绞股蓝总皂苷及其不同提取物...实验性高血压大鼠的降压作用_马泽刚.pdf
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1、*基金项目:四川省科技厅自然科学基金资助项目(2022NSFSC1785);自贡市重点科技计划项目(2020YGJC30);四川卫生康复职业学院校级重点项目(CWKY 2021Z 03)绞股蓝总皂苷及其不同提取物对实验性高血压大鼠的降压作用*马泽刚1,辛超2,吴秀丽1,徐静1,伍勇11四川卫生康复职业学院教育体育学院(四川自贡 643000);2西南科技大学生命科学与工程学院(四川绵阳621000)【摘要】目的研究绞股蓝总皂苷和绞股蓝不同提取物对大鼠血压的影响。方法将大鼠分为 9 组,除空白对照组外,高血压模型组、绞股蓝总皂苷对照组、绞股蓝总皂苷干预组(绞股蓝总皂苷 180 mg/kg、360
2、mg/kg、720 mg/kg,低、中、高剂量组)、总提取物组、乙酸乙酯提取物组和正丁醇提取物组的大鼠均被喂养高脂高糖饲料和饮用糖盐水(糖 4%、盐 1%)和果糖水(6%)。绞股蓝总皂苷对照组、绞股蓝总皂苷干预组、总提取物组、乙酸乙酯提取物组和正丁醇提取物组的大鼠均给予相应剂量的药物灌胃。给药 8 周后处死大鼠,测定大鼠血清中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)和血管紧张素(Ang)含量。结果与空白对照组相比,高糖高脂饮食能明显使大鼠血压的增高 收缩压增高(34.9 9.8)%,舒张压增高(17.9 8.5)%,差异有统计学意义(P 0.05)。与高血压模型组相比,绞股蓝总皂苷对照组收缩压降低(3
3、9.7 6.9)%、舒张压降低(36.7 7.3)%,血压显著性降低(P 0.05)。与空白对照组相比,绞股蓝总皂苷对照组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组收缩压、舒张压相差不大(P 0.05)。绞股蓝总皂苷明显降低大鼠的血压,同时能显著增加大鼠血清 NO 含量,降低大鼠血清 ET 和 Ang的含量。结论绞股蓝总皂苷及其乙酸乙酯、正丁醇提取物可预防高糖高脂诱导的大鼠血压的增高。绞股蓝总皂苷可能通过降低 ET、Ang含量和升高 NO 含量来发挥对大鼠的降压作用。【关键词】绞股蓝总皂苷;绞股蓝提取物;高血压;NO;ET;Ang【中图分类号】28;544 1【文献标志码】ADOI:10 13820/
4、j cnki gdyx 20223771The antihypertensive effect of total saponins of Gynostemma pentaphyllum and its different extracts in experimen-tal hypertensive ratsMA Ze gang,XIN Chao,WU Xiu li,XU Jing,WU YongCollege of Education andPhysical Education,Sichuan Vocational College of Health and ehabilitation,Zig
5、ong 643000,Sichuan,China【Abstract】ObjectiveTo investigate the anti hypertensive effects of different extracts from Gynostemma pen-taphylla in experimental hypertensive rats MethodsThe rats were divided into 9 groups,except the rats in blank con-trol group,those in the hypertensive model group,Gypeno
6、sides control group,Gypenosides intervention group,total ex-tract group,ethyl acetate extract group,and n butanol extract group were fed with high fat and high sugar diet and sug-ar saline(sugar 4%,salt 1%)and fructose water(6%)ats in the Gypenosides control group,Gypenosides interven-tion group,tot
7、al extract group,ethyl acetate extract group,and n butanol extract group were given with correspondingdoses of drugs by gavage After 8 weeks of administration,the rats were sacrificed and the contents of NO,ET and Angin serum were measured esultsCompared with the blank control group,the high sugar a
8、nd high fat diet could signifi-cantly increase the blood pressure of rats systolic blood pressure increased by(34.9 9.8)%,diastolic blood pressureincreased by(17.9 8.5)%with significant difference(P 0.05)Compared with the hypertension model group,thesystolic blood pressure and diastolic blood pressu
9、re of the Gypenosides control group significantly decreased by(39.7 6.9)%and(36.7 7.3)%,respectively(P 0.05)Compared with the blank control group,there was no signifi-cant difference in the systolic and diastolic pressure in Gypenosides control group,ethyl acetate extract group or n bu-tanol extract
10、 group(P 0.05)The total saponins of Gynostemma pentaphyllum can significantly reduce the blood pres-861广东医学2023 年 2 月 第 44 卷第 2 期Guangdong Medical JournalFeb 2023,Vol 44,No 2网络首发时间:2023-03-02 09:50:31网络首发地址:https:/ of rats,increased the content of NO in serum of rats,and reduced the content of ET an
11、d Ang in serum of ratsConclusionEthyl acetate group and N butanol group of Gynostemma pentaphyllum can prevent the increase of bloodpressure induced by high glucose and high fat in rats,and also have a relatively safe curative effect on hypertensionGypenosides may exert antihypertensive effect on ra
12、ts by reducing the contents of ET and Ang and increasing the con-tent of No【Key words】Gypenosides;gynostemma extract;hypertension;NO;ET;Ang绞 股 蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb)Makino 为葫芦科多年生草本植物的根茎或全草,味甘、苦,性寒,在我国有着丰富的资源,中药大辞典 名七叶胆,五叶参、遍地生根、小苦药等1 3。皂苷、多糖、黄酮类、氨基酸、蛋白质、无机物是绞股蓝的有效成分,其中皂苷是最主要的药效成分。有效的药效成分使绞
13、股蓝具备多种药理活性,如降血脂4 6 血 糖7、治 疗 高 胆 固 醇 血 症8 9、抗 肿瘤10 11、抗氧化12 13、抗动脉粥样硬化、抗痴呆、抗帕金森氏症,并有保护神经、保肝14 15、增强免疫调节等作用16。绞股蓝总皂苷与人参皂苷结构相似,具有达玛烷型的三萜骨架,且毒性不良反应小。已有的实验表明绞股蓝总皂苷对降血脂和降血糖有明显作用,众多学者已认可其在临床上用于改善高血脂症和糖尿病的疗效。但是,关于绞股蓝有效成分对血压影响是知之甚少。为继续加深对绞股蓝药材的研究,充分挖掘绞股蓝潜在的价值,本研究采用了课题组前期研究成果17 18,于 2020 年 5 月至 2021年 12 月期间,选
14、取了陕西平利产绞股蓝为主要原料,研究绞股蓝不同提取物及其总皂苷是否可以影响实验性高血压大鼠的血压,并探讨其是否具有降血压作用及其可能降压途径。该实验结果为陕西平利绞股蓝的总皂苷及其提取物在预防和医治高血压的作用上提供可靠的实验依据,并为其开发与应用奠定一定基础。1材料与方法1 1动物110 只 SD 大鼠,鼠龄为 6 8 周,体重为 180 220 g,购买于北京科兴生物制品有限公司,饲养条件:室内温度 20 26,相对湿度 50%60%。适应性喂养 1 周后,将大鼠随机分为空白对照组、高血压模型组、绞股蓝总皂苷对照组、绞股蓝总皂苷干预组(绞股蓝总皂苷 180、360、720 mg/kg,低、
15、中、高剂量组)、总提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组,共 9 组,每组 10 只。研究经我院伦理委员会审核批准。12实验试剂和药品高糖高脂饲料配制:51%普通饲料+15%猪油+15%蔗糖+15%蛋黄粉+4%食盐;果糖(配方源自广东省实验动物中心);绞股蓝(陕西省平利县绞股蓝合作社);绞股蓝总皂苷(实验室自制)。乙酸乙酯、乙醇、正丁醇等试剂均为国产分析纯:成都市科龙化工试剂厂。取绞股蓝用 70%乙醇,60 下提取 3 次,每次3 h,蒸干,得总提取物。取总提取物加水,分别用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇萃取,得乙酸乙酯提取物,正丁醇提取物。1 3实验仪器大小鼠无创血压测量系统购自上海公司(型号
16、:MBP),四通道生物功能实验系统购自成都(型号:BP 420),紫外可见分光光度仪购自日本(UV 1800),低温冷冻离心机购自美国 Thermo。1 4方法1 4 1建立高血压大鼠模型使用标准饲料喂养大鼠 1 周,观察大鼠适应环境情况。实验大鼠随机分成 9 组,每组 5 只雌鼠和 5 只雄鼠。各组喂养方法如下:空白对照组:标准饲料+每天 1 次普通水灌胃;高血压模型组:高脂高糖饲料+交替饮用 4%糖1%盐水与 6%果糖水+每天 1 次普通水灌胃。不同给药组:(1)绞股蓝总皂苷对照组:高脂高糖饲料+交替饮用 4%糖 1%盐水与 6%果糖水+绞股蓝总皂苷对照(360 mg/kg)。(2)绞股蓝
17、总皂苷干预组(低、中、高剂量组):高脂高糖饲料+交替饮用4%糖 1%盐水与 6%果糖水+绞股蓝总皂苷(180、360、720 mg/kg)。(3)总提取物组:高脂高糖饲料+交替饮用 4%糖 1%盐水与 6%果糖水+总提取物(360 mg/kg)。(4)乙酸乙酯提取物组:高脂高糖饲料+交替饮用 4%糖 1%盐水与 6%果糖水+乙酸乙酯提取物(360 mg/kg)。(5)正丁醇提取物组:高脂高糖饲料+交替饮用 4%糖 1%盐水与 6%果糖水+正丁醇提取物(360 mg/kg)。所有实验组大鼠每天灌胃 1 次,自由饮水和进食。按照上述方法连续喂养 8 周。1 4 2指标检测在大鼠清醒状态下,使用无创
18、尾动脉血压测量分析系统测定其尾动脉血压,每周 1 次。完成尾动脉血压测定后,用戊巴比妥(30961广东医学2023 年 2 月 第 44 卷第 2 期Guangdong Medical JournalFeb 2023,Vol 44,No 2mg/kg)对绞股蓝总皂苷干预组(180 mg/kg、360mg/kg、720 mg/kg)大鼠进行腹腔注射麻醉,迅速完成腹部主总动脉采血。采用分光光度法测定腹部主总动脉血液中的一氧化氮(NO),再用放免法测定血浆的内皮素(ET)和血管紧张素(Ang)含量。1 5统计学方法实验数据用 SPSS 13.0 统计软件进行处理分析,用 珋x s 表示,采用方差分析
19、和 t检验作统计学法分析。以 P 0.05 为差异有统计学意义。2结果2 1不同对照组对大鼠血压的影响见表 1。高血压模型组大鼠收缩压增高(34.9 9.8)%,舒张压增高(17.9 8.5)%,与空白对照组比较差异有统计学意义(P 0.05)。表明高脂高糖喂养诱导大鼠高血压。不同给药组与高血压模型组相比较,绞股蓝总皂苷对照组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、总提取物组收缩压分别降低(39.7 6.9)%、(23.7 5.6)%、(22.1 4.6)%、(11.5 10.1)%(P 0.05),舒张压分别降低(36.7 7.3)%、(24.6 2.8)%、(25.2 6.7)%、(12.1
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