DB36∕T 1658-2022 “赣葛 1 号”粉葛组培微插繁殖技术规程(江西省).pdf
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1、ICS 65.020.20 CCS B 05 DB36 江西省地方标准 DB36/T 16582022 “赣葛 1 号”粉葛组培微插繁殖技术规程 Technical regulation of micro-cutting propagation in tissue culture of pachyrhizua angulatus Gange No.1 2022 - 09 - 26 发布 2023 - 04 - 01 实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 16582022 I 目 次 前 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 组培准备 .
2、 1 5 培养基制作 . 2 6 材料选取 . 2 7 茎节微扦插 . 2 8 继代增殖 . 3 9 生根培养 . 3 10 试管苗移栽 . 3 11 档案管理 . 4 附录 A (规范性附录) MS 培养基母液配方及配制 . 5 附录 B (规范性附录) 植物生长调节物质母液配制方法 . 6 附录 C (规范性附录) MS 培养基的配制流程及方法 . 7 DB36/T 16582022 II 前 言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分: 标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由江
3、西省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位:江西农业大学农学院、江西中医药大学、江西绿色生态葛研究所、萍乡市农业科学研究中心。 本文件主要起草人:范淑英、吴才君、周庆红、马喜玲、黄琦、肖旭峰、罗莎、朱强龙、肖遥、孙静宇、单楠、朱卫丰、葛菲、朱德彬、吴波。 DB36/T 16582022 1 “赣葛 1 号”粉葛组培微插繁殖技术规程 1 范围 本文件规定了赣葛1号组织培养微型扦插繁殖技术的范围、规范性引用文件、术语和定义、组培准备、培养基制作、材料选取、茎节微扦插、继代增殖、生根和试管苗移栽、档案管理等。 本文件适用于“赣葛 1 号”粉葛组培苗快繁生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过
4、文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 NY/T 1000 容器育苗技术 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 赣葛 1 号 Gange No.1 块根呈纺锤状, 无 (少) 分叉, 根长 35 cm45 cm, 粗 9 cm12 cm, 单根重 2 kg 5 kg,鲜块根淀粉含量 18%25%,早熟,生长势强,生育周期 270 d 280 d 的粉葛新品种。 3.2 微型扦插 micro-cutting 使用外源激素,促进具有顶芽或没有顶芽的休眠侧
5、芽启动生长,进行芽苗的增殖培养,快速获得大量的芽苗后再进行生根培养,得到完整植株的这种繁殖方式称为微型扦插。 3.3 继代增殖 subculture reproduction 将增殖的不定芽组织从其基部切取分离, 转接到不定芽增殖培养基上进行一段时间培养后, 再将增殖的芽继续切成单芽转接到不定芽增殖培养基中继续培养,这样连续多代转接培养的方法。 4 组培准备 4.1 仪器设备 DB36/T 16582022 2 4.1.1 培养基制作及灭菌设备 天平、纯水机、pH计、高温高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱等。 4.1.2 无菌操作设备 超净工作台、灭菌器等。 4.1.3 培养室设备 空调、定时器、
6、培养架、摇床、光照培养箱、人工气候室等。 4.1.4 药品储存与配制设备 冰箱、万分之一天平等。(建议可加相应的序号) 4.2 器皿及器材 4.2.1 培养器皿 试管、锥形瓶、培养皿及各类专用培养瓶。 4.2.2 盛装器皿 烧杯、试剂瓶。 4.2.3 计量器皿 量筒、容量瓶。 4.2.4 操作器材 培养基分注器、细菌过滤器、镊子、剪刀、解剖刀。 4.3 化学试剂 包括组培苗基本培养基所需的无机盐类、有机物类及植物生长调节物质类等。MS基本培养基成分及母液配制应符合附录A的规定;其它常用试剂及植物生长调节物质的配制应符合附录B的规定。 5 培养基制作 5.1 MS 基本培养基配置 采用附录C的方
7、法配制固体MS培养基,组培瓶分装后放入高温高压蒸汽灭菌锅,在0.1 Mpa,121 条件下灭菌20 min,取出冷却凝固后备用。 5.2 培养基配制 按照附录C方法分别配制茎节微扦插的不定芽诱导、增殖和芽苗生根培养基。 茎节微扦插不定芽诱导培养基:MS + 1.5 mg/L 6-BA + 1 mg/L NAA+30 g/L 蔗糖+6.5 g/L 琼脂粉,pH 5.8,固体培养基; 不定芽增殖培养基:MS+1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA + 30 g/L 蔗糖+6.5 g/L 琼脂粉,pH 5.8,固体培养基; 芽苗生根培养基:MS+0.5 mg/L NAA + 30 g/
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