不同初始碳氮比对黑水虻生物转化鸡粪效果的影响_麦力文.pdf
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1、第4 4卷 第7期家畜生态学报V o l.4 4N o.72 0 2 3年7月A c t aE c o l o g i a eA n i m a l i sD o m a s t i c iJ u l.2 0 2 3生态养殖不同初始碳氮比对黑水虻生物转化鸡粪效果的影响 收稿日期 2 0 2 1-0 6-2 4修改日期:2 0 2 2-0 1-1 2 基金项目 海南省自然科学基金青年基金项目(4 1 9 QN 2 7 8);中国热带农业科学院基本科研业务费专项资金(1 6 3 0 0 4 2 0 2 1 0 1 9)作者简介 麦力文(1 9 9 0-),男,海南海口人,硕士研究生,主要从事废弃物
2、资源化利用方面工作。E-m a i l:m a i l i w e n 1 9 9 01 6 3.c o m*通讯作者 李勤奋(1 9 7 4-),女,内蒙古人,博士,研究员,主要研究方向为生态循环农业。E-m a i l:q i n f e n l i 2 0 0 51 6 3.c o m麦力文1,2,杨 霞1,2,王定美1,2,李勤奋1,2*(1.中国热带农业科学院 环境与植物保护研究所,海南 海口5 7 1 1 0 1;2.海南省热带生态循环农业重点实验室,海南 海口5 7 1 1 0 1)摘 要 为了探明黑水虻幼虫对不同碳氮比鸡粪的生物转化效果开展模拟转化试验。将玉米粉按照0%、5%、
3、1 0%、1 5%的比例添加至鸡粪与菌渣混和(11,w/w)的底料中调节混合物的C/N为1 0.3 0、1 1.5 2、1 2.6 7、1 3.8 1(设为C K、T 0 5、T 1 0、T 1 5组),接入4日龄黑水虻幼虫,1 4d后测定黑水虻生物转化效率及虫粪腐熟情况。结果表明:T 0 5处理组黑水虻对鸡粪菌渣混合物的降解速率最快(P0.0 5),且黑水虻虫体粗蛋白含量显著高于其他处理组(P0.0 5);T 1 5处理组黑水虻幼虫产量最大,平均日增长速率和虫体粗脂肪含量显著高于其他处理(P0.0 5)。另一方面,添加玉米粉能显著提高黑水虻虫粪有机肥的腐熟程度(P0.0 5),虫粪有机肥的类
4、腐殖质荧光强度(F m a x)随着碳氮比的升高而增大;T 1 5处理组黑水虻虫粪类腐殖质荧光强度(F m a x)显著高于T 0 5处理组(P0.0 5)。通过添加玉米粉调节鸡粪混合底料初始C/N,可以定向调控黑水虻对鸡粪的转化效果,为促进生产中黑水虻-废弃物转化系统高效运转提供数据支撑。关键词 黑水虻;碳氮比;鸡粪;三维荧光光谱 中图分类号 X 7 1 3;X 1 7 4 文献标识码 A 文章编号 1 0 0 5-5 2 2 8(2 0 2 3)0 7-0 0 7 8-0 8d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 3-1 1 8 2.2 0 2 3.0 7.0
5、1 2 鸡粪的处理与资源化利用是家禽清洁生产过程中的关键环节。通过黑水虻将鸡粪转化为高蛋白饲料和有机肥料是近年来备受关注的畜禽粪便处理技术1-2。新鲜鸡粪水分及氮含量高,且氮素多来源于尿酸、氨、尿素、肌酸酐等,不利于黑水虻幼虫消化吸收3;鸡粪中的高氮还会导致高氨环境,影响黑水虻的生存;鸡粪粘度高、透气性差,导致黑水虻单独转化新鲜鸡粪的效果不理想。因此,在黑水虻转化鸡粪时,降低堆体中氮的含量或改变氮的形态,同时增加鸡粪中的孔隙度是提高黑水虻转化效率的重要因素。底料中碳氮比是影响黑水虻幼虫生物转化的重要因素4,合适的C/N可以减少转化过程中氨的排放,高碳材料可以加强氨的固定与酚类化合物的结合,更好
6、地被虫体利用。C a i等5研究了污泥、鸡粪和麦麸混合底料对黑水虻幼虫生长繁殖的影响,发现原料碳、氮含量是黑水虻幼虫增重及虫体营养组成的关键。L a l a n d等6认为底料高C/N(2 53 0)下,不利于黑水虻幼虫的生长,但适于生产高质量的有机肥。常见的富碳材料如木屑、秸秆等虽然可以调节C/N,改善黑水虻的生存环境,但其中高含量的木质素无法被黑水虻利用,降低转化效果。研究表明,在黑水虻幼虫的转化过程中,氮的转化必须要有充足的能量供应7-8。玉米粉中碳含量高,且碳源极易被机体利用,同时含有多种维生素、矿物质及氨基酸,可为黑水虻幼虫的生长代谢提供能量。基于此,本研究将鸡粪与菌渣等比例混合以降
7、低含水率并增大透气性,经玉米粉添加调节混料C/N,通过分析黑水虻幼虫的生长及转化效率,再结合光谱技术评价虫粪的腐熟情况,确定黑水虻幼虫对鸡粪的转化效果,为生产中黑水虻生物转化原料调配提供数据支撑。1 材料与方法1.1 供试材料试验用虫为4日龄黑水虻幼虫,由海南省北科生态农业开发有限责任公司提供;供试的秀珍菇菌渣均为海南定安龙湖南科食用菌有限公司提供;新鲜鸡粪取自海南定安龙湖养殖农户;玉米粉购自海南省海口市椰海粮油交易市场。1.2 试验设计与饲养管理由于鸡粪含水率高,将鲜鸡粪与食用菌渣按11的(干重)比例混合作为基础底料,含水率为7 0%。通过添加不同比例的玉米粉,来调节不同处理底料初始碳氮比,
8、并加水保持各处理相同含水率。原料及各处理组底料总碳、氮含量见表1。表1 原料及各处理总碳、氮含量(干物质基础)T a b l e1 T o t a l c a r b o na n dn i t r o g e nc o n t e n t i nr a w m a t e r i a l sa n dt r e a t m e n t s(DMb a s i s)项目I t e m s玉米粉添加量/%V o l u m eo fc o r n m e a la d d i t i o n总碳/%T C总氮/%T N碳氮比C/N鸡粪M a n u r e2 6.0 33.5 37.3 7菌渣M
9、 u s h r o o mw a s t e1 8.0 40.7 42 4.3 8玉米粉C o r nm e a l6 3.9 31.0 16 3.3 0C K04 4.0 84.2 81 0.3 0T 0 555 0.4 84.3 81 1.5 2T 1 01 05 6.7 84.4 81 2.6 7T 1 51 56 3.2 64.5 81 3.8 1 每个处理各取1k g底料放入饲养盒中,接入大小基本一致且健康的4日龄黑水虻幼虫10 0 0头,每个处理3个重复,共1 2个饲养盒。在每个饲养盒顶部盖上1 0 0目滤布封口,保证透气的同时,防止家蝇在其中产卵以及幼虫逃走,置于饲养室培养,饲
10、养室温度保持在2 73、环境相对湿度7 0%5%。每天观察生长情况,当第1只黑水虻出现预蛹时停止试验,将黑水虻幼虫与虫粪分离。试验结束时将幼虫洗净称重测定幼虫质量后,在1 0 5 下灭活后6 0烘干2d,在烘干过程中多次翻动,以保证受热均匀,干燥处理后虫体粉碎备用。底料及虫粪经自然风干 后,测 定 可 溶 性 有 机 碳(d i s s o l v e do r g a n i cc a r b o n,D O C)及 可溶性有机 物(d i s s o l v e do r g a n i cm a t t e r,D OM)。1.3 测试指标与方法1.3.1 黑水虻幼虫生物量指标测定 干虫
11、转化率=(幼 虫 末 干 重-幼 虫 初 干 重)/底 料 初 干 重1 0 0%;幼虫日增重倍数=(幼虫末干重-幼虫初干重)/(试验时间幼虫初干重)1 0 0%。1.3.2 黑水虻幼虫虫体营养成分及对底料养分转化率的测定 烘干粉碎的虫体样品检测虫体常规营养成分。参考标准主要有:凯氏定氮法测虫体粗蛋白(G B/T6 4 3 2-2 0 1 8)9,石油醚抽提法测虫体粗脂肪(G B/T6 4 3 3-2 0 0 6)1 0,虫 体 粗 纤 维(G B/T6 4 3 4-2 0 0 6)1 1,5 5 0 灼烧测定虫体粗灰分(G B/T6 4 3 8-1 9 9 2)1 2;黑水虻幼虫对底料养分转
12、化效率(g/k g)=(试验末幼虫体营养成分含量-试验初幼虫体营养成分含量)/初始底料干重1 0 0 0。1.3.3 底料减量效果指标测定 试验开始和结束时,记录底料及虫粪质量,并取样风干测定测定干物质(DM),底料转化效率按下述公式计算:底料减量率=(试验开始时底料干重-试验结束时虫粪干重)/试验开始时底料干重1 0 0%;底料降解速率(m g/g/d)=(试验开始时底料干重-试验结束时虫粪干重)/(平均幼虫干重培养时间),其中平均幼虫干重=(幼虫始干重+幼虫末干重)/21 3。1.3.4 D OM提取及浓度测定 虫粪及底料样品D OM的提取。将样品按干重1 0倍加水混匀室温下2 0 0r/
13、m i n振荡4h。4、2 00 0 0 r/m i n离心,上清液过0.4 5m滤膜,滤液即为D OM提取液。为消除荧光内滤作 用,所 有 样 品 均 通 过TO C仪 测 定 提 取D OM样品的水溶性有机碳浓度(D O C),根据测定值将所有样品D OM提取液的D O C浓度稀释至1 0m g/L,稀释液即为D OM待测液,用于后续分析。1.3.5 D OM的3 D-E EM光谱测定 D OM的3 D-E EM光谱测定采用日立F-7 0 0 0荧光光谱仪。扫描增益9 0 0V,激发波长(Ex)2 0 05 0 0n m,发射波长(Em)2 5 05 5 0n m,激发及发射波长间隙1n
14、m,扫描速度30 0 0n m/m i n。将扫描获得的D OM-E EM值通过MAT L A B 2 0 1 6 a计算扣除超纯水值,以去除拉曼和瑞利散射。1.4 数据分析试验数据以xs表示,采用E x c e l2 0 1 0软件进行数据整理和计算。采用G r a p hP a dP r i s m7软件进行组间差异显著性检验,P0.0 5表示差异显著。采用MAT L A B 2 0 1 6 a软件对3 D-E EM图进行分析;采用O r i g i n 9.0进行图形分析。2 结果与分析2.1 不同C/N底料对黑水虻生长性能的影响由图1可知,添加玉米粉处理组黑水虻幼虫的干虫转化率及日增重
15、倍数均显著高于C K组(P0.0 5)。底料C/N显著影响黑水虻幼虫的生长性能,幼虫转化率及日增重倍数随着C/N的升高而显著上升(P0.0 5),不同小写字母表示差异显著(P0.0 5),d i f f e r e n t l o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P0.0 5).T h es a m eb e l o w虫的干虫转化率和日增重倍数显著高于其它处理组(P0.0 5)。2.2 不同C/N底料对黑水虻幼虫虫体营养物质组成的影响 通过添加玉米粉调节底料
16、初始C/N显著影响黑水虻幼虫粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分等含量(P0.0 5),见图2。T 0 5处理组虫体粗蛋白质含量显著高于其他处理组(P0.0 5),T 1 0和T 1 5处理组虫 体粗 蛋 白 质 含 量 较C K组 显 著 降 低(P0.0 5)。虫体粗脂肪含量随着玉米粉添加及C/N的升高而显著增加(P0.0 5),其中T 1 5处理组较C K组和T 0 5处理组增加2 6.3 6%和2 3.3 4%(P 0.0 5)。此外,各试验组虫体粗纤维和粗灰分含量随玉米粉的添加和C/N的升高而显著降低(P 0.0 5)。图2 不同C/N下黑水虻幼虫虫体概略养分含量F i g.2 N u
17、t r i e n t c o n t e n to fb l a c ks o l d i e r f l y l a r v a eu n d e rd i f f e r e n tC/N2.3 不同C/N对黑水虻转化底料中养分转化率的影响黑水虻幼虫对不同C/N底物养分的转化率见图3。由图3可知,随着玉米粉添加和C/N的提高,黑水虻幼虫对底料粗蛋白质和粗脂肪转化率显著增加(P0.0 5),T 1 5处理组黑水虻幼虫对粗蛋白和粗脂肪转化率分别达到2 9g/k g和3 3 9.7g/k g,显著高于其它处理组(P0.0 5)。粗纤维转化效率T 1 5处理组黑水虻幼虫显著高于C K处理组(P0
18、.0 5)。对粗灰分转化率随C/N提高而 显 著 降 低(P0.0 5),C K处 理 组 最 高 达 到9 5.3 1g/k g,显著高于其他组(P0.0 5)。08家畜生态学报第4 4卷图3 黑水虻幼虫对底物养分的转化率F i g.3 N u t r i e n t c o n v e r s i o nr a t eo fb l a c ks o l d i e r f l y l a r v a e图4 黑水虻幼虫对底料的降解情况F i g.4 D e g r a d a t i o no f s u b s t r a t eb yb l a c ks o l d i e r f l
19、 y l a r v a e2.4 不同C/N对黑水虻降解底料情况的影响底料的减量率及降解速率可以反映黑水虻幼虫对底料的转化降解效率。从图4可以看出,底料添加玉米粉更有利于底料的降解,各处理组底料减量率均显著高于C K(P0.0 5),在底料C/N为1 1.5 2时减料量达最高为3 9.8 2%,降解速率达最高9 1 3.0 3m g/(gd),(P0.0 5)。底料C/N超过1 1.5 2,则底料的减量率降低,原料降解效率显著低于C K组(P0.0 5)。2.5 不 同C/N对 黑 水 虻 虫 粪 的 可 溶 性 有 机 物(D OM)组分的影响 提取各处 理组转化 前底料 及 转 化 后
20、虫 粪 的D OM进行3 D-E EM扫描,利用平行因子分析,确定样品D OM主要有3种荧光组分组成,图5是3个荧光组分的等高线图和相对分布。平行因子分析结果见表2,组分1(C 1)存在2个荧光峰,位于Ex/Em为2 7 0,3 5 0/4 3 0,组分2(C 2)由Ex/Em为2 8 0,3 9 0/5 0 0的1个主峰和1个次级峰组成,C 1和C 2与类腐殖质物质和类富里酸物质有关的成分相似,经常在各种堆肥腐熟中常见1 4-1 5;组分3(C 3)在Ex/Em为2 8 0,3 7 0/3 4 0处有2个主峰,与类蛋白物质成分相似,这种类型的荧光信号通常在堆肥未腐熟的物质中常见1 4。2.6
21、 不同C/N下黑水虻幼虫转化前后3种荧光组分的荧光强度Fm a x变化 不同C/N底料经黑水虻幼虫转化前后3种荧光组分的荧光强度见表3。各组分的Fm a x值可反映其在原料中相对含量,可用来表征堆肥的腐熟状况。添加玉米粉处理组转化后类腐殖质物质(C 1)荧光强度Fm a x均增加,而未添加玉米的C K组转化后类腐殖质物质(C 1)Fm a x下降了2.8%。其中T 1 0和T 1 5处理组虫粪的类腐殖质物质(C 1)荧光强度Fm a x分别增加了4 2.2 8%和6 0.3 5%,Fm a x均显著高于C K组与T 0 5处理组。另一方面,虫粪中C K组类富里酸物质(C 2)Fm a x增加了
22、5 9.5 3%,显著高于其它处理组(P0.0 5)。18第7期 麦力文,等:不同初始碳氮比对黑水虻生物转化鸡粪效果的影响图5 通过平行因子分子确定3种荧光组分F i g.5 I d e n t i f i c a t i o nf o r3f l u o r e s c e n t c o m p o n e n t sb yp a r a l l e l f a c t o rm o l e c u l e s表2 3个荧光组分最大值位置T a b l e2 M a x i m u mp o s i t i o n so f 3f l u o r e s c e n t c o m p o
23、 n e n t s本研究T h i s s t u d y前人研究P r e v i o u s s t u d i e s荧光组分F l u o r e s c e n t c o m p o n e n tEx/Em,n m/n mEx/Em,n m/n m荧光峰描述参考文献组分1C o m p o n e n t 12 7 0,3 5 0/4 3 02 7 0,3 5 0/4 5 8类腐殖质物质1 4组分2C o m p o n e n t 22 8 0,3 9 0/5 0 03 9 0/5 0 9富里酸1 5组分3C o m p o n e n t 32 8 0,3 7 0/3 4
24、02 3 0,2 8 0/3 3 0类蛋白物质1 4表3 虻蛆转化前后各处理组3种荧光组分荧光强度(Fm a x)变化T a b l e3 C h a n g e so f f l u o r e s c e n c e i n t e n s i t y(Fm a x)o f 3f l u o r e s c e n t c o m p o n e n t sb e f o r ea n da f t e r t h e t r a n s f o r m a t i o no fb l a c ks o l d i e r f l y i ne a c hg r o u p样品S a m
25、p l e组分1C o m p o n e n t 1底料S u b s t r a t e虫粪F r a s s组分2C o m p o n e n t 2底料S u b s t r a t e虫粪F r a s s组分3C o m p o n e n t 3底料S u b s t r a t e虫粪F r a s sC K1 6 1 1.3 0a3 9.7 01 5 6 6.0 0b4 3.6 26 5 8.8 6a3 0.0 71 0 1 5.1 1a3 3.3 04 2 0.7 9c1.6 92 0 8.2 5c1 1.7 7T 51 1 8 6.8 0b2 0.6 5 1 4 1 1
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