DB33∕T 2333-2021 饲料中β-胡萝卜素的测定 高效液相色谱法(浙江省).pdf
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1、 CCICS 65.020.01 CCS B 20 浙江省地方标准 DB33 DB33/T 23332021 饲料中 -胡萝卜素的测定 高效液相色谱法 Determination of -carotene in feeds High performance liquid chromatography 2021-04-13 发布 2021-05-13 实施 浙江省市场监督管理局 发布 DB33/T 23332021 II 前 言 本标准按GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别这些专
2、利的责任。 本标准由浙江省农业农村厅提出。 本标准由浙江省畜牧兽医和饲料标准化技术委员会(ZJQS/TC33)归口。 本标准起草单位:浙江省动物疫病预防控制中心(浙江省兽药饲料监察所)。 本标准主要起草人:施杏芬、吕伟军、阮鑫、张志健、裘丞军、吴望君、商小金。 DB33/T 23332021 1 饲料中 -胡萝卜素的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了饲料中-胡萝卜素的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料中-胡萝卜素的测定。 本标准配合饲料、 浓缩饲料、 精料补充料的定量限为1 mg/kg, 添加剂预混合饲料的定量限为2 mg/kg。 2
3、 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本标准;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。 GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 术语和定义 本标准没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中-胡萝卜素经碱溶液超声皂化,生成全反式-胡萝卜素,经石油醚萃取,减压浓缩后,用高效液相色谱法测定,外标法定量。 5 试剂或材料 除非另有规定,仅使用分析纯试剂。 5.1 水:GB/T 6682-2008,一级。 5.2 甲
4、醇:色谱纯。 5.3 异丙醇:色谱纯。 5.4 二氯甲烷:色谱纯。 5.5 石油醚(沸程3060)。 5.6 正己烷。 5.7 无水硫酸钠。 5.8 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)。 5.9 2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)。 5.10 L-抗坏血酸乙醇溶液:称取L-抗坏血酸0.5 g,加4 mL水加热溶解,用无水乙醇稀释至100 mL混匀(现配现用)。 5.11 50%氢氧化钾溶液:称取氢氧化钾50 g,加水100 mL溶解,混匀。 DB33/T 23332021 2 5.12 饱和氯化钠溶液:先将烧杯中的水煮沸,向沸水中边搅拌边加入氯化钠,直到有固体颗粒析出,将此溶液冷却至室温。 5.13
5、标准储备溶液(500 g/mL):称取全反式-胡萝卜素标准品(CAS:7235-40-7,纯度不低于95%)50 mg(精确至0.01 mg)至100 mL棕色容量瓶中,加入10 mL二氯甲烷(5.4)溶解,用二氯甲烷(5.4)稀释并定容至刻度,混匀,每次临用前按附录A标定。-20保存,有效期2个月。 5.14 标准中间溶液(100 g/mL):精确移取-胡萝卜素标准储备溶液(5.13)10.0 mL于50 mL棕色容量瓶中,加入二氯甲烷(5.4)稀释并定容。于4保存,有效期为1周。 5.15 标准系列溶液:精确移取适量-胡萝卜素标准中间溶液(5.14)于100 mL棕色容量瓶中,用流动相稀释
6、定容配成系列标准溶液, 浓度分别为0.0g/mL、 0.50 g/mL、 1.00 g/mL、 2.50 g/mL、 5.00 g/mL、10.00 g/mL。临用现配。 5.16 微孔滤膜:0.45 m,有机系。 6 仪器设备 6.1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器/二极管阵列检测器。 6.2 分析天平:感量分别为0.001 g和0.01 mg。 6.3 超声波清洗器。 6.4 旋转蒸发仪。 6.5 旋涡仪。 6.6 分光光度计。 7 样品 按GB/T 20195制备试样,至少200 g,粉碎使其全部通过0.42 mm孔径的分析筛,充分混匀,装入磨口瓶中,避光保存,备用。 8 试验步骤 警示
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