SN∕T 3971-2014 小反刍兽疫免疫胶体金试纸卡检测方法.pdf
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1、书 书 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 小反刍兽疫免疫胶体金试纸卡检测方法犐犿犿狌 狀 狅 犮 犺 狉 狅犿犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 犻 犮犪 狊 狊 犪 狔狅 犳犮 狅 犾 犾 狅 犻 犱 犪 犾犵 狅 犾 犱犳 狅 狉犱 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 犲 狊 狋 犲犱 犲 狊狆 犲 狋 犻 狋 狊狉 狌犿 犻 狀 犪 狀 狋 狊 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书 书 书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国西藏出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华
2、人民共和国云南出入境检验检疫局。本标准主要起草人:杨俊兴、刘忠清、杨云庆、赤列加措、花群义、吕建强、祝贺、孙洁、艾军、唐金明。犛犖犜 小反刍兽疫免疫胶体金试纸卡检测方法范围本标准规定了小反刍兽疫免疫胶体金试纸卡检测方法。本标准适用于小反刍兽疫抗体的快速检测。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法 出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范缩略语下列缩略语适用于本文件。:牛血清白蛋白 :免疫层析试纸:磷酸缓冲液:小反刍兽疫:小反刍兽疫病
3、毒:链球菌蛋白主要设备 恒温箱。 电子天平:精确值 。 台式冷冻离心机:最大离心力 犵。 计。 试纸喷膜仪。 试纸条切割机:可连续切割出宽试纸。主要试剂和材料除特别说明外,本标准所用试剂均为分析纯。试验用水为符合 规定的三级水。 氯金酸溶液( ) 。 :配方见附录。 蛋白:为基因工程表达蛋白抗原。 链球菌蛋白() 。犛犖犜 柠檬酸钠溶液。 碳酸钾溶液() :配方见附录。 抗多克隆抗体。 牛血清白蛋白。 硝酸纤维素膜。 玻璃纤维棉纸。 干燥剂。 阳性血清,由指定单位提供。 阴性血清,由指定单位提供。检测原理将胶体金标记的固定于金标垫,检测线为纯化的蛋白,对照线为兔抗。检测时,阳性样品中的抗抗体与
4、胶体金标记特异性地结合,在膜上移动时,被检测线上的蛋白捕获,胶体金颗粒聚集于此,形成红色的条带,即检测线。相反,阴性样品中不含抗抗体,在检测线处不形成红色条带。对照线试剂兔抗与胶体金标记结合,捕获金标复合物,形成对照线。免疫胶体金试纸卡的组装 金标犛犘犌及金标垫的制备首先用碳酸钠溶液调胶体金溶液的值为 ,向 胶体金溶液中缓慢地加入适量溶液,室温搅拌 ,缓慢加入 至其终浓度为(质量浓度) ,继续搅拌 。 犵离心 ,将上清转移至另一离心管中, 犵离心 ,小心弃去上清。用(即 原体积)( )重悬沉淀。加入(质量浓度)的叠氮钠()溶液至终浓度为 ,用试纸喷膜仪将胶体金溶液喷于 玻璃纤维棉上,速度为 ,
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