GB 4789.41-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠杆菌科检验.pdf
《GB 4789.41-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠杆菌科检验.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《GB 4789.41-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠杆菌科检验.pdf(14页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、书 书 书中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准犌犅 食品安全国家标准食品微生物学检验肠杆菌科检验 发布 实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发 布书 书 书犌犅 食品安全国家标准食品微生物学检验肠杆菌科检验范围本标准规定了食品中肠杆菌科( )的检验方法。本标准第一法适用于肠杆菌科含量较高的食品中肠杆菌科的计数;第二法适用于肠杆菌科含量较低食品中肠杆菌科的计数。术语和定义 肠杆菌科犈狀 狋 犲 狉 狅 犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪 犮 犲 犪 犲在给定条件下发酵葡萄糖产酸、氧化酶阴性的需氧或兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。 肠杆菌科计数犈狀 狌犿犲 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犈狀
2、狋 犲 狉 狅 犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪 犮 犲 犪 犲按本标准规定方法,对每克或每毫升检样中的肠杆菌科进行计数。 最可能数犿狅 狊 狋狆 狉 狅 犫 犪 犫 犾 犲狀 狌犿犫 犲 狉;犕犘犖基于泊松分布的一种间接计数方法。设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下: 恒温培养箱: 。 冰箱:。 水浴箱: 。 天平:感量 。 显微镜: 倍 倍。 均质器。 振荡器。 无菌吸管:(具 刻度) 、 (具 刻度)或微量移液器及吸头。 无菌锥形瓶或等效容器:容量 、 。 无菌培养皿:直径 。 无菌试管: 、 。 计或比色管或精密试纸。培养基和试剂 缓冲蛋白胨水() :见 。犌
3、犅 缓冲葡萄糖煌绿胆盐肉汤(肉汤) :见 。 结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂() :见 。 营养琼脂() :见 。 葡萄糖琼脂:见 。 革兰氏染色液:见 。 氧化酶试剂:见 。 无菌 :见 。 无菌 :见 。第一法肠杆菌科平板计数法检验程序肠杆菌科平板计数法检验程序见图。图肠杆菌科平板计数法检验程序犌犅 操作步骤 样品的稀释 固体和半固体样品:称取 样品放入盛有 的无菌均质杯中, 均质 ,或放入盛有 的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 ,制成 的样品匀液。 液体样品:以无菌吸管吸取 样品放入盛有 的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成 的样品匀液。 用无菌吸管或微量移液器吸
4、取 样品匀液,沿管壁缓缓注入盛有的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不应触及稀释液面) ,振摇试管或换用支无菌吸管反复吹打,使其混合均匀,制成 的样品匀液。 按 操作程序,依次制成 倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释次,换用支无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得超过 。 倾注平板和培养 根据对样品污染状况的估计及相关限量要求,选择个个适宜的连续稀释度的样品匀液(液体样品可以选择原液) ,每个稀释度接种个无菌平皿。同时,分别吸取加入两个无菌平皿内作为空白对照。 将 冷却至 的(可放置于 恒温水浴箱中保温)倾注于每个平皿中。小心旋转平皿,使样品匀液与培养基充分混匀。 待琼脂凝固后,
5、倾注一薄层同样的培养基覆盖平板表层。防止蔓延生长并使菌落特征更为明显。 待平板上层琼脂凝固后翻转平板, 培养 。 典型菌落计数和确认 肠杆菌科典型菌落为有或无沉淀环的粉红色至红色或紫色菌落。选取典型菌落数在 之间、无蔓延菌落生长的平板,只计数典型菌落数。菌落计数以菌落形成单位( ,)表示。 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以,代表一个平板菌落数。 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。 从每个平板上至少挑取个(小于个全选)典
6、型菌落进行确认;如果有不同形态的典型菌落,则每种形态分别至少挑取个菌落进行确认。 典型菌落的确认:)分别将所挑选的每一个菌落,划线于营养琼脂平板, 培养 ,挑取平板上的菌落进行革兰氏染色镜检、氧化酶试验及葡萄糖发酵试验。)革兰氏染色镜检:肠杆菌科为革兰氏阴性杆菌,无芽孢,大小为( )( )。)氧化酶试验:用铂铱接种环或玻璃棒(不要用镍铬接种环)挑取单个菌落涂于浸湿氧化酶试剂犌犅 的滤纸上,滤纸的颜色在 内变成蓝紫色,判为阳性反应。)葡萄糖发酵试验:用接种针挑取少许氧化酶阴性的同一个菌落,穿刺于葡萄糖琼脂内,于 培养 ,若试管内的内容物变为黄色,判为阳性反应。 结果的计算 一般原则若有两个连续稀
7、释度的平板典型菌落数在适宜计数范围内,按式()计算,示例见 、 、 、 。犖犪(狀 狀)犱()式中:犖 样品中肠杆菌科菌落数;犪 确证的肠杆菌科菌落数之和;狀 第一稀释度(低稀释倍数)平板个数(含确证的肠杆菌科菌落) ;狀 第二稀释度(高稀释倍数)平板个数(含确证的肠杆菌科菌落) ;犱 稀释因子(第一稀释度) 。其中,犪按式()计算:犪犫犃犆()式中:犪 确证的肠杆菌科菌落数;犫 某一平板中犃个菌落中被确证为肠杆菌科的菌落数,犫犃;犃 某一平板中用于确认试验的菌落数;犆 某一平板中典型菌落总数。 低菌落数若最低稀释度(包括液体样品原液)平板的典型菌落数均小于 ,具有确证的肠杆菌科菌落,则以确证
8、的菌落数乘以最低稀释倍数计算。若最低稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,或典型菌落数均小于 ,且无确证的肠杆菌科菌落,则以小于乘以最低稀释倍数计算。 特殊情况第一稀释度平板上的典型菌落数均大于 ,且有确证的肠杆菌科菌落,以及第二稀释度平板上无确证的肠杆菌科菌落或典型菌落数不在 之间,则以确证的菌落数乘以第一稀释倍数计算,示例见 。若所有稀释度的平板上典型菌落数均不在适宜计数范围内,且无确证的肠杆菌科菌落,则以小于乘以最低稀释倍数计算。报告 菌落数小于 时,以整数报告。 菌落数大于或等于 时,对第位数字进行修约后,取前位数字,后面用代替位数;也可用 的指数形式来表示,采用两位有效数字。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- GB 4789.41-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠杆菌科检验 4789.41 2016 食品安全 国家标准 食品 微生物学 检验 杆菌
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【yp****2】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【yp****2】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。