基于Wnt5a信号通路探讨放射性125I粒子组织间植入治疗胰腺癌的疗效及机制.pdf
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1、基于信号通路探讨放射性 粒子组织间植入治疗胰腺癌的疗效及机制。方法选取 年 月 年 月吉林大学中日联谊医院行超声引导经皮穿刺组织学活检证实为胰腺癌,行超声引导放射性 粒子植入治疗的 例患者(个病灶)作为研究对象。术后 个月 观察肿瘤大小及空腹血糖的变化,通过免疫组织化学染色检测患者组织标本 的表达。通过 数据库分析 例胰腺癌组织和 例胰腺组织中 的 水平差异。体外采用放射线照射胰腺癌 细胞,通过 及实时荧光定量 检测 和线粒体氧化磷酸化复合体亚基的表达变化。结果在植入放射性 粒子的 个病灶中有 个病灶明显减小,有效率为 ,胰腺癌肿瘤得到局部控制。患者术后空腹血糖明显升高,但仍在 范围内。数据库
2、的生物信息学分析发现,在胰腺癌组织中的表达明显高于正常组织()。免疫组织化学染色显示胰腺癌组织 的表达显著高于癌旁组织。经放射线照射后,胰腺癌细胞 的表达明显下调,三磷酸腺苷合酶 、细胞色素 氧化酶亚基 等线粒体氧化磷酸化复合体亚基的 水平升高,而蛋白水平明显下降()。结论放射性 粒子通过抑制胰腺癌细胞 表达,降低线粒体氧化磷酸化复合体亚基翻译,抑制胰腺癌细胞的增殖。关键词胰腺癌;放射性 粒子;线粒体 :,;,:,:,(),(),国际老年医学杂志 年 月第 卷第 期 ,吴颖,等基于 信号通路探讨放射性 粒子组织间植入治疗胰腺癌的疗效及机制 ,(),()(),(),;胰腺癌是一种起病隐匿、进展迅
3、猛且预后极差的恶性肿瘤,年生存率不足 。目前,手术切除仍然是早期胰腺癌患者治疗的首选方案,能够显著延长患者的生存时间 。但是,胰腺癌早期无明显症状,绝大部分患者发现时已经是晚期,患者的治疗选择仅限于放化疗或化疗 。放射性 粒子植入术作为肿瘤放射治疗的一种新形式,属于近距离放射治疗的范畴,即在直视下或通过影像学手段引导,将人工合成的微型放射源(放射性 粒子)直接植入到实体肿瘤病灶内,并将放射源根据肿瘤的形态按一定规律进行排列,通过持续释放低剂量 射线杀伤肿瘤细胞 。研究发现,放射性 粒子植入与全身化疗联合能够显著提高胰腺癌患者生存率,对胰腺癌局部肿瘤控制和疼痛缓解有良好的疗效 。研究认为 在肺癌
4、、前列腺癌和胰腺癌等癌症组织中高表达,且与放化疗抗性、转移和不良预后密切相关 。近期有研究发现 参与调控线粒体动力学、钙离子稳态及线粒体能量代谢等线粒体功能,而其具体机制不清 。因此,本文基于 信号通路探讨放射性 粒子组织间植入治疗胰腺癌的作用机制。对象与方法 临床研究 研究对象选取 年 月 年 月吉林大学中日联谊医院行超声引导经皮穿刺组织学活检证实为胰腺癌,并行超声引导放射性 粒子植入治疗的 例患者(个病灶)作为研究对象。男 例,女 例,年龄 岁,平均()岁,病灶最大直径 。纳入标准:治疗前配合完成胰腺的超声造影检查;经临床、影像学检查及超声引导下穿刺活检病理诊断为胰腺癌,经评估无法行外科手
5、术切除或不同意行外科手术切除者;患者基础状态尚可,无严重的出凝血功能障碍及感染。排除标准:对超声造影剂过敏者;无法耐受穿刺活检及放射性粒子植入术者。本研究经吉林大学中日联谊医院伦理委员会审批,患者及家属签署知情同意书。超声引导下放射性粒子植入治疗术前行腹部 ,将检查图像输入放射治疗计划系统进行处理,根据病灶勾勒出放射治疗靶区范围,依据放射性粒子的活度计算出所植入粒子的数目,并计划粒空间分布,完成放射性粒子植入治疗方案制定。患者全麻生效后,消毒铺单。行灰阶超声扫查,观察胰腺癌病灶及周围正常胰腺组织,彩色多普勒血流信号观察病灶及周边血供情况,避开血管、胆管及周围重要组织脏器,彩超择点定位,并确定安
6、全的穿刺路径。按治疗计划系统计划,穿刺针插入肿瘤至远端,边植入粒子边退针,直到肿瘤最浅缘,逐层植入。植入结束后,再次复查超声,见肿瘤内粒子分布满意,无放射稀疏区,无明显出血。手术全程实时清洗显示针尖及针道,切勿盲穿。所有患者在超声引导下顺利完成放射性 粒子植入治疗(粒子长径为 、直径为 的钛金属微粒,释放的 射线能量为 ,半衰期为 ,有效照射时间约 ,放射性粒子在人体组织中的半价层约 ,铅板中的半价层约 ,安全且易于防护)。观察指标术前及术后 个月,或 观察肿瘤大小变化,评价放射性 粒子植入的治疗效果。检测患者术前和术后的血糖变化,根据胰腺癌术后临床要求,患者术后空腹血糖需要控制在 ,以保证重
7、要组织器官的能量供国际老年医学杂志 年 月第 卷第 期 ,吴颖,等基于 信号通路探讨放射性 粒子组织间植入治疗胰腺癌的疗效及机制应,不在此范围内视为血糖控制不良。胰腺癌及癌旁组织免疫组织化学(,)染色,胰腺癌组织切片经 烤干后贴于载玻片上,经二甲苯脱蜡处理后,梯度乙醇(乙醇、乙醇和 乙醇)进行水化;双氧水封闭 ,吸干片子周围水分,加入 一抗(稀释)室温条件下孵育 ,清洗 次,每次 ;二抗室温孵育 ,清洗 次,每次 ;加 液室温孵育 ,清洗 次,每次 ;加入 液室温孵育 ,清洗 次,每次 ;经梯度乙醇脱水(乙醇、乙醇和 乙醇),二甲苯透化后,树脂封片。生物信息学分析通过 数据库(:)分析 例胰腺
8、癌组织和 例胰腺组织中 的 水平差异,以差异倍数 作为筛选条件,以 为差异有统计学意义。细胞研究 实验材料 细胞(胰腺癌细胞)购自中国科学院上海细胞库,培养基购自 公司,蛋白定量试剂盒、荧光定量试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司,逆转录试剂盒购自翌圣生物科技(上海)股份有限公司,抗体购自 公司,三磷酸腺苷合酶(,)、细胞色素 氧化 酶 亚 基 (,)、肌动蛋白()和辣根过氧化物酶标记二抗购自 公司。细胞模型采用 生物辐照仪对培养的胰腺癌细胞进行照射,照射的单次照射剂量为 ,源靶距为 ,累积照射剂量率为 ,照射完成后置于二氧化碳培养箱中培养,实验分组包括:未经照射的对照()组、照射后培养 组、
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