临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展.ppt
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1、 本章主要学习内容和要求本章主要学习内容和要求本章主要学习内容和要求本章主要学习内容和要求主要学习内容主要学习内容主要学习内容主要学习内容要求要求要求要求基本概念基本概念基本概念基本概念细菌的耐药性检测细菌的耐药性检测细菌的耐药性检测细菌的耐药性检测临床常见的耐药菌株临床常见的耐药菌株临床常见的耐药菌株临床常见的耐药菌株掌握掌握掌握掌握 第十三章临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展第十三章临床微生物学检验与抗菌药物敏感性试验进展IFIIFI的实验诊断方法及临床意义的实验诊断方法及临床意义熟悉熟悉熟悉熟悉了解了解了解了解标本的采集方法标本的采集方法标本的采集方法标本的采集方法返回返回上一页上
2、一页下一页下一页第一节 概述一、一、一、一、现代感染性疾病的特点现代感染性疾病的特点感染性疾病(感染性疾病(infectious diseasesinfectious diseases)是指各种生物性病原)是指各种生物性病原(病原微生物、寄生虫病原微生物、寄生虫)寄生人体所引起的传染性感染疾病和寄生人体所引起的传染性感染疾病和非传染性感染疾病。非传染性感染疾病。(一一)疾疾病病谱谱发发生生变变迁迁,发发现现了了很很多多引引起起传传染染病病的的新新病病原原 体体,如如嗜嗜肺肺军军团团菌菌、汉汉坦坦病病毒毒、埃埃博博拉拉病病毒毒、尼尼巴巴病病毒毒、朊朊病病毒毒、SARSSARS冠冠状状病病毒毒等等
3、。而而且且已已经经绝绝迹迹的的旧旧传传染染病病又又死灰复燃,如梅毒、结核病、霍乱等。死灰复燃,如梅毒、结核病、霍乱等。(二)多重耐药株的出现,导致抗感染治疗的困难(二)多重耐药株的出现,导致抗感染治疗的困难(三)器官移植、抗肿瘤化疗和放疗的开展,减弱了机体的(三)器官移植、抗肿瘤化疗和放疗的开展,减弱了机体的 免免疫疫防防御御功功能能,造造成成医医院院感感染染及及条条件件性性致致病病菌菌感感染染的的增增加加 上一页下一页返回返回二、二、二、二、感染性疾病的实验诊断方法感染性疾病的实验诊断方法(一)(一)(一)(一)一般实验室检查一般实验室检查 1.1.血常规检查血常规检查 2.C 2.C反应蛋
4、白反应蛋白(CRP)(CRP)3.3.降降钙钙素素原原(PCT),(PCT),PCTPCT是是严严重重细细菌菌性性炎炎症症和和真真菌菌感感染染的的特特异异性性指指标标,而而且且也也是是脓脓毒毒症症和和炎炎症症活活动动有有关关的的多多脏脏器器衰衰竭竭的的可可靠靠指指标标。如如果果给给予予足足够够的的刺刺激激,免免疫疫抑抑制制的的患患者者将将产产生生PCTPCT,PCTPCT不不仅仅是是用用于于鉴鉴别别诊诊断断的的急急性性指指标标,而而且且是是监监控控炎炎症活动的参数。症活动的参数。(二)(二)(二)(二)病原学病原学实验诊断实验诊断 感感染染性性疾疾病病的的病病原原体体的的实实验验诊诊断断方方法
5、法包包括括病病原原体体的的分分离离培培养养、病病原原体体特特异异性性抗抗原原抗抗体体的的检检测测、病病原原体体核核酸酸检检测测等等多多种方法。种方法。上一页下一页返回返回第二节细菌感染的实验诊断第二节细菌感染的实验诊断第二节细菌感染的实验诊断第二节细菌感染的实验诊断一、一、一、一、标本的采集与培养方法标本的采集与培养方法(一)标本采集原则:(一)标本采集原则:1.采集标本时应无菌操作,尽量避免污染。盛放标本的容采集标本时应无菌操作,尽量避免污染。盛放标本的容 器和培养基应预先进行无菌处理并贴好标签。器和培养基应预先进行无菌处理并贴好标签。2.应选择感染部位或病变明显的部位采集标本,避免周围应选
6、择感染部位或病变明显的部位采集标本,避免周围 组织、器官或分泌物中的杂菌污染。组织、器官或分泌物中的杂菌污染。3.根据病原体在感染性疾病的不同时期的体内分布和排出根据病原体在感染性疾病的不同时期的体内分布和排出 部位选择在最佳时间采集适宜标本。部位选择在最佳时间采集适宜标本。4.对于怀疑细菌感染的标本,尽量在抗生素使用前采集。对于怀疑细菌感染的标本,尽量在抗生素使用前采集。5.标本采集后应及时送检。大多数细菌标本应冷藏送检,标本采集后应及时送检。大多数细菌标本应冷藏送检,但是某些细菌,如脑膜炎奈瑟菌对低温和干燥极其敏感但是某些细菌,如脑膜炎奈瑟菌对低温和干燥极其敏感 ,应注意保温,尽量床旁接种
7、,并预温相应的培养基。,应注意保温,尽量床旁接种,并预温相应的培养基。上一页下一页返回返回(二)常用标本的采集及培养方法(二)常用标本的采集及培养方法(二)常用标本的采集及培养方法(二)常用标本的采集及培养方法1.1.1.1.血液血液血液血液 血培养是用于检测细菌、真菌等患者血液中的微生血培养是用于检测细菌、真菌等患者血液中的微生血培养是用于检测细菌、真菌等患者血液中的微生血培养是用于检测细菌、真菌等患者血液中的微生 物的方法。物的方法。物的方法。物的方法。1).1).1).1).采采采采血血血血时时时时机机机机:通通通通常常常常细细细细菌菌菌菌从从从从感感感感染染染染部部部部位位位位入入入入
8、血血血血1 1 1 1小小小小时时时时后后后后,引引引引起起起起机机机机体体体体发发发发热热热热,因因因因此此此此,如如如如果果果果能能能能够够够够准准准准确确确确预预预预测测测测病病病病人人人人发发发发热热热热时时时时间间间间时时时时,在在在在发发发发热热热热前前前前半半半半小小小小时时时时至至至至一一一一小小小小时时时时采采采采血血血血最最最最好好好好。当当当当无无无无法法法法准准准准确确确确预预预预测测测测病病病病人人人人发发发发热热热热时时时时间间间间时,可在发热时采血。细菌性心内膜炎患者可随时采血。时,可在发热时采血。细菌性心内膜炎患者可随时采血。时,可在发热时采血。细菌性心内膜炎患
9、者可随时采血。时,可在发热时采血。细菌性心内膜炎患者可随时采血。2).2).2).2).采采采采血血血血量量量量:成成成成人人人人每每每每次次次次每每每每瓶瓶瓶瓶最最最最好好好好采采采采血血血血8-10ml8-10ml8-10ml8-10ml,小小小小儿儿儿儿每每每每次次次次每每每每瓶瓶瓶瓶可可可可采血采血采血采血1-5ml1-5ml1-5ml1-5ml。3).3).3).3).采采采采血血血血次次次次数数数数:成成成成人人人人每每每每天天天天采采采采血血血血2-32-32-32-3次次次次,通通通通常常常常间间间间隔隔隔隔半半半半小小小小时时时时或或或或1 1 1 1小小小小时时时时,在患者
10、不同部位采血。在患者不同部位采血。在患者不同部位采血。在患者不同部位采血。4).4).4).4).培培培培养养养养方方方方法法法法:通通通通常常常常每每每每次次次次将将将将血血血血液液液液分分分分别别别别加加加加入入入入需需需需氧氧氧氧和和和和厌厌厌厌氧氧氧氧两两两两种种种种培培培培养养养养瓶瓶瓶瓶中中中中35353535 C C C C同同同同时时时时进进进进行行行行培培培培养养养养。每每每每天天天天观观观观察察察察结结结结果果果果。3 3 3 3天天天天后后后后如如如如果果果果无无无无菌菌菌菌生生生生长长长长则则则则报报报报告告告告“培培培培养养养养48484848小小小小时时时时无无无无
11、菌菌菌菌生生生生长长长长”;7 7 7 7天天天天后后后后如如如如果果果果无无无无菌菌菌菌生生生生长长长长则报告则报告则报告则报告“培养培养培养培养7 7 7 7天无菌生长天无菌生长天无菌生长天无菌生长”。上一页下一页返回返回2.2.2.2.尿尿尿尿液液液液 正正正正常常常常人人人人体体体体内内内内,膀膀膀膀胱胱胱胱中中中中的的的的尿尿尿尿液液液液是是是是无无无无菌菌菌菌的的的的,尿尿尿尿液液液液经经经经尿尿尿尿道道道道排排排排出出出出时时时时,受受受受尿尿尿尿道道道道细细细细菌菌菌菌的的的的污污污污染染染染而而而而会会会会混混混混有有有有细细细细菌菌菌菌,但但但但取取取取中中中中段段段段尿尿
12、尿尿时时时时,细菌数不会超过细菌数不会超过细菌数不会超过细菌数不会超过101010103 3 3 3CFU/mlCFU/mlCFU/mlCFU/ml。1).1).1).1).标本采集:清洁外阴部位,用无菌容器留取中段尿标本采集:清洁外阴部位,用无菌容器留取中段尿标本采集:清洁外阴部位,用无菌容器留取中段尿标本采集:清洁外阴部位,用无菌容器留取中段尿10ml10ml10ml10ml。2).2).2).2).培养方法:尿液一定要做定量培养,通常取培养方法:尿液一定要做定量培养,通常取培养方法:尿液一定要做定量培养,通常取培养方法:尿液一定要做定量培养,通常取1ul1ul1ul1ul或或或或10ul
13、10ul10ul10ul尿尿尿尿 液进行培养,报告时要报告液进行培养,报告时要报告液进行培养,报告时要报告液进行培养,报告时要报告1ml1ml1ml1ml尿液中的菌落数,当取尿液中的菌落数,当取尿液中的菌落数,当取尿液中的菌落数,当取 1ul 1ul 1ul 1ul尿液培养后发现无菌生长,要报告尿液培养后发现无菌生长,要报告尿液培养后发现无菌生长,要报告尿液培养后发现无菌生长,要报告“小于小于小于小于1000 CFU/ml1000 CFU/ml1000 CFU/ml1000 CFU/ml”。3).3).3).3).结果解释:通常引起泌尿系统感染的细菌有大肠埃希菌、结果解释:通常引起泌尿系统感染
14、的细菌有大肠埃希菌、结果解释:通常引起泌尿系统感染的细菌有大肠埃希菌、结果解释:通常引起泌尿系统感染的细菌有大肠埃希菌、肺炎克雷伯氏菌等肠杆菌科细菌及肠球菌等革兰氏阳性球肺炎克雷伯氏菌等肠杆菌科细菌及肠球菌等革兰氏阳性球肺炎克雷伯氏菌等肠杆菌科细菌及肠球菌等革兰氏阳性球肺炎克雷伯氏菌等肠杆菌科细菌及肠球菌等革兰氏阳性球 菌。菌。菌。菌。90%90%90%90%以上的泌尿系统感染为单一细菌感染,只有很少以上的泌尿系统感染为单一细菌感染,只有很少以上的泌尿系统感染为单一细菌感染,只有很少以上的泌尿系统感染为单一细菌感染,只有很少 量患者为两种混合细菌感染,当培养出三种以上的细菌量患者为两种混合细菌
15、感染,当培养出三种以上的细菌量患者为两种混合细菌感染,当培养出三种以上的细菌量患者为两种混合细菌感染,当培养出三种以上的细菌 时,可视为标本污染。当培养出大于时,可视为标本污染。当培养出大于时,可视为标本污染。当培养出大于时,可视为标本污染。当培养出大于101010105 5 5 5 CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml的细菌时,的细菌时,的细菌时,的细菌时,通常认为可能是尿路感染或肾盂肾炎,当培养出通常认为可能是尿路感染或肾盂肾炎,当培养出通常认为可能是尿路感染或肾盂肾炎,当培养出通常认为可能是尿路感染或肾盂肾炎,当培养出101010104 4 4 4-10-10-10-1
16、05 5 5 5 CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml的细菌时,诊断不确定,当培养出小于的细菌时,诊断不确定,当培养出小于的细菌时,诊断不确定,当培养出小于的细菌时,诊断不确定,当培养出小于101010103 3 3 3 CFU/ml CFU/ml CFU/ml CFU/ml的的的的 细菌时,通常认为是标本污染。细菌时,通常认为是标本污染。细菌时,通常认为是标本污染。细菌时,通常认为是标本污染。上一页下一页返回返回3.3.3.3.脑脊液脑脊液脑脊液脑脊液 中枢神经系统的感染有很多原因。化脓性脑炎主中枢神经系统的感染有很多原因。化脓性脑炎主中枢神经系统的感染有很多原因。化脓性脑
17、炎主中枢神经系统的感染有很多原因。化脓性脑炎主 要是由细菌、真菌等引起,偶尔也由寄生虫引起。要是由细菌、真菌等引起,偶尔也由寄生虫引起。要是由细菌、真菌等引起,偶尔也由寄生虫引起。要是由细菌、真菌等引起,偶尔也由寄生虫引起。1).1).1).1).标本采集:按先后顺序取标本采集:按先后顺序取标本采集:按先后顺序取标本采集:按先后顺序取3 3 3 3管脑脊液,每管管脑脊液,每管管脑脊液,每管管脑脊液,每管2-5ml2-5ml2-5ml2-5ml。1 1 1 1号试号试号试号试 管:细菌检查;管:细菌检查;管:细菌检查;管:细菌检查;2 2 2 2号试管:生化学或血清学检查;号试管:生化学或血清学
18、检查;号试管:生化学或血清学检查;号试管:生化学或血清学检查;3 3 3 3号试号试号试号试 管;细胞计数等常规检查。管;细胞计数等常规检查。管;细胞计数等常规检查。管;细胞计数等常规检查。2).2).2).2).革兰氏染色检查有助于迅速查出肺炎链球菌或流感嗜血革兰氏染色检查有助于迅速查出肺炎链球菌或流感嗜血革兰氏染色检查有助于迅速查出肺炎链球菌或流感嗜血革兰氏染色检查有助于迅速查出肺炎链球菌或流感嗜血 杆菌等细菌性感染。杆菌等细菌性感染。杆菌等细菌性感染。杆菌等细菌性感染。3).3).3).3).培养方法:将脑脊液培养方法:将脑脊液培养方法:将脑脊液培养方法:将脑脊液150015001500
19、1500转离心转离心转离心转离心15151515分钟,取沉渣进行培分钟,取沉渣进行培分钟,取沉渣进行培分钟,取沉渣进行培 养,养,养,养,5%CO5%CO5%CO5%CO2 2 2 2环境、环境、环境、环境、35353535 C C C C培养培养培养培养3 3 3 3天。天。天。天。上一页下一页返回返回4.4.4.4.痰痰痰痰 正正正正常常常常人人人人体体体体的的的的下下下下呼呼呼呼吸吸吸吸道道道道是是是是无无无无菌菌菌菌的的的的,留留留留取取取取痰痰痰痰标标标标本本本本时时时时由由由由于于于于经经经经 常常常常混混混混入入入入上上上上呼呼呼呼吸吸吸吸道道道道的的的的分分分分泌泌泌泌物物物物
20、,通通通通常常常常痰痰痰痰培培培培养养养养时时时时总总总总是是是是可可可可以以以以见见见见到到到到上上上上呼呼呼呼吸吸吸吸道道道道的的的的正正正正常常常常菌菌菌菌群群群群。因因因因此此此此判判判判断断断断下下下下呼呼呼呼吸吸吸吸道道道道中中中中是是是是否否否否有有有有致致致致病病病病菌菌菌菌,必必必必须须须须了了了了解解解解上上上上呼呼呼呼吸吸吸吸道道道道的的的的正正正正常常常常菌菌菌菌群群群群。留留留留取取取取的的的的痰痰痰痰标标标标本本本本的的的的质质质质量量量量也也也也直直直直接接接接影影影影响响响响培培培培养养养养的的的的结结结结果果果果。根根根根据据据据痰痰痰痰涂涂涂涂片片片片革革革
21、革兰兰兰兰氏氏氏氏染染染染色色色色的的的的结结结结果可以判断痰标本的质量。果可以判断痰标本的质量。果可以判断痰标本的质量。果可以判断痰标本的质量。培培培培养养养养方方方方法法法法:将将将将痰痰痰痰液液液液进进进进行行行行洗洗洗洗净净净净、均均均均质质质质化化化化处处处处理理理理后后后后,接接接接种种种种于于于于血血血血平平平平板板板板、巧巧巧巧克克克克力力力力平平平平板板板板、麦麦麦麦康康康康凯凯凯凯平平平平板板板板。痰痰痰痰中中中中的的的的致致致致病病病病菌菌菌菌不不不不少少少少属属属属于于于于条条条条件件件件致致致致病病病病菌菌菌菌,与与与与正正正正常常常常菌菌菌菌群群群群同同同同时时时时
22、存存存存在在在在,在在在在培培培培养养养养报报报报告告告告中中中中应应应应作作作作说说说说明明明明,通通通通常常常常以以以以报报报报告告告告草草草草绿绿绿绿色色色色链链链链球球球球菌菌菌菌和和和和奈奈奈奈瑟瑟瑟瑟氏氏氏氏菌菌菌菌为为为为正正正正常常常常菌菌菌菌群群群群的的的的指指指指标标标标,同时要注明相应菌群的量。同时要注明相应菌群的量。同时要注明相应菌群的量。同时要注明相应菌群的量。上一页下一页返回返回5.5.5.5.浓浓浓浓汁汁汁汁 组组组组织织织织或或或或器器器器官官官官的的的的化化化化脓脓脓脓性性性性感感感感染染染染,其其其其病病病病原原原原菌菌菌菌的的的的来来来来源源源源可可可可分
23、分分分为为为为两两两两类类类类,内内内内源源源源性性性性和和和和外外外外源源源源性性性性。内内内内源源源源性性性性的的的的感感感感染染染染源源源源是是是是炎炎炎炎症症症症局局局局部部部部周周周周围围围围器器器器官官官官中中中中的的的的正正正正常常常常菌菌菌菌群群群群,由由由由于于于于损损损损伤伤伤伤等等等等因因因因素素素素造造造造成成成成正正正正常常常常栖栖栖栖居居居居菌菌菌菌进进进进入入入入无无无无菌菌菌菌状状状状态态态态的的的的组组组组织织织织内内内内发发发发生生生生感感感感染染染染。外外外外源源源源性性性性的的的的感感感感染染染染源源源源是是是是存存存存在在在在于于于于人人人人体体体体外
24、外外外部部部部自自自自然然然然界界界界的的的的微微微微生生生生物物物物,由由由由于于于于外外外外伤伤伤伤和和和和直直直直接接接接接接接接触触触触,外外外外界界界界微微微微生生生生物物物物通过人体表面进入人体,造成感染。通过人体表面进入人体,造成感染。通过人体表面进入人体,造成感染。通过人体表面进入人体,造成感染。1).1).1).1).革革革革兰兰兰兰氏氏氏氏染染染染色色色色涂涂涂涂片片片片检检检检查查查查:直直直直接接接接涂涂涂涂片片片片可可可可迅迅迅迅速速速速为为为为临临临临床床床床提提提提供供供供最最最最初初初初的的的的诊断依据,对淋病奈瑟菌、产气荚膜梭菌等的诊断有意义。诊断依据,对淋病
25、奈瑟菌、产气荚膜梭菌等的诊断有意义。诊断依据,对淋病奈瑟菌、产气荚膜梭菌等的诊断有意义。诊断依据,对淋病奈瑟菌、产气荚膜梭菌等的诊断有意义。2).2).2).2).培培培培养养养养与与与与鉴鉴鉴鉴定定定定:通通通通常常常常将将将将标标标标本本本本接接接接种种种种于于于于血血血血平平平平板板板板、麦麦麦麦康康康康凯凯凯凯平平平平板板板板、巧巧巧巧克克克克力力力力平平平平板板板板等等等等三三三三种种种种培培培培养养养养基基基基,疑疑疑疑为为为为厌厌厌厌氧氧氧氧菌菌菌菌感感感感染染染染时时时时还还还还要要要要接接接接种种种种厌厌厌厌氧氧氧氧血平板。血平板。血平板。血平板。3).3).3).3).对对
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- 关 键 词:
- 临床 微生物学 检验 抗菌 药物 敏感性 试验 进展
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