草莓脱毒苗工厂化优化生产方法.pdf
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1、SHANGHAI VEGETABLES上海蔬菜摘要:利用组织培养技术培育草莓脱毒苗是恢复草莓优良性状、防治草莓病毒病、提高草莓产量和品质的有效途径。草莓脱毒苗工厂化生产应综合考虑生产效率、脱毒效率和生产成本,以获得较高的经济效益。为验证用茎尖脱毒培养、增殖和生根培养方法培育草莓脱毒苗的效果,作者开展了相关试验。试验结果表明,采用长度为0.20.5 mm的茎尖、1/2 MS培养基培育草莓脱毒苗,虽然成活率较低,但脱毒率较高,既可简化脱毒环节、保证芽苗的增殖倍数、提高生根效果,又可降低生产成本,在保证一定的脱毒率和成活率的同时提高生产效率。关键词:草莓;组织培养;脱毒技术;工厂化育苗草莓(Frag
2、aria ananassa Duch.)为蔷薇科草莓属多年生草本植物,适应性强,果实柔软多汁、甜酸适口、营养丰富,具有较高的经济价值。目前草莓苗主要用匍匐茎进行无性繁殖,但多年的无性繁殖会使病毒累积在草莓植株体内,导致草莓病毒病频发、品种退化严重。利用组织培养技术培育草莓脱毒苗是恢复草莓优良性状、防治草莓病毒病、提高草莓产量和品质的有效途径。草莓脱毒苗的生产成本高,且脱毒技术复杂、脱毒周期长,给工厂化生产带来了难度。简化、优化草莓脱毒苗工厂化生产的环节,如直接采用茎尖脱毒培养1,同时在增殖培养和生根培养阶段降低培养基用量,可降低脱毒苗的培养成本,促进草莓脱毒苗的规模化生产。为验证用茎尖脱毒培养
3、、增殖和生根培养方法培育草莓脱毒苗的效果,我们于2022年4月中旬开展了相关试验,现将试验结果总结如下。1材料与方法1.1试验材料供试材料为红颜草莓苗的匍匐茎茎尖,由酒泉龙德盛农业发展有限责任公司提供。1.2试验方法试验设在酒泉职业技术学院生物工程学院组培室。1.2.1茎尖脱毒培养4月是草莓匍匐茎生长旺盛时期,选晴天上午取材。从无病健壮的草莓植株上剪取匍匐茎顶芽嫩梢35 cm,用自来水冲洗干净后,将匍匐茎顶芽嫩梢用70%酒精浸泡30 s,再用2%次氯酸钠溶液消毒15 min,然后用无菌水冲洗6遍,最后将匍匐茎顶芽嫩梢置于已灭菌的滤纸上,吸干表面水分。在解剖镜下用解剖针剥去嫩梢外层幼叶,用已消毒
4、的解剖刀快速切取3个不同长度带12个叶原基生长点的茎尖,茎尖长分别为0.20.5 mm、0.50.8 mm、0.81.0 mm,即3个处理。将茎尖立即接种到无菌培养基(MS+6BA 0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L)培养,培养基中添加30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂粉,将培养基pH值调至5.755.85后分装到培养瓶中,高温高压灭菌后待用。每个处理接种10瓶,每瓶接种3个茎尖。接种后将培养瓶放入人工气候箱,在温度25、黑暗条件下培养5 d,然后在温度25、光照强度2 000 lx、光照时间10 h/d条件下培养25 d。培养期间观察草莓苗的生长情况,统计成活率和脱毒率。脱毒率(%
5、)=脱除病毒的叶片数/检测叶片数100 瓜果花草 草莓脱毒苗工厂化优化生产方法伊万伟1汤生兵2(1.酒泉职业技术学院,甘肃 酒泉 735000;2.酒泉龙德盛农业科技有限公司,甘肃 酒泉 735000)2023(4):5153-51SHANGHAI VEGETABLES上海蔬菜1.2.2增殖培养以培养基不同用量,即 MS、1/2 MS、1/3 MS2为 3 个处理进行草莓增殖培养。在基础培养基中添加0.8 mg/L 6BA、0.01 mg/L NAA、30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂粉,将培养基pH值调至5.755.85后分装到培养瓶中,高温高压灭菌后待用。将培养瓶放在温度25、光照强度2
6、 000 lx、光照时间14 h/d条件下培养。培养期间观察草莓芽的增殖情况。1.2.3生根培养以培养基不同用量,即 MS、1/2 MS、1/3 MS2为 3 个处理进行草莓生根培养。在基础培养基中添加0.1 mg/L NAA、30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂粉,将培养基pH值调至5.755.85后分装到培养瓶中,高温高压灭菌后待用。培养期间观察草莓苗的生根情况。2结果与分析2.1茎尖大小对草莓苗成活率、脱毒率的影响茎尖大小对草莓苗成活率、脱毒率的影响见表1。表1茎尖大小对草莓苗成活率、脱毒率的影响处理茎尖长度0.20.5 mm茎尖长度0.50.8 mm茎尖长度0.81.0 mm培养株数3
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