LncRNA TUC338通过激活EGFR_PI3K_AKT信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭.pdf
《LncRNA TUC338通过激活EGFR_PI3K_AKT信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《LncRNA TUC338通过激活EGFR_PI3K_AKT信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、论著L n c R N A T U C 3 3 8通过激活E G F R/P I 3 K/A K T 信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭*夏航彪 赵界 王述红(遂宁市中心医院呼吸与危重症医学科,四川 遂宁 6 2 9 0 0 0)【摘要】目的 探讨长链非编码R NA TU C 3 3 8(l n c R NA TU C 3 3 8)对非小细胞肺癌(N S C L C)细胞增殖、迁移、侵袭及表皮生长因子受体(E G F R)/磷酸肌醇3激酶(P I 3 K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AK T)通路的影响。方法 收集2 0 1 9年7月2 0 2 1年6月我院胸外科手术切除的3 7例N S C
2、 L C患者肺癌组织与癌旁组织标本,R T-q P C R检测组织标本及N S C L C细胞中l n c R NA TU C 3 3 8表达;对N C I-H 1 5 7细胞进行干预,将s i-TU C 3 3 8、s i-N C、p c D NA-TU C 3 3 8、p c D NA-N C质粒转染细胞及E G F R与P I 3 K双重抑制剂MT X-2 1 1(MT X-2 1 1)、p c D NA-TU C 3 3 8与MT X-2 1 1共同处理细胞,C C K-8法检测细胞增殖,T r a n s w e l l小室法检测细胞迁移与侵袭,W e s t e r n b l o
3、 t检测细胞周期蛋白D 1(c y c l i n D 1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白及E G F R、P I 3 K、AK T相关蛋白表达。结果 L n c R NA TU C 3 3 8在肺癌组织与细胞中高表达;抑制l n c R NA TU C 3 3 8表达可显著抑制N C I-H 1 5 7细 胞增 殖、迁移 与 侵袭 及E G F R/P I 3 K/AK T通 路 激活(P0.0 5);过表达l n c R NA TU C 3 3 8可促进N C I-H 1 5 7细胞增殖、迁移与侵袭及E G F R/P I 3 K/AK T激活(P0.0 5)。结论 L
4、n c R NA TU C 3 3 8在肺癌中呈高表达,可能通过激活E G F R/P I 3 K/AK T信号通路促进肺癌N C I-H 1 5 7细胞增殖、迁移与侵袭。【关键词】长链非编码R NA TU C 3 3 8;表皮生长因子受体;肺癌细胞;增殖;迁移与侵袭【中图分类号】R 7 3 4.2 【文献标志码】A D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.0 9.0 0 9 基金项目:四川省卫生和计划生育委员会资助项目(1 7 P J 0 3 7)通讯作者:赵界,E-m a i l:i 6 2 6 g z 1 6 3.c o m
5、引用本文:夏航彪,赵界,王述红.L n c R NA TU C 3 3 8通过激活E G F R/P I 3 K/AK T 信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭J.西部医学,2 0 2 3,3 5(9):1 2 9 2-1 2 9 7.D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.0 9.0 0 9L n c R N A T U C 3 3 8 p r o m o t e s t h e p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n o f l u
6、n g c a n c e r c e l l s b y a c t i v a t i n g E G F R/P I 3 K/A K T s i g n a l i n g p a t h w a yX I A H a n g b i a o,Z H A O J i e,WA N G S h u h o n g(D e p a r t m e n t o f R e s p i r a t o r y a n d C r i t i c a l C a r e M e d i c i n e,S u i n i n g C e n t r a l H o s p i t a l,S u
7、i n i n g 6 2 9 0 0 0,S i c h u a n,C h i n a)【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t s a n d r e g u l a t o r y m e c h a n i s m s o f l o n g n o n-c o d i n g R NA(l n c R NA)TU C 3 3 8 o n t h e p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s
8、i o n a n d e p i d e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r(E G F R)/p h o s p h o i n o s i t i d e 3 k i n a s e(P I 3 K)/s e r i n e/t h r e o n i n e p r o t e i n k i n a s e(AK T)o f n o n-s m a l l c e l l l u n g c a n c e r c e l l s.M e t h o d s F r o m J u l y 2 0 1 9 t o J u n
9、 e 2 0 2 1,l u n g c a n c e r t i s s u e a n d p a r a c a n c e r o u s t i s s u e s p e c i m e n s r e s e c t e d f r o m 3 7 p a t i e n t s w i t h N S C L C b y t h o r a c i c s u r-g e r y i n S u i n i n g C e n t r a l H o s p i t a l w e r e c o l l e c t e d.R T-q P C R w a s u s e d
10、 t o d e t e c t t h e e x p r e s s i o n o f l n c R NA TU C 3 3 8 i n t i s-s u e s p e c i m e n s a n d N S C L C c e l l s.N C I-H 1 5 7 c e l l s w e r e i n t e r v e n e d,a n d s i-TU C 3 3 8,s i-N C,p c D NA-TU C 3 3 8,p c D NA-N C p l a s m i d s w e r e t r a n s f e c t e d i n t o c e
11、 l l s.E G F R a n d P I 3 K d u a l i n h i b i t o r MT X-2 1 1 i n h i b i t o r(MT X-2 1 1).p c D NA-TU C 3 3 8 a n d MT X-2 1 1 w e r e c o-t r e a t e d C e l l s.C C K-8 a s s a y w a s u s e d t o d e t e c t c e l l p r o l i f e r a t i o n.T r a n s w e l l c h a m b e r a s-s a y w a s u
12、 s e d t o d e t e c t c e l l m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n.W e s t e r n b l o t w a s u s e d t o d e t e c t c y c l i n D 1(c y c l i n D 1),m a t r i x m e t a l-l o p r o t e i n a s e 2(MMP-2),MMP-9 p r o t e i n a n d E G F R.T h e p h o s p h o i n o s i t i d e 3 k i n a s e(P I
13、 3 K),s e r i n e/t h r e o n i n e p r o t e i n k i n a s e(AK T)r e l a t e d p r o t e i n e x p r e s s i o n w e r e d e t e c t e d r e s p e c t i v e l y.R e s u l t s L n c R NA TU C 3 3 8 w a s h i g h l y e x p r e s s e d i n l u n g c a n c e r t i s s u e s a n d c e l l s.I n h i b i
14、 t i n g t h e e x p r e s s i o n o f l n c R NA TU C 3 3 8 c o u l d s i g n i f i c a n t l y i n h i b i t t h e p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n o f N C I-H 1 5 7 c e l l s a n d t h e a c t i v a t i o n o f E G F R/P I 3 K/AK T p a t h w a y(P0.0 5).O v e r-e
15、x p r e s s i o n 2921西部医学 2 0 2 3年9月 第3 5卷第9期 M e d J W e s t C h i n a,S e p t e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.9o f l n c R NA TU C 3 3 8 c o u l d p r o m o t e N C I-H 1 5 7 c e l l s p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n a n d E G F R/P I 3 K/AK T a c t i v a-t i o n
16、(P0.0 5).C o n c l u s i o n L n c R NA TU C 3 3 8 i s h i g h l y e x p r e s s e d i n l u n g c a n c e r,w h i c h m a y p r o m o t e t h e p r o l i f e r a-t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v a s i o n o f l u n g c a n c e r N C I-H 1 5 7 c e l l s b y a c t i v a t i n g t h e E G F R/P I
17、 3 K/AK T s i g n a l i n g p a t h w a y.【K e y w o r d s】L o n g n o n-c o d i n g R NA TU C 3 3 8;E p i d e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r;L u n g c a n c e r c e l l s;P r o l i f e r a t i o n;M i g r a t i o n a n d i n v a s i o n 肺癌是发病率与死亡率最高的恶性肿瘤,其中主要病 理 类 型 为 非 小 细 胞 肺 癌(N
18、 o n-s m a l l c e l l l u n g c a n c e r,N S C L C),约占肺癌患者8 5%以上,尽管肺癌的治疗手段取得一定进步,仍有部分患者发生耐药、复发转移等问题,因此研究肺癌的发生发展与转移的分子机制具有重要意义1-2。长链非编码R NA(l o n g n o n-c o d i n g R NA,l n c R NA)为内源性非编码R NA,研究显示,多种l n c R NA在肺癌中异常表达,与肺癌患者预后及临床病理特征、侵袭和转移有关3-5。L n-c R NA TU C 3 3 8为新发现的l n c R NA,研究显示,它在前列腺癌、肺癌、宫
19、颈癌等多种肿瘤中表达上调6-8,发挥促癌基因的作用,但L n c R NA TU C 3 3 8在N S C L C中的作用机制尚不清楚。表皮生长因子受体(E p i d e r-m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r,E G F R)可调控肿瘤细胞增殖,在肺癌中高表达,与肿瘤的恶性转化有关9,且E G F R高表达可激活磷酸肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋 白 激 酶(P h o s p h o i n o s i t i d e 3-k i n a s e/s e r i n e/t h r e o-n i n e p r o t e i n
20、 k i n a s e,P I 3 K/AK T)通路,在肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等过程中发挥重要作用1 0-1 1。本研究将探讨L n c R NA TU C 3 3 8对肺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制,现报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料1.1.1 病例 收集2 0 1 9年7月2 0 2 1年6月我院胸外科手术切除的3 7例N S C L C患者肺癌组织与癌旁组织标本,均为肺腺癌,患者手术前未经任何抗肿瘤治疗,其中男性1 5例,女性2 2例,年龄3 27 5岁。取得标本在液氮罐中长期保存,本研究得到本院伦理委员会的批准(批准号:1 9 0 5-0 4),患者知情同意
21、并签署受试者签署的知情同意书。1.1.2 主 要 材 料 人 肺 腺 癌 细 胞 系N C I-H 1 5 7、A 5 4 9、N C I-H 1 2 9 9、HC C 8 2 7及 正 常 肺 上 皮 细 胞 系B E A S-2 B(中国科学院细胞库);R PM I 1 6 4 0培养基(G i b c o公司);F B S、DM S O(北京S o l a r b i o公司);L i-p o f e c t a m i n e 3 0 0 0转染试剂(S i g m a-A l d r i c h公司);抑制l n c R N A T U C 3 3 8表达(s i-T U C 3 3
22、 8)及阴性对照(s i-N C)质粒,l n c R N A T U C 3 3 8过表达(p c D N A-T U C 3 3 8)及阴性对 照(p c D N A-N C)质粒、以 及R T-q P C R引 物(G e n e P h a r m a公 司);E G F R与P I 3 K双 重 抑 制 剂MT X-2 1 1(百奥 莱博);C C K-8检测试剂盒、E C L试剂、R I P A裂解液(江苏凯基生物技术股份有限公司);兔抗人c y c l i n D 1(a b 1 6 6 6 3)、MMP-2(a b 9 2 5 3 6)、-a c-t i n抗 体(a b 8
23、2 2 7)、MMP-9(a b 7 6 0 0 3)、p-E G F R(a b 4 0 8 1 5)、E G F R(a b 5 2 8 9 4)、p-P I 3 K(a b 2 7 8 5 4 5)、P I 3 K(a b 3 2 0 8 9)、p-AK T(a b 3 8 4 4 9)、AK T(a b 8 8 0 5)单克隆抗体(英国A b c a m公司)。1.2 方法1.2.1 细胞的分组及处理 取对数增殖期的N C I-H 1 5 7细胞,以每孔21 05个细胞接种于6孔板中,细胞汇合约8 5%时,将N C I-H 1 5 7细胞分为对照(c o n-t r o l)组、s i
24、-TU C 3 3 8组、s i-N C组、p c D NA-TU C 3 3 8、p c D NA-N C组、MT X-2 1 1组 及p c D NA-TU C 3 3 8+MT X-2 1 1组,进行质粒转染,转染后将细胞在3 7 C、5%C O2培养箱中培养4 8 h后,R T-q P C R检测各组N C I-H 1 5 7细胞中l n c R NA TU C 3 3 8表达,鉴定是否转染成功。1.2.2 R T-q P C R检 测l n c R NA TU C 3 3 8水 平 R NA提取试剂提取总R NA,紫外分光光度计测量R NA纯度及含量,以R NA作为模板,合成c D
25、NA后,采用R T-q P C R检测l n c R NA TU C 3 3 8相对表达量,以G A P DH为 内 参,采 用2-C t法 计 算l n c R NA TU C 3 3 8相对表达量。L n c R NA TU C 3 3 8上游引物(5 -3):G G T GAGAG G G GAT G T T C AG T,下游引物(5 -3):T G G G T GAAAT GAG G T T G;G A P DH上游引物(5 -3):C T G G G C T A C A C T GAG C A C C,下游引物(5 -3):AAG T G G T C G T T GAG G G C
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- LncRNA TUC338通过激活EGFR_PI3K_AKT信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭 TUC338 通过 激活 EGFR_PI3K_AKT 信号 通路 促进 肺癌 细胞 增殖 迁移 侵袭
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。
链接地址:https://www.zixin.com.cn/doc/523391.html