DB11∕T 1186-2015 枣疯病综合防治技术规程.pdf
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1、ICS 65.020.20 B 16 备案号:45803-2015 DB11 北京市地方标准 DB11/T 1186-2015 枣疯病综合防治技术规程 Technical code of practice for control of Jujube witches broom 2015-04-30 发布 2015-08-01 实施北京市质量技术监督局 发 布 DB11/T 1186-2015 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 病树的分级.1 5 防治措施.1 5.1 检疫措施.1 5.2 建园要求与品种选择.2 5.3 枣园环境治理.2 5.
2、4 栽培管理措施.2 5.5 病树清理.2 5.6 防治媒介昆虫.2 5.7 疯枝清理.2 5.8 换头改造.2 5.9 输液治疗.2 附录 A(资料性附录)枣疯病识别特征.3 附录 B(资料性附录)枣疯病病树分级.4 附录 C(资料性附录)枣疯病植原体 PCR 检测和检验方法.5 附录 D(资料性附录)常见传病叶蝉的生物学特性.7 附录 E(资料性附录)输液治疗防治枣疯病方法.8 参考文献.10 DB11/T 1186-2015 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准由北京市园林绿化局提出并归口。本标准由北京市园林绿化局组织实施。本标准起草单位:北京市林业
3、保护站。本标准参与起草单位:中国林业科学研究院、北京流村王园果园。本标准主要起草人:王合、陶万强、刘曦、田国忠、袁菲、潘彦平、任争光、郝少东、冯术快、李志朋、王峰、李杰、赵连祥。DB11/T 1186-2015 1 枣疯病综合防治技术规程 1 范围 本标准规定了枣疯病的病情分级和综合防治技术。本标准适用于北京地区枣疯病的防治。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 4285 农药安全使用标准 GB/T 8321.8-2007 农药合理使用准则(八)GB
4、/T 8321.9-2009 农药合理使用准则(九)3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 植原体 phytoplasma 原称类菌原体(mycoplasma-like organism,MLO),为单细胞原核生物,无细胞壁,寄生在植物韧皮部筛管中和介体昆虫体内。3.2 枣疯病 Jujube witches broom 是一种植原体引起的维管束系统病害,以枝叶丛生、花器返祖为主要症状,严重时可导致枣树死亡。注:识别特征参见附录 A。4 病树的分级 分级标准参见附录 B。5 防治措施 5.1 检疫措施 DB11/T 1186-2015 2 5.1.1 加强枣树苗木、接穗的调运检疫,接
5、穗、砧木、苗木等繁殖材料携带植原体检测和检验方法参见附录 C。5.1.2 发现带病接穗、砧木、苗木等植物繁殖材料应及时销毁,不得引入新枣园或已建立的无病枣园,防止枣疯病扩散蔓延。5.2 建园要求与品种选择 5.2.1 宜在没有发生枣疯病的地区建园,在栽培枣和酸枣发病严重区建园时可选用抗病、耐病品种,如星光、黑腰子枣、唐星、阜星、嘎嘎枣、尜尜枣、葫芦枣、骏枣、壶瓶枣、洪赵小枣、月光等品种。慎用易感病品种,如梨枣、冬枣、泡泡红枣、金丝小枣、赞皇大枣等。5.2.2 宜在无病区用健康酸枣种子培育实生苗和建优良品种采穗圃;有条件的应推广应用脱毒苗;在病区建采穗圃,应在防虫网室内。5.3 枣园环境治理 5
6、.3.1 枣园周边不宜栽植松、柏、桑等植物,不宜在枣园内间作芝麻、月季花等媒介昆虫的嗜食植物。5.3.2 枣树发芽前和生长期间应及时清除桑、榆等其他植物和杂草。5.3.3 彻底刨除枣园周围已经染病的酸枣。5.4 栽培管理措施 因地制宜,合理施用有机肥,增施磷钾肥;适度修剪,提高树体通透性和光照强度;控制结果数量,保持健康树势。5.5 病树清理 5.5.1 对于新建枣园或无病树枣园,发现病株,应及时清除。5.5.2 对于发病率较高,且品种抗病性较低的枣园,发现病株,应及时刨除并补栽抗病性强的品种,古树名木除外。5.5.3 刨除病树后的树坑应晾晒,待残根风干后再进行补植。5.6 防治媒介昆虫 主要
7、媒介昆虫的形态特征和发生规律参见附录 D;可选用内吸性、触杀性的杀虫剂;使用方法按照 GB/T 8321.8、GB/T 8321.9 和 GB 4285 执行。5.7 疯枝清理 对于发病较轻(级以下,含级)枣树的疯枝、带病根蘖,应立即清除。疯枝清理的原则是“疯小枝去大枝”,即从疯枝的上一级次枝条基部去除,不留桩。5.8 换头改造 对于发病较重(级以上,含级)且有保存价值的病树,利用星光、黑腰子等抗病品种进行多头高接。高接时间一般在4月中下旬5月下旬。高接部位宜低不宜高,并及时清除砧木萌蘖。5.9 输液治疗 对于发病较轻(级以下,含级)枣树和古树名木等有保留价值的病树,可进行树干输液(滴注)治疗
8、。治疗时间为枣树展叶后至开花前 1 周。输液治疗方法参见附录表 E.1,药剂使用量参见附录表 E.2。DB11/T 1186-2015 3 A A 附 录 A(资料性附录)枣疯病识别特征 A.1 地上部分 被害植株出现叶片变小,枝叶丛生、纤细、小叶黄化等。多出现在新生的枣头上。花器症状表现为花器退化,花梗明显延长,是正常花梗的36倍,萼片、花瓣、雄蕊发育成小叶,雌蕊发育成小枝。枝叶症状表现为1年生发育枝的主芽和多年生发育枝上的隐芽非正常萌发,一年多次萌生出细小枝叶,病枝纤细,节间缩短,形成“丛状枝”。果实症状表现为大小不一,果面着色不匀,凸凹不平,凸起部位呈红色,凹陷部位呈绿色,果肉疏松,失去
9、食用价值。A.2 地下部分 根部发病后,萌生的根蘖也呈稠密的丛枝状,长到 30cm 左右便停止生长继而枯死。病根发病初期皮呈褐色,后期形成点发性溃疡斑,最终死亡。DB11/T 1186-2015 4 B B 附 录 B(资料性附录)枣疯病病树分级 枣疯病病树分级见表B.1。表B.1 枣疯病病树分级表 病级 表现症状 0 无疯枝。仅有 1 2 个小病枝,其他枝条外观正常。病枝占总枝量的 1/4 以下,其他枝条外观正常。病枝占总枝量的 1/4 1/2 以下,其他枝条外观正常。病枝占总枝量的1/2 3/4以下,但尚有枝条外观正常。病枝占总枝量的3/4以上(含),病枝遍布全树,基本无正常枝条。DB11
10、/T 1186-2015 5 C C 附 录 C(资料性附录)枣疯病植原体 PCR 检测和检验方法 C.1 枣树和植原体总DNA提取方法 C.1.1 CTAB碱裂解法 CTAB碱裂解法总DNA提取方法如下:a)取枣树树皮、叶柄、叶脉、根等含韧皮部组织,用液氮研磨成粉末状。b)称取0.1 g于2 mL离心管中,加入800 L 65 预热的CTAB提取液(2%CTAB、100 mM Tris-HCl pH 8.0、1.4 M NaCl、20 mM EDTA、0.2%-巯基乙醇),65 水浴1 h(期间轻轻混匀几次)。c)加入等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提,12000 rpm离心10
11、min,取上清液至离心管。d)加入等体积氯仿轻轻混匀,12000 rpm离心10 min,取上清液至离心管。e)加入等体积异丙醇轻轻混匀。f)将混匀的液体转入DNA吸附柱CB3(吸附柱容积为700 L左右,可分次加入离心)中,12000 rpm离心30 sec,弃掉废液。g)向吸附柱CB3中加入700 L 70%乙醇,12000 rpm离心30 sec,弃掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中,然后重复洗脱步骤。h)吸附柱CB3放入收集管中,12000 rpm离心2 min,倒掉废液。将吸附柱CB3放入1.5 mL离K心管并于室温开盖放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。i)向吸附膜的中央部
12、位悬空滴加100 L 1TE,室温放置2 min 5 min,12000 rpm离心2 min,将溶液收集到离心管中,-20保存备用。C.1.2 试剂盒法 可直接用商品化植物基因组DNA快速提取试剂盒提取。C.2 枣疯植原体的PCR检测验证 C.2.1 引物以植原体16S rRNA基因保守序列设计引物对R16mF2/R2(R16mF2:5-CATGCAAGTCGAACGGA-3,R16mR2:5-CTTAACCCCAATCATCGA-3)和R16F2/R2(R16F2:5-ACGACTGCTAAGACTGG-3,R1:5-TGACGGGCGGTGACAAACCCC G-3)进行直接PCR或Ne
13、sted-PCR。a)直接 PCR 反应体系(50 L):1 L5 L 模板 DNA,1 L 10 mM dNTP,5 L10 PCR buffer,1 L4 L 引物(R16mF2/R16mR2),加 0.5 uL Taq 酶,加蒸馏水至 50 uL。扩增条件:94 变性 5 min;94,45 s;52,30 s;72,90 s;扩增 30 个35 个循环,然后 72,10 min。b)Nested-PCR:取直接PCR产物稀释40倍后取1 uL作DNA模板,引物为R16F2/R2,其它条件同直接PCR。C.2.2 扩增产物用1%琼脂糖凝胶电泳,然后于紫外灯下检查1.2 kb(Nested
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