不同引进希腊品种油橄榄的抗寒性评价.pdf
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1、Vol.41 No.2Jun.2023第 41 卷 第 2 期2023 年 6 月经 济 林 研 究 Non-wood Forest Research收稿日期:2022-09-05基金项目:甘肃省林业和草原科技创新项目“油橄榄种质资源抗寒性评价及筛选”(甘林规函2019418 号)和“特色经济林优良品种引种试验与示范”(Kjcx202005);陇南市科技计划项目“油橄榄遗传多样性分析及核心种质构建”(2022-LYGL-03)。第一作者:戚建莉(),高级工程师。通信作者:姜成英(),研究员。引文格式:戚建莉,吴文俊,姜成英,等.不同引进希腊品种油橄榄的抗寒性评价 J.经济林研究,2023,41
2、(2):49-57.QI J L,WU W J,JIANG C Y,et al.Evaluation of cold resistance of different introduced Greece olive varietiesJ.Non-wood Forest Research,2023,41(2):49-57.不同引进希腊品种油橄榄的抗寒性评价戚建莉,吴文俊,姜成英,赵梦炯,陈炜青(甘肃省林业科学研究院,国家林业草原油橄榄工程技术研究中心,甘肃 兰州 730020)摘 要:【目的】为亚热带干热河谷区选育耐低温的油橄榄品种提供参考。【方法】以引进的 6 个希腊油橄榄品种的叶片为试材,对其
3、分别进行 5、0、-5、-10、-15、-20 低温处理,测定与抗寒性相关的生理指标,采用Logistic 方程,求出半致死温度,并结合冻害指数,对 6 个油橄榄品种的抗寒性进行综合评价。【结果】在不同低温梯度胁迫下,各油橄榄品种叶片的相对电导率呈现出不同的变化趋势,其中 Frantoio 叶片的相对电导率呈现出先上升、后下降、再上升的 S 形变化曲线,其他 5 个品种叶片的相对电导率呈现持续上升趋势。各油橄榄品种的半致死温度为-15.371 -8.770。当温度降至-20 时,各品种叶片的可溶性糖含量达到峰值;各品种叶片的丙二醛含量随处理温度的降低呈先升、后降的趋势,在-10 时达到高峰值;
4、随着处理温度的降低,不同油橄榄品种叶片的可溶性蛋白含量呈先降、后升、再降的趋势;各品种叶片的脯氨酸含量在-15 时达到峰值。随胁迫温度降低,各品种叶片的相对含水量、叶绿素含量总体呈逐渐下降的趋势,在-20 时降至最低值。【结论】6 个引进油橄榄品种按照抗寒性由强到弱排序依次为 San Rancesco、Sevillano、Psylia、Frantoio、Verilikada、Valanolia,即 San Rancesco、Sevillano、Psylia 的抗寒能力较强,可作为较高海拔或较高纬度地区栽培推广的品种。关键词:油橄榄;抗寒性;生理指标;相对电导率;半致死温度中图分类号:S601
5、文献标志码:A 文章编号:10038981(2023)02004909Evaluation of cold resistance of different introduced Greece olive varietiesQI Jianli,WU Wenjun,JIANG Chengying,ZHAO Mengjiong,CHEN Weiqing(National Forestry Grassland Olive Engineering Technology Research Center,Gansu Academy of Forestry Sciences,Lanzhou 730020,Ga
6、nsu,China)Abstract:【Objective】To provide theoretical basis for breeding olive varieties with low temperature tolerance in subtropical dry and hot river valleys.【Method】The leaves of six olive varieties introduced from Greece were used as test materials,and the leaves were treated with low temperatur
7、e at 5,0,-5,-10,-15,-20,respectively,and the physiological indexes related to cold resistance were determined.At the same time,the semi-lethal temperature(LT50)was calculated by Logistic equation,and the freezing damage index was combined.The cold resistance of six olive cultivars was evaluated comp
8、rehensively.【Result】Under different low temperature gradient stress,the relative electrical conductivity of each olive variety showed a development trend of different amplitude,in which Frantoio showed an S-shaped curve of first increasing and then decreasing and then increasing,while the electrical
9、 conductivity of the other five varieties showed a continuous increasing trend.The semi-lethal temperature range of olive varieties was from-15.371 to-8.770.When the temperature dropped to-20,the soluble sugar content of each variety reached the peak.The malondialdehyde content of each variety incre
10、ased first and then decreased with the decrease of treatment temperature,and reached the peak value at-10.With the decrease of treatment temperature,the soluble protein content of different olive varieties decreased first and then increased and then decreased.The proline content of all Doi:10.14067/
11、ki.1003-8981.2023.02.006http:/50第 2 期戚建莉,等:不同引进希腊品种油橄榄的抗寒性评价油橄榄 Olea europaea 是木犀科 Oleaceae 木犀榄属 Olea 中果实含有可食用油的物种,是著名的木本油料树种,喜长日照干热的亚热带气候,具有较高的经济价值,在地中海国家已经种植了大约 6 000 年1-3。截至 2021 年底,甘肃省陇南市油橄榄树种植面积约 5 万 hm2,年产初榨橄榄油 6 200 t,是我国最大的橄榄油生产地。油橄榄已成为甘肃陇南山区农民的主要经济来源之一。但我国北方冬季寒冷干燥,易发生冻害,严重时还会导致植物死亡4,成为油橄榄产业
12、发展的限制性因素。为进一步扩大油橄榄在我国的种植区域和规模,耐低温冻害品种的选育显得尤为迫切和必要。因此,选育抗寒性强的油橄榄品种对扩大种植区域、推动油橄榄产业发展具有重要意义5。近年来,诸多学者在植物的抗寒性测定等方面进行了大量研究,应用电导法测定沙棘6、草 莓7、榛子8、桃9等 1 年生休眠枝抗寒性的文献报道较多。Petruccelli 等10经研究分析,发现低于适应极限的低温会影响橄榄树的新陈代谢、活力、生理和生产力。刘平等11采用电导法并结合 Logistic 方程来估测植物的抗寒性,结果表明植物细胞膜透性越大,电导率越高12-14。不同植物的相对电导率及由其拟合的低温半致死温度出现明
13、显变化拐点时所处的温度各不相同。郭燕等15经研究认为,以电导法测定的植物抗寒性结果最为准确。令凡等16、王让军等17对陇南油橄榄主栽品种的抗寒性曾有一些研究报道。陈炳林等18及陈宪初19认为采用电解质渗出率作为油橄榄的抗冻生理指标是可行的,选择抗寒性强的品种对我国油橄榄引种栽培具有普遍意义。基于此,本试验中以自希腊引进的 6 个品种为试材,通过调查油橄榄田间冻害情况,并利用人工模拟不同低温处理,深入研究油橄榄叶片的电导率及可溶性糖、丙二醛、叶绿素、水、可溶性蛋白、脯氨酸等含量的变化,结合半致死温度,综合评价引进油橄榄品种在栽培地的抗寒性表现,旨在为筛选陇南高海拔地区适宜栽植的抗寒性油橄榄品种提
14、供参考,从而扩大油橄榄的种植地域范围。1 材料与方法1.1 研究对象所用的San Rancesco、Sevillano、Psylia、Frantoio、Verilikada、Valanolia 共 6 个品种均为甘肃省陇南市武都区(10455E,3323N)油橄榄园引进品种,原产国为希腊。1.2 指标测定或调查1.2.1 田间冻害情况调查2020 年 1 月中旬,对 3 年生油橄榄植株进行田间冻害调查,每个品种随机调查 15 株,分别观察油橄榄枝叶的冻害情况。冻害等级分级标准:0 级(无冻害),枝叶完好;级(轻度冻害),1/2 以下叶片受冻;级(中度冻害),1/2 以上叶片受冻;级(重度冻害)
15、,枝叶全部受冻,但树体未死;级(严重冻害),1 2 年生枝韧皮部冻裂,其上着生的叶片受冻失绿,趋向死亡或死亡。计算冻害指数 Y。Y=(n1+n2+n3+n4)/n。式中:n1、n2、n3、n4分别代表相应冻害等级的植株数量;n 代表调查植株的总数量。1.2.2 抗寒性生理指标测定2020年10月20日,采集露地栽培的长势良好、无病虫害,且树龄一致的1年生休眠枝条(带叶片),每个品种 50 枝,长度约 10 cm,置于 5 条件下贮藏备用。2020 年 10 月 21 日,摘取大小一致的叶片,用蒸馏水冲洗干净,然后用滤纸将叶片上的水分吸干。每个油橄榄品种称取 6 份鲜样,每份 0.2 g,将同一
16、条件处理的各品种叶片用干净锡箔纸包好,用自封袋封装后放置超低温冰箱中,分别在 5、0、-5、-10、-15、-20 等温度条件下模拟低温处理。并以常温5 处理为对照,处理温度误差0.5,以 4 /h 的速度降至目标温度后延续 12 h,随后varieties reached its peak at-15.With the decrease of stress temperature,the relative water content and chlorophyll of each variety gradually decreased,and reached the lowest value
17、 at-20.【Conclusion】According to the comprehensive evaluation of cold resistance of the six introduced olive cultivars,the order of cold resistance was San Rancesco SevillanoPsyliaFrantoioVerilikadaValanolia.In other words,San Rancesco,Sevillano and Psylia have strong cold resistance,which can be use
18、d as a cultivar in higher altitude or higher latitude area.Keywords:Olea europaea;cold resistance;physiological indexes;relative electric conductivity;semi-lethal temperature51第 41 卷经 济 林 研 究以 4 /h 的速度升温至 5,在冰箱内储藏 8 h后进行 3 次相关指标的测定。电导率采用电导仪法测定,叶绿素含量采用丙酮法测定,相对含水量采用烘干法测定,可溶性糖含量采用蒽酮法测定,可溶性蛋白含量采用考马斯亮蓝法测
19、定,丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法测定,脯氨酸含量采用茚三酮比色法测定20。1.2.3 半致死温度计算计算叶片相对电导率 Cr。Cr=(R1/R2)100%。式中:R1表示经低温处理后样品的电导率,R2表示煮后样品的电导率。将各低温处理温度下对应的相对电导率与Logistic 方程结合:y k/(1+ae-bx)21-22。式中:y表示细胞伤害率;x 表示处理温度;k 表示细胞伤害的饱和容量,为 100;a、b 为方程参数。将方程进行线性化处理,ln(k-y)/yln a-bx,令 y=ln(k-y)/y,则转化为细胞伤害率(y)与处理温度(x)的直线方程。通过直线回归的方法求得 a
20、值和 b 值。半致死温度(TL50)的计算公式:TL50=1n a/b。1.3 数据统计分析使用 Excel 软件进行数据处理及图表制作,使用 SPSS 21.0 软件进行数据统计分析。2 结果与分析2.1 基于冻害指数的不同油橄榄品种抗寒性比较抗寒能力不同的油橄榄品种叶片发生的冻害等级不同,因此不同品种的冻害指数不同,冻害指数越高说明冻害程度越严重,抗寒性强的品种叶片在冬季依然呈现出灰绿色。2020 年初武都区不同引进希腊油橄榄品种的冻害指数如图1所示。由图 1 可见,各品种之间存在显著差异,6 个油橄榄品种的平均冻害指数为 4.86。其中,Valanolia的冻害指数最高,为 6.53,冻
21、害等级为:级有 6 株,占 40%;级有 9 株,占 60%。San Rancesco 的冻害指数最低,仅为 3.00,冻害等级为,冻害程度相对较轻,受冻部位主要是叶片。按照冻害指数由小到大排序,各品种依次为 San Rancesco、Sevillano、Psylia、Frantoio、Verilikada、Valanolia。2.2 基于半致死温度的不同油橄榄品种抗寒性 比较2.2.1 低温胁迫下叶片相对电导率的变化低温胁迫下不同引进希腊油橄榄品种相对电导率的变化如图 2 所示。从图 2 可以看出,随着处理温度的降低,各油橄榄品种叶片的相对电导率呈现出不同幅度的变化趋势,其中 Frantoi
22、o 呈现出先上升、后下降、再上升的 S 形变化曲线,而 San Rancesco、Sevillano、Psylia、Verilikada、Valanolia 这 5 个品种叶片的相对电导率呈持续上升趋势。当温度降至 0 时,各油橄榄品种叶片的相对电导率均开始上升,其中品种 Valanolia 叶片相对电导率的上升速度最快,相对电导率为73.04%,Verilikada 叶片的相对电导率上升速度最慢,相对电导率仅为 52.08%,表明此时 6 个品种的细胞膜均已经受到破坏。当处理温度降至-10 时,San Rancesco、Valanolia、Verilikada、Psylia、图 1 2020
23、 年初武都区不同引进希腊油橄榄品种的冻害指数Fig.1 Frozen damage index of different introduced Greece olive varieties in Wudu District at the beginning of 2020图 2 低温胁迫下不同引进希腊油橄榄品种相对电导率的 变化Fig.2 Changes of relative electrical conductivity of different introduced Greece olive cultivars under low temperature stress52第 2 期戚建莉
24、,等:不同引进希腊品种油橄榄的抗寒性评价Sevillano这5个品种叶片的相对电导率持续上升,而品种 Frantoio 叶片的相对电导率呈下降趋势,说明在这个温度条件下,San Rancesco、Sevillano、Valanolia、Psylia、Verilikada 这 5 个品种叶片的细胞膜受害程度在增加,而品种 Frantoio 叶片的细胞膜受害程度不明显。当温度降至-15 时,6 个品种叶片的相对电导率均呈现急剧上升趋势,细胞膜受到了严重的破坏。当温度继续降至-20 时,各品种叶片的相对电导率为 93.55%98.41%,其中 Valanolia 叶片的相对电导率最小。在-20 条件
25、下,品种Valanolia的细胞膜受破坏程度最大,说明该品种的抗寒能力最弱。2.2.2 半致死温度按照叶片的相对电导率,利用 Logistic 方程确定拐点温度,即叶片的半致死温度。基于半致死温度的不同引进希腊油橄榄品种抗寒性排序见表 1。由表 1 可以看出,决定系数 R2为 0.795 0.914,说明拟合结果精准度较高。各品种的半致死温度为-15.371 -8.770,最高温度和最低温度相差 9.021,其中品种 San Rancesco 的半致死温度最低,Valanolia 的半致死温度最高。从抗寒性排序结果来看,San Rancesco 的抗寒能力最强,Valanolia 的抗寒能力最
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