,具体方法如下:抽取淡黄色羊水弃去后,再抽取 羊水。分别向两个无菌离心管中注入 羊水,离心 ,保留沉淀加羊水培养基置个平底细胞培养瓶,在、的条件下培养天。更换新鲜培养基继续培养,再次换液,并对细胞悬液做传代培养。通过倒置显微镜观察细胞克隆岛,显带进行核型分析(操作方法:将染色体用胰蛋白酶消化后,再用 染液染色,呈现深浅相间的带纹)。若
6、出现嵌合现象,则加大计数量,同时收获备份培养瓶中的传代细胞,加大计数核型进行分析。采用美国莱卡 扫片,工作站人工分析。染色体微阵列分析羊水获取方法同,需要羊水量为 。采 用 美 国 昂 飞 公 司 生 产 的 芯片,基因组 提取、消化、连接、纯化、片段化、标记、杂交,最后洗脱、染色、扫描与数据分析均严格按照相关试剂说明书执行。采用全基因组检测,寻找有临床意义的染色体微缺失微重复、染色体亚端粒缺失及杂合性缺失等。荧光原位杂交技术羊水获取方法同,需要羊水量为 。取羊水进行消化、低渗、固定、制片、变性孵育洗脱、复染,最后镜检。探针分两组:第一组探针:(天蓝色)探针定位于 (),(绿色)探针定位于 (
7、),(红色)探针定位于 ();第二组探针:(红色)探针定位于 基因(),(绿色)探针定位于 ,()。结果以奥林巴斯荧光显微镜根据间期细胞中亮信号的颜色个数来计数。检测遵照 的表述。染色体核型分析羊水嵌合评定标准双线培养细胞,当个或个以上的培养物中都至少发现个或个以上的异常细胞克隆,且异常细胞核型相同,判定为真嵌合体。若是以下种情形之一,为假嵌合体:在个或个以上培养物中只查到单个异常细胞或细胞克隆;个或个以上的异常细胞克隆都是在同个培养物中发现;个或巴楚医学 年第卷第期 ,个以上培养物中都发现异常细胞,但异常细胞的核型异常类型不同。统计学分析数据采用 分析,采用正态近似法计算率的置信区间,基于
8、检测结果,两组间差异性比较采用检验,认为差异有统计学意义。结果、与核型分析检测结果和患者妊娠结局本研究回顾分析的 例患者的胎儿嵌合体三种检测方法检测结果与妊娠结局,见表。表 例患者的胎儿染色体嵌合体三种方法检测结果及妊娠结局编号 ()核型结果妊娠结局 三体 三体嵌合 ,()终止妊娠 三体 三体嵌合,()终止妊娠 三体 三体嵌合 ,()终止妊娠 三体 三体嵌合,()继续妊娠 三体 三体嵌合,()继续妊娠 三体 三体嵌合 ,()终止妊娠 三体 三体嵌合 ,()终止妊娠 三体 三体嵌合 ,()终止妊娠 三体 三体嵌合 ,()终止妊娠 三体 三体嵌合,()继续妊娠 三体 三体嵌合,()终止妊娠 三体
9、三体嵌合,()继续妊娠 性染色体异常,(),(),()终止妊娠 性染色体异常,(),(),()终止妊娠 性染色体异常,(),(),()继续妊娠 性染色体异常,(),(),()继续妊娠 性染色体异常,(),(),()继续妊娠 性染色体异常,(),(),()继续妊娠 性染色体异常,(),(),()继续妊娠 性染色体异常,(),(),()继续妊娠 性染色体异常,(),(),(),(),()()()终止妊娠 性染色体异常,(),(),()终止妊娠 性染色体异常,(),(),()终止妊娠 性染色体异常,(),(),()终止妊娠 性染色体异常,(),(),()继续妊娠 性染色体异常,(),(),(),()
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 胎儿 比率 嵌合体 产前诊断 方法 比较 付爱红
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。