DB14_T 1510-2017 玉米镰孢穗腐病抗性鉴定牙签接种技术规程(山西省).pdf
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1、ICS 65.020.20 B 05 B 山西省抽出ETA、万标准DB 14fT 1510一-2017玉二-A 产-r 2017-12-10发布2018-02-10实施山西省质量技术监督局发布目UI=l1 范围2 规范性引用文件目、hlDB 14/T 1510-2017 11 3 术语和定义14 5 6 7 8 9 南种分离菌种繁殖接种四间管理捎信调查抗性评价.附录A(资料性附录)附录B(资料性附录产-r I 2 2 3 3 3 4 5 7 DB 14/T 1510-2017 11 目IJ口本标准根据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西农业大学提出并归口C本标准起草单位:山西农
2、业大学农学院。才又标准主要起草人:张作刚、王建明、李新风、高俊明、胡春艳、曹挥、王春伟、王燕。产-r DB 14/T 1510-2017 玉米镰于包穗腐病抗性鉴定1 DB 14/T 1510-2017 牙签接种技术规程2 牙签接种技术规程产-r DB 14/T 1510-2017 3 DB 14/T 1510-2017 牙签接种技术规程1 范围本标准规定了玉米镰抱穗腐病抗性鉴定牙签接种的菌种分离、菌种繁殖、接种、田间管理、病情调查及抗性评价。本标准适用于栽培玉米(Zeamays L.)白交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生玉米和玉米近缘种对玉米镰抱穗腐病抗性的田间鉴定和评价。2 规范性引用
3、文件NY/T 1248.8 3 术语和定义下列术语和定义适用于F3.1 镰子包穗腐病3.2 带菌牙签土面长有接种用菌种的牙签。3.3 牙签接种将带雨牙签接种于植物适宜的部位O3.4 级别产-r 定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。3.5 抗性评价4、件,仅注日期的版本适用于本文件。h E文件。iumJamJnarum)等镰J包菌侵染而DB 14/T 1510-2017 根据采用的技术标准判别植物奇主对特定病虫害反应程度和抵抗水平的描述。4 菌种分离4.1 分离以常规组织分离法从发病玉米籽粒中分离穗腐病致病镰子包菌。分离物经形态学鉴定确认为镰抱菌(Fusarium sp.)后,进行分离物的单
4、J包纯化。4.2 致病性测定通过玉米穗部接种或幼苗根系接种明确分离物致病性。将发病的组织再分离培养,分离物再通过形态学方法,必要时结合现代分子生物学技术确定其种类。5 菌种繁殖5.1 菌种准备无菌条件下将病原镰J种长满平板后冷藏待用。,二百5.2 麦粒准备夺100g麦粒放300t如瓶中,水冲洗2-3次,然后筐去H耐瓶中的5.3 牙签准备5.3.1 洗煮牙签将牙签在洁水中浸泡12水冲洗2-3次。5.3.2 渗入营养回上,25 oc恒温培养7-8 d,菌冲洗1j2ij!待麦粒吸足水后,再用洁in-15 min,倒掉煮水后再用清、二二将洁水洗煮过的牙签放在锅中,力恰与其民革宁每1000 mL清水再加
5、入200g去皮马铃薯小块和15g,-,20 g葡萄糖制成营养液,一起煮20min-30 mino 5.3.3 沾拌面粉将营养液中煮过的牙签捞出,趁牙签表面湿润时随即放入加有1%琼脂粉的小麦田粉中,搅拌使牙签表面均匀地沾满面粉。每800-1 000根牙签需用小麦面粉30g-50 go 5.3.4 牙签装袋将沾满面粉的牙签轻放在菌袋中,使牙签之间保持一定的空隙,装满后扎住菌袋口,做成牙签菌袋。每袋装800-1000根牙签。5.4 高压贝菌将牙签菌袋与准备的麦粒高压蒸汽灭菌20mino 5 DB 14/T 1510-2017 5.5 麦粒拌菌无菌条件下,先用接种针或接种环将所准备菌种的菌丝体和培养基
6、一起划碎,再将其接入灭菌的麦粒中,摇动三角瓶使菌种与麦粒泪均,做成带菌麦粒。100g麦粒接一培养皿平饭菌种c5.6 菌袋接种无菌条件下,将带菌麦粒倒入灭菌的菌袋牙签中,扎住袋口,轻轻地上下左右翻动菌袋,使菌种充分粘着到牙签上以及麦粒均匀分散在牙签之间的缝隙中。每800-1 000根牙签需用带菌麦粒30g-50 go 5.7 培养保存将接种后的牙签南袋在25oc温度下培养7-10d,待牙签表面长满了南丝,即完成带菌牙签的培养。暂时不用,可将菌袋放4oc条件下冷藏保存。6 接种6.1 接种时期玉米吐丝10-1 5 d,p乳主l-t6.2 接种方法先用直径3叫翩翩叫后插入2恨带菌牙签。7 田间管理玉
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