miR-155通过调控PKG1影响滋养细胞生物学功能并参与子痫前期的机制探讨.pdf
《miR-155通过调控PKG1影响滋养细胞生物学功能并参与子痫前期的机制探讨.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《miR-155通过调控PKG1影响滋养细胞生物学功能并参与子痫前期的机制探讨.pdf(7页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、Tianjin Med J,September 2023,Vol.51 No.9miR-155通过调控PKG1影响滋养细胞生物学功能并参与子痫前期的机制探讨岳巾晶1,曾莹1,郭晓珮1,董越1,姬若楠1,彭瑞2,罗晓华1摘要:目的探究miR-155和环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶1(PKG1)在子痫前期患者胎盘组织中的表达及miR-155在核因子(NF)-B的介导下通过抑制PKG1对滋养细胞HTR-8/SVneo功能的影响。方法收集剖宫产分娩的正常产妇(NPE组)以及子痫前期产妇(PE组)的胎盘各20个,体外培养滋养细胞HTR-8/SVneo,分为NC组、mimics组、inhibitor组、siRN
2、A NC组、PKG1 siRNA组、siRNA+inhibitor组;用NF-B抑制剂PDTC处理细胞,分为Control组、PDTC组、PDTC+NC组、PDTC+mimics组。采用qPCR检测胎盘和滋养细胞HTR-8/SVneo中miR-155和PKG1 mRNA的表达;Western blot检测PKG1蛋白的表达;分别采用CCK-8法、Transwell法、流式细胞术检测细胞的增殖、迁移、凋亡能力。结果PE组胎盘组织中miR-155的表达升高,而PKG1的表达降低(P0.05)。体外实验表明,与NC组相比,miR-155 mimics组中PKG1的表达降低,滋养细胞迁移、增殖能力减弱
3、,凋亡能力增强,miR-155 inhibitor组中PKG1表达则升高,滋养细胞迁移、增殖能力增强,凋亡能力减弱(P0.05);与Control组相比,PDTC组miR-155的表达降低,滋养细胞迁移、增殖能力增强,凋亡能力减弱(P0.05)。结论miR-155在子痫前期中表达上调,并且可在NF-B的介导下通过下调PKG1影响滋养细胞的增殖、迁移和凋亡。关键词:先兆子痫;细胞运动;细胞增殖;细胞凋亡;NF-B;miR-155;PKG1;滋养细胞中图分类号:R714.244文献标志码:ADOI:10.11958/20221869基金项目:河南省科技攻关项目(202102310473)作者单位:
4、1郑州大学第三附属医院妇产科(邮编450000),2科研办公室作者简介:岳巾晶(1997),女,硕士在读,主要从事子痫前期的诊断和治疗方面研究。E-mail:通信作者E-mail:L细胞与分子生物学cells as a selective topoisomerase inhibitorJ.NaunynSchmiedebergs Arch Pharmacol,2022,395(1):65-76.doi:10.1007/s00210-021-02172-5.12 周小剑,李玉华,唐湘,等.乌头碱抑制食管癌EC-1细胞增殖与侵袭并诱导其凋亡作用研究 J.中国医药生物技术,2019,14(4):335
5、-340.ZHOU X J,LI Y H,TANG X,et al.Aconitineinhibits the proliferation and invasion while induces the apoptosis ofesophagealcancerEC-1cells J.ChineseMedicinalBiotechnology,2019,14(4):335-340.doi:10.3969/j.issn.1673-713X.2019.04.008.13 WANG X,LIN Y,ZHENG Y.Antitumor effects of aconitine inA2780 cells
6、via estrogen receptor -mediated apoptosis,DNAdamage and migration J.Mol Med Rep,2020,22(3):2318-2328.doi:10.3892/mmr.2020.11322.14 JI B L,XIA L P,ZHOU F X,et al.Aconitine induces cell apoptosisin human pancreatic cancer via NF-B signaling pathway J.EurRev Med Pharmacol Sci,2016,20(23):4955-4964.15 柯
7、东平,朱金祥,毛俊倩,等.miR-181d-5p对人结肠癌细胞凋亡的影响及机制 J.贵州医科大学学报,2019,44(7):814-820.KE D P,ZHU J X,MAO J Q,et al.Effect and mechanism ofmicroRNA-181d-5p on apoptosis of human colon cancer cells J.Journal of Guizhou Medical University,2019,44(7):814-820.doi:10.19367/ki.1000-2707.2019.07.014.16 DONG X,LIU Y,DENG X,
8、et al.C1GALT1,Negatively regulatedby miR-181d-5p,promotes tumor progression via upregulatingRAC1 in lung adenocarcinomaJ.Front Cell Dev Biol,2021,9:707970.doi:10.3389/fcell.2021.707970.17 KHALIL S,FABBRI E,SANTANGELO A,et al.miRNA arrayscreening reveals cooperative MGMT-regulation between miR-181d-5
9、p and miR-409-3p in glioblastoma J.Oncotarget,2016,7(19):28195-28206.doi:10.18632/oncotarget.8618.18 李祥双,于海霞,叶燕珍,等.miR-181d-5p对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及机制 J.山东医药,2022,62(22):42-46.LI XS,YU H X,YE Y Z,et al.Influence and mechanism of miR-181d-5p on radiosensitivity of cervical cancer cellsJ.ShandongMedical Jour
10、nal,2022,62(22):42-46.doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2022.22.010.19 NI J,CHEN L,LING L,et al.MicroRNA-196a promotes cellproliferation and inhibits apoptosis in human ovarian cancer bydirectly targeting DDX3 and regulating the PTEN/PI3K/AKTsignaling pathwayJ.Mol Med Rep,2020,22(2):1277-1284.doi:10.3892
11、/mmr.2020.11236.20 VAN DER POL C C,MOELANS C B,MANSON Q F,et al.Cytoplasmic DDX3 as prognosticator in male breast cancerJ.Virchows Arch,2021,479(4):647-655.doi:10.1007/s00428-021-03107-4.21 HUA Q,LIU Y,LI M,et al.Tobacco-related exposure upregulatesCirc_0035266 to exacerbate inflammatory responses i
12、n humanbronchial epithelial cellsJ.Toxicol Sci,2021,179(1):70-83.doi:10.1093/toxsci/kfaa163.(2022-11-14收稿2023-03-14修回)(本文编辑陈丽洁)928天津医药 2023 年 9 月第 51 卷第 9 期子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期特有的疾病,其特征是妊娠20周后出现蛋白尿和高血压。PE的发病率为2%8%1,是导致孕产妇及新生儿死亡的主要原因之一,占全球孕产妇死亡的 10%15%2。目前普遍认为胎盘滋养层细胞侵袭异常、血管内皮功能受损与PE的发病密切有关3,但具体发
13、病机制仍不清楚,缺少有效的治疗措施。微小RNA(microRNA,miR)是一类小分子非编码RNA,长度约22个核苷酸4。研究表明,miRNA的表达失调可能与PE的发生有关5。本团队前期研究发现,miR-155在子痫前期患者胎盘组织中高表达,并且可抑制滋养细胞的增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡和炎性反应6。已有研究表明,miR-155可通过与一氧化氮(NO)/环磷酸鸟苷(cGMP)通路的主要下游分子环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶1(cGMP-dependentprotein kinase 1,PKG1)的 3-非翻译区(UTR)互补结合,从而负向调节血管平滑肌细胞(VSMC)中PKG1的表达,进而导致V
14、SMC 表型转换和功能障碍7。然而,该通路在PE和滋养细胞中的作用尚未被证实,笔者推测miR-155可能通过调节PKG1参与PE的进展。本研究旨在探究miR-155/PKG1轴对PE的影响以及对滋养细胞生物学功能的调节机制。1材料与方法1.1材料选择2020年6月2021年12月于郑州大学第三附属医院剖宫产分娩的PE产妇20例作为PE组,选择同期剖宫产分娩的正常产妇20例作为NPE组。PE的诊断标准参考妊娠期高血压疾病诊治指南(2020)8。2组产妇均排除双胎及多胎妊娠、慢性肝肾疾病、妊娠期糖尿病、传染性或代谢性疾病等。本研究经本院伦理委员会批准(伦理号:2022-238-01),所有研究对象
15、均签署知情同意书。1.2主要试剂与仪器人绒毛膜滋养层细胞HTR8/SVneo购自上海中国科学院细胞库;Trizol试剂购自日本TAKARA公司;Lipofectaimine 2000、Transwell 小室购自美国 ThermoFisher Scientific 公司;miR-155 mimic、inhibitor、NC、PKG1siRNA以及PKG1 siRNA NC购自上海吉玛制药技术有限公司;PDTC购自英国Abcam公司;荧光定量PCR(qPCR)试剂盒购自德国DBI公司;PKG1抗体购自美国Boster公司;BCA蛋白定量试剂盒购自南京凯基生物发展有限公司;CCK-8试剂盒购自上海
16、碧云天生物技术有限公司;Annexin V-FITC/PI试剂盒购自南京诺唯赞生物科技股份有限公司;PCR扩增仪(Mx3000P)购自杭州晶格科学仪器有限公司。MiR-155 affects the biological functions of trophoblastic cells through regulatingcGMP-dependent kinase 1 and is involved in the mechanism of preeclampsiaYUE Jinjing1,ZENG Ying1,GUO Xiaopei1,DONG Yue1,JI Ruonan1,PENG Rui
17、2,LUO Xiaohua11 Department of Gynaecology and Obstetrics,2 Department of Scientific Research Office,the Third Affiliated Hospital ofZhengzhou University,Zhengzhou 450000,ChinaCorresponding AuthorE-mail:LAbstract:ObjectiveTo investigate the expression levels of miR-155 and cGMP-dependent protein kina
18、se 1(PKG1)in placental tissue of patients with preeclampsia,and the effect of miR-155 on the function of trophoblasts HTR-8/SVneo by inhibiting PKG1 under the mediation of nucleus factor kappa B(NF-B).MethodsTwenty placentas werecollected from normal pregnant women and pre-eclampsia pregnant women w
19、ho delivered by cesarean section.In vitrotrophoblasts HTR-8/SVneo were cultured and divided into the NC group,the mimics group,the inhibitor group,thesiRNA NC group,the PKG1 siRNA group and the siRNA+inhibitor group.Cells were treated with NF-B inhibitorPDTC and divided into the control group,the PD
20、TC group,the PDTC+NC group and the PDTC+mimics group.Real-time quantitative polymerase chain reaction(qPCR)was performed to detect the expression of miR-155 and PKG1mRNA in placentas and HTR-8/SVneo cells.Western blot assay was performed to measure the level of PKG1 protein.The cell proliferation,mi
21、gration and apoptosis were assessed by CCK-8 assay,Transwell assay and flow cytometry.ResultsThe expression of miR-155 was significantly upregulated in placental tissue of the PE group,while theexpression of PKG1 decreased significantly(P0.05).The vitro experiments showed that compared with the NC g
22、roup,the expression of PKG1 was significantly reduced in the miR-155 mimics group(P0.05).The migration andproliferation ability of trophoblast was significantly weakened,the apoptotic ability was significantly enhanced(P0.05).The expression of PKG1 was significantly increased in the miR-155 inhibito
23、r group,the migration andproliferation ability of trophoblast was significantly enhanced,and the apoptotic ability was significantly weakened.Compared with the control group,the expression of miR-155 was significantly reduced in the PDTC group,the migrationand proliferation ability of trophoblast wa
24、s significantly enhanced,and the apoptotic ability was significantly weakened(P0.05).ConclusionResults indicate that the expression of miR-155 is upregulated in preeclampsia,and can affectproliferation,migration and apoptosis of trophoblast cells by down-regulating PKG1 mediated by NF-B.Key words:pr
25、e-eclampsia;cell movement;cell proliferation;apoptosis;NF-kappa B;miR-155;PKG1;trophoblast929Tianjin Med J,September 2023,Vol.51 No.91.3研究方法1.3.1标本的收集与处理所有标本均在剖宫产胎盘娩出后5 min内收集,避开钙化灶及出血区域,于胎盘母面不同位置剪取胎盘组织,置于无菌的EP管中,并迅速置于-80 冰箱中保存备用。1.3.2细胞分组转染将体外培养的HTR-8/SVneo细胞分为6组:NC组(转染miR-155 NC)、mimics组(转染miR-155
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- miR 155 通过 调控 PKG1 影响 滋养 细胞生物学 功能 参与 前期 机制 探讨
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。