CYP3A5、ABCB1和POR基因多态性对肾移植受者他克莫司浓度、剂量及肾功能的长期影响.pdf

基金项目 江苏省卫生健康委员会 年高层次卫生人才“六个一工程”拔尖人才科研项目()江苏省药学会 恒瑞医院药学基金()常州医院协会常州四药医院药学科研基金()常州市科技基础设施建设计划 常州市临床药学重点实验室基金资助项目()作者单位 苏州大学附属第三医院/常州市第一人民医院 药学部江苏 常州 作者简介 刘子琦()女主管药师硕士通信作者 胡楠 :.:./.论著、和 基因多态性对肾移植受者他克莫司浓度、剂量及肾功能的长期影响刘子琦邹素兰钱卿凌静蒋艳胡楠摘要目的:研究、和 基因多态性对术后 个月以上肾移植受者他克莫司()剂量、浓度以及肾功能的影响 方法:选取某院行同种异体肾移植手术的 例患者为研究对象采用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性()分析法和测序法检测患者、和 基因型由于 基因突变导致 酶失活因此将 定义为 非表达者()将 和 定义为 表达者()比较 表达者和非表达者间 血药浓度、剂量、浓度剂量比及肾小球滤过率()的差异 结果:在移植后、年 表达的 血药浓度低于非表达者(.)其剂量在移植后长达 年高于非表达者(.)而浓度剂量比则低于非表达者(.)差异均有统计学意义 、和 基因多态性对 血药浓度、剂量及浓度剂量比均无影响差异无统计学意义(.)在移植后、个月和 年后 非表达者的 高于 表达者差异有统计学意义(.)提示 基因多态性对移植肾功能有长期影响 结论:基因多态性对肾移植受者 的浓度、剂量、浓度剂量比及移植后的肾功能有长期影响关键词 肾移植 基因多态性中图分类号 文献标识码 文章编号()()【】:.:.().()()(/)().:(.).(.)/(.)./(.).(.).:/.【】他克莫司()属于大环内酯类免疫抑制剂通过选择性抑制钙调蛋白依赖的蛋白磷酸酶抑制 细胞的正常功能进而抑制一些细胞因子(如白介素)的形成是目前临床上用于预防和治疗器官移植患者免疫排斥反应的一线治疗药物 一方面 治疗窗窄仅在 /范围内血药浓度过高会引起肝、肾毒性浓度过低则导致排斥反应另一方面患者的生理状态、体重、年龄、种族及合并用药情况等方面存在个体差异从而影响淮海医药 年 月 第 卷 第 期 机体对药物的处置过程为了患者用药安全则必须进行血药浓度监测 随着遗传药理学和基因组学的发展越来越多的研究发现基因多态性是影响 血药浓度的重要因素 经肝脏细胞色素 代谢主要包括 和 其中研究 最 多 的 单 核 苷 酸 基 因 多 态 性()属 本课题组前期研究已经证实了、和基因多态性对肾移植初期患者 浓度剂量有影响且 基因多态性对肾移植患者初期的肾功能有影响 但、和 的基因多态性对 浓度、剂量以及对肾移植受者肾功能长期影响的研究相对较少研究结果尚不统一 因此本文通过对我院肾移植术后长期随诊的患者进行基因分型 探究、和 基因多态性对 血药浓度、剂量、浓度剂量比及肾功能(以 评估)的长期影响 对象与方法.研究对象本研究经我院医学伦理委员会审批同意选取 年 月 日 年 月 日我院接受同种异体肾移植手术且行长期门诊随访的肾移植受者为研究对象 纳入标准:()年龄岁()肾移植术后使用以 为基础免疫抑制药的三联抗排异方案()未联合使用 酶抑制剂(如氟康唑、西咪替丁等)或诱导剂(如苯巴比妥、卡马西平等)排除标准:()行肾移植术 次的患者()三联抗排异方案中从环孢素改用 的患者()术后使用 抑制剂(如质子泵抑制剂、他汀类药物、五味子制剂等)升高 血药浓度的患者 本研究共纳入患者 例其中男 例女 例平均年龄(.)岁肾移植术后中位时间为()个月所有肾移植受者术后均采用、霉酚酸类联合肾上腺糖皮质激素的三联免疫抑制方案均知悉研究内容并签署知情同意书 相关病案信息从我院电子病例系统中收集 浓度与剂量数据从我科自主研发的 数据库中收集.标本采集患者服用 达稳态后于早晨服药前半小时静脉采血 用乙二胺四乙酸二钾抗凝管收集血样标本 取一部分血样用于血药浓度测定剩余标本保存于 冰箱用于基因测序.血药浓度测定及 计算采用酶免疫放大法测定 血药浓度 从西门子医学诊断产品有限公司购入实验所需药物浓度分析仪()、他克莫司检测试剂盒、标准曲线和质控试剂盒 肾小球滤过率根据 公式计算得出.基因型分析首先采用 技术对纳入的研究对象 进行扩增 详细的 提取步骤、引物设计、反应体系和扩增条件见前期 研 究其 次 使 用 日 本公司 测序仪对上一步的 扩增产物进行测序 得到四组(、)基因分型.统计学方法采用 .软件进行数据分析计量资料以 表示采用 检验多组间比较采用单因素方差分析计数资料以表示采用 检验以 .为差异有统计学 意 义 .)研究资料具有群体代表性 见表 表 、基因型和等位基因频率基因单核苷酸多态性基因型例数基因型频率/等位基因例数等位基因频率/().()./().()./()./()./()./().基因多态性对 浓度、剂量及浓度剂量比的影响 非表达者的血药浓度在移植后、年高于表达者(.淮海医药 年 月 第 卷 第 期 基因多态性对 浓度的影响 基因多态性对 剂量的影响 基因多态性对 浓度剂量比的影响图 基因多态性对 浓度、剂量及浓度剂量比的影响.)表达者的 剂量在移植后 年间均高于非表达者(.)表达者浓度剂量比在移植后 年间均低于非表达者(.)差异有统计学意义.基因多态性对 浓度、剂量和浓度剂量比的影响本研究在 分型的基础上研究 和 基因型对 浓度、剂量和浓度剂量比的影响 在 表达者()中 型患者共 例(占.)型共 例(占.)型共 例(占.)型患者共 例(占.)型共 例(占.)型共 例(占.)在 非表达者()中 型患者共 例(占)型共 例(占.)型共 例(占.)型患者共 例(占.)型共 例(占.)型共 例(占.)基因多态性对 组不同 表型患者的 的浓度、剂量及浓度剂量比均无影响差异无统计 学 意 义()见 表 和 基因多态性对 组不同 表型患者的 的浓度、剂量及浓度剂量比均无影响差异均无统计学意义(.)见图、图 表 分型后 、和 基因分型情况 分型例数 分型例数 分型例数分型例数 表达者(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)非表达者(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)注:()内数字为构成比/对 表达者 浓度的影响 对 表达者 剂量的影响 对 表达者 浓度剂量比的影响 对 非表达者 浓度的影响 对 非表达者 剂量的影响 对 非表达者 浓度剂量比的影响图 对 表达者和非表达者 浓度、剂量及浓度剂量比的影响 对 表达者 浓度的影响 对 表达者 剂量的影响 对 表达者 浓度剂量比的影响 对 非表达者 浓度的影响 对 非表达者 剂量的影响 对 非表达者 浓度剂量比的影响图 对 表达者和非表达者 浓度、剂量及浓度剂量比的影响淮海医药 年 月 第 卷 第 期 .基因多态性对 浓度、剂量及浓度剂量比的影响 根据 分型后分别统计 基因多态性对 表达者和非表达者 浓度、剂量及浓度剂量比的影响 根据 分型后分别统计 基因多态性对 表达者和非表达者 浓度、剂量及浓度剂量比的影响 在 表达者()中 型患者共 例(占.)型共 例(占.)型共 例(占)在 非 表 达 者()中 型患者共 例(占.)型共 例(占.)型共 例(占.)见表 基因多态性对 组不同 表型患者的 浓度、剂量及浓度剂量比无影响差异无统计学意义(.)基因多态性对 组不同 表型患者的 浓度、剂量及浓度剂量比无影响差异无统计学意义(.)见图 对 表达者 浓度的影响 对 表达者 剂量的影响 对 表达者 浓度剂量比的影响 对 非表达者 浓度的影响 对 非表达者 剂量的影响 对 非表达者 浓度剂量比的影响图 对 表达者和非表达者 浓度、剂量及浓度剂量比的影响.基因多态性对肾移植受者 水平的影响 非表达者的 水平在移植 个月(.)、个月(.)和 年(.)后高于 表达者差异有统计学意义而在移植 年后 组 水平比较差异无统计学意义(.)图 基因型对肾移植受者 水平的影响 讨论 本课题组前期研究已经证实、和 基因多态性均对 浓度和剂量产生影响并且 基因多态性影响移植初期肾功能(以肌酐和胱抑素 为评价指标)由于 治疗窗窄、个体差异大所以长期门诊随访进行治疗药物和肾功能的监测对于提升肾移植受者的生存率意义重大 我院临床药学研究室开展 已有多年搭载肾移植平台为辅助临床精准用药累计记录近 年随访的肾移植受者 相关数据本研究在前期研究基础上扩大样本量选取 例肾移植患者、和 基因多态性对 浓度、剂量和肾功能长期影响进行分析和探讨 经肝脏细胞色素 代谢主要包括 和 其中研究最多的单核苷酸基因多态性()属 由于第 内含子 位点 突变导致 酶活性降低 基因携带者(非表达者)的酶活性低于 和 (表 达者)使得 非表达者/更高需要的 剂 量 更 少 本 研 究 结 果 与 之 统 一基因多态性对肾移植受者 的剂量、浓度和浓度剂量比有影响在移植后、年 表 达 者 的 血 药 浓 度 显 著 低 于 非表达者同时 表达者浓度剂量比在移植后 个月到 年间多个时间点显著低于非表 达 者 而 、和基因多态性对肾移植受者长期 的浓度、剂量没有显著性影响 一项对南非患者的研究认为 基因多态性影响 剂量需求 等研究也一致认为 基因多态性而不是 基因多态性影响 药动学特征和肾移植受者的剂量需求根据目前国内外学者的研究关于 淮海医药 年 月 第 卷 第 期 和 基因多态性对肾移植受者肾功能的影响尚未得出统一结论 马多玲等研究结果显示 /和 基因多态性对术后 个月以上的肾移植受者肾功能有影响 等研究发现 基因多态性对肾移植术后第 天的 有影响但缺少对移植术 天后 基因多态性与 的相关研究 与之相反的是 等研究则表明 基因多态性并不影响肾移植受者术后 个月、年甚至更长时间的 等研究发现肾移植术后 个月 表达组和非表达组的 相当移植后 个月、年至 年都没有显著差异 本文通过对我院 例肾移植受者的研究发现 基因多态性对肾移植受者、个月和 年的 有相关性与上述研究结论部分一致而 基因多态性对 表达者的长期肾功能无显著影响 影响移植肾功能的因素较多且难以通过单一指标评价而本研究仅计算缺乏其他指标(如肌酐清除率、胱抑素 等)对 和 基因多态性与肾功能的关系进行综合评估相关研究仍待进一步完善综上所述 基因多态性对我院肾移植受者长期的 浓度、剂量及浓度剂量比有显著性影响 非表达者 的血药浓度更高所需的日剂量更低且 基因多态性与患者 水平有相关性 通过对患者进行、和 基因检测并结合 结果共同优化肾移植术后长期的个体化抗排异方案监护患者用药安全参 考 文 献 .():.邢进远.肾移植患者他克莫司血药浓度与 及 基因多态性的关系.郑州:郑州大学.石炳毅袁铭.中国肾移植受者免疫抑制治疗指南(版).器官移植():.胡楠赵金飞蒋艳等.例肾移植患者他克莫司血药浓度监测.医药导报():.().():.马多玲杨云云张文文等.多态性对细胞色素/肾移植受者他克莫司剂量调整血药浓度及肾功能的影响.中国临床药理学杂志():.胡楠曹俊杰钱卿等.和 基因多态性对肾移植患者住院期间他克莫司浓度剂量的影响.中国医院药学杂志():.胡楠汤雨帆钱卿等.和 基因多态性对肾移植患者术后初期他克莫司剂量浓度及肾功能的影响.中南药学():.:.():.():.:.():.():.():.():.()./.():.():.():.卫泽武王学彬张文文等.基因多态性对稳定期肾移植受者他克莫司血药浓度及肾功能的影响.中国药房():.(收稿日期:)本文编辑:王艳淮海医药 年 月 第 卷 第 期