DB15∕T 2323-2021 燕麦籽粒及其制品中β-葡聚糖含量测定(内蒙古自治区).pdf
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1、TCS 67.060 CCS B22 0015 内= 荡之古自b. J口区山巳ET目,万标准DB1S/T 2323-2021 燕麦籽粒及其制品中。-葡聚糖含量测定Determ i nat i on of -G I ucan i n Oat Gra i ns and Products 2021-08-20发布2021-09-20实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T 2323-2021 目IJ1=1 本文件按照GB/T1.1-2020 标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会CSAM!TC20)归口。本文件起草单位:内蒙古农业
2、大学、内蒙古自治区植保植检站、呼和浩特市种子管理站。本文件主要起草人:韩冰、南金生、王跃飞、安江红、赵鸿彬、杨燕、刘慧艳、张文静、李庆华、王鑫、陈友君。DB15/T 2323-2021 燕麦籽粒及其制品中巳-葡聚糖含量测定1 范围本文件规定了燕麦籽粒及其制品中白葡聚糖含量的测定方法。本文件适用于燕麦籽粒及其制品面粉、款皮、麦片、饮品、发酵制品中P葡聚糖含量的测定,定量检测的检出限为0.0112g/go 2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件:不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
3、本文件。GB 5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB!T 6682分析实验室用水规格及试验方法3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 方法和原理用地衣聚糖酶将样品中的p一葡聚糖分子水解成寡糖,已一葡萄糖昔酶将寡糖水解成葡萄糖,GOPOD 试剂中的葡萄糖氧化酶使葡萄糖分解成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化氢酶作用下能够与4氨基安替比林生成红色酿类化合物,在510n日1处其吸光值与葡萄糖含量成正比,通过计算葡萄糖含量从而得到样品中p葡聚精含量。5 试剂5. 1 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682中规定的三级水。5. 2 氢氧化铀(NaOH
4、)。5. 3 磷酸二氢铀(NaH2P04)。5.4 叠氮化铀(NaN3)。5.5 无水乙醇(C2H60)。5. 6 冰醋酸(CH3COOH)。5. 7 对捏基苯甲酸(C7H603)纯度大于等于98%。DB15/T 2323-2021 5.8 地衣聚糖酶(活力大于1000U/mL)特异性的内切(1-3)(1-4)-D葡聚糖4葡聚糖水解酶。5.9 自葡萄糖昔酶(活力大于40U/mU以对硝基苯基自葡萄糖昔为底物进行标准化。5.10 葡萄糖氧化酶:纯度99.99%。5. 11 过氧化物酶:纯度99.99 %。5.12 4一氨基安替比林(C11H13N30)纯度大于等于98%。5.13 GOPOD试剂酶
5、:将12000U葡萄糖氧化酶、650U过氧化物酶和80mg 4氨基安替比林混合。5.14 氢氧化铀溶液(1mol/L)称取4.00g氢氧化制(5.2)于烧杯中,加入少量水溶解,持冷却至室温,用容量瓶定容至100日lL。5.15 氢氧化铀溶液(0.1mo1/U称取4.00 g氢氧化铀(5.2)粉末于烧杯中,加入少量水溶解,待冷却至室温,用容量瓶定容至1000mL。5.16 乙醇溶液(50%, V/V) :取一定量无水乙醇(5.5)加入到等体积水中,充分泪匀O5.17 磷酸铀缓冲液(0.02mo1/U称取3.12g磷酸二氢铀(5.3)溶于900mL水中,用0.1mo1/L 氢氧化铀溶液(5.15)
6、调节pH值为6.5,用容量瓶将体积定容至1000 mL,再加入0.2g叠氨化铀。4oc 保存,稳定性2个月O5.18 醋酸铀缓冲液(0.05 mol/U量取2.90mL J醋酸(5.6)至900mL水中,用0.1mol/L氢氧化呐溶液(5.15)调节pH值为4.0,用容量瓶将体积定容至1000 mL,加入0.2g叠氮化纳。4oc保存,稳定性2个月。5.19 醋酸纳缓冲液(0.2mo1/U量取11.60 日lL冰醋酸(5.6)至900日lL水中,用1日lO1/L氢氧化铀溶液(5.14)调节pH值为4.0,用容量瓶将体积定容至1000mL,加入0.2g叠氮化铀。4oc保存,稳定性2个月。5. 20
7、 地衣聚糖酶溶液(50U/mU将1mL地衣聚糖酶(5.8)用0.02mo1/L磷酸制缓冲液(5.17) 稀释至20.0mL。现用现配。5.21 一葡萄糖昔酶溶液(2U/mU :将1mL自一葡萄糖昔酶(5.9)用0.05mo1/L醋酸铀缓冲液(5.18) 稀释至20.0mL。现用现配。5.22 GOPOD缓冲液(0.095%, W/V) :取O.95 mg对提基苯甲酸(5.7),用0.1mo1/L氢氧化铀溶液(5.15)调节pH值为7.4,用容量瓶将体积定容至1000mL,加入0.2g叠氮化纳。40C保存,稳定性4年。5. 23 GOPOD酶液:将50.0mL GOPOD缓冲液(5.22)用水稀
8、释至1L,取20.0mL稀释后的GOPOD缓冲液溶解GOPOD试剂酶,向溶解后的酶液加入剩余的GOPOD缓冲液,该溶液即为葡萄糖测定试剂,新鲜配制的酶液为淡黄色或淡粉色,相对于水,该酶液的吸光值应小于O.05。现用现配。5.24 D一葡萄糖标准品:纯度大于等于98%, CAS号为50-99-705. 25 D葡萄糖标准液(1.0 mg/mU精确称取0.05g D葡萄糖(5.24),溶于水中,并移入50mL 容量瓶中,稀释至刻度线,混匀,-20 oC保存。2 5.26 葡聚糖标准品:含量7.5 % (干重)。6 仪器和设备。1分光光度计:波长范围380nm780 nm;配10mm比包皿。6. 2
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