DB34∕T 2813-2017 梨炭疽病菌检疫鉴定方法(安徽省).pdf
《DB34∕T 2813-2017 梨炭疽病菌检疫鉴定方法(安徽省).pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《DB34∕T 2813-2017 梨炭疽病菌检疫鉴定方法(安徽省).pdf(10页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、ICS 65.020.20 B 16 DB34 安徽省地方标准 DB 34/T 28132017 梨炭疽病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Colletotrichum gloeosporioides Penz 文稿版次选择 2017 - 03 - 30 发布 2017 - 04 - 30 实施安徽省质量技术监督局发 布 DB34/T 28132017 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省检验检疫科学技术研究院提出。 本标准由安徽省动植物检验检疫标准化技术委员会归口。 本标准主要起草单位: 安徽省检验
2、检疫科学技术研究院、 安徽省农科院植物保护与农产品质量安全研究所。 本标准主要起草人:李云飞、陈雪娇、宗凯、杨雪、孙娟娟、郑海松、姚剑、陈雨、余晓峰、王满满。 DB34/T 28132017 1 梨炭疽病菌检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了梨炭疽病菌的检疫鉴定方法。 本标准适用于果实、苗木及其制品中梨炭疽病菌的检疫和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 梨炭疽病菌基本信息 学名:Coll
3、etotrichum gloeosporioides Penz. 分类地位:真菌界(Fungi),黑盘孢目(Melanconiales),黑盘孢科(Melanconiaceae),炭疽菌属(Colletotrichum),其有性阶段为围小丛壳(Glomerella cingulata)。 传播途径:梨炭疽病主要借助雨水、昆虫等进行近距离传播,借助果实、苗木及其制品等的调运进行远距离传播。 4 方法原理 根据梨炭疽病菌在寄主上的为害症状(参见附录A),培养基上生长的菌落、菌丝、分生孢子和分生孢子器等形态特征,以及 PCR 特异扩增片段大小进行结果判定。 5 仪器设备和主要试剂 5.1 仪器设备
4、生物显微镜、体视显微镜、高速冷冻离心机、纯水仪、超净工作台、灭菌锅、制冰机、PCR 仪、凝胶成像系统、电泳仪、培养箱、超低温冰箱、常规冰箱、旋涡振荡器。 5.2 主要试剂 5.2.1 除另有规定外,所有试剂均为分析纯或生化试剂,实验用水符合 GB/T 6682 的规定。 5.2.2 1次氯酸钠。 5.2.3 DNA 提取试剂: DNA 提取试剂盒, CTAB 裂解液 (20 g/L CTAB, 0.1 mol/L Tris, 1.4 mol/L Nacl,20 mmol/L EDTA-Na2),蛋白酶 K(20 mg/mL),苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),3 mol/L NaAc(pH
5、 5.2),异丙醇,70乙醇,无菌水。 5.2.4 PCR 试剂:10PCR buffer(含 25 mmol/L MgCl2),Taq 酶,dNTP。 DB34/T 28132017 2 5.2.5 凝胶电泳试剂:琼脂糖,TAE,Loading Buffer,EB。 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯浸粉 5.0 g,葡萄糖 20.0 g,氯霉素 0.1 g,琼脂 13.0 g,蒸馏水定容至 1000 mL,调整 pH 值至 6.7 ,121高压灭菌 15 min。 6 病菌的鉴定 6.1 分离培养 挑取具有疑似症状的果实或植物组织,用解剖刀取植株病健交界处的组织,剪成约 0.4 cm
6、0.4 cm小段,用 1的次氯酸钠溶液消毒 60 s,无菌水洗涤 3 次,灭菌滤纸吸干水分后置于 PDA 培养基上,在 2530,12 h 黑暗/12 h 光照(12 h 光暗交替)条件下培养,第 3 d 开始观察,根据组织周围新生菌落的形态进行选取,取边缘菌丝转接纯化。 6.2 鉴定特征 PDA 培养基上,菌落圆形,绒毛状,气生菌丝生长较密集;菌落初期白色,后期四周呈灰白色,中心逐渐转为灰黑色至墨绿色,背面可见粉红色分生孢子团,偶尔可见黑色圆点散布其中。分生孢子盘圆形或近圆形,黑褐色,突起于培养基表面;分生孢子梗无色、圆柱形或棒状,其上着生单个孢子;分生孢子圆柱形、单孢、无色,大小为 10
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- DB34T 2813-2017 梨炭疽病菌检疫鉴定方法安徽省 DB34 2813 2017 炭疽 病菌 检疫 鉴定 方法 安徽省
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【曲****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【曲****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。