NY∕T 1248.8-2016 玉米抗病虫性鉴定技术规范 第8部分:镰孢穗腐病(农业).pdf
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1、ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/ T 1248.8一2016玉米抗病虫性鉴定技术规范第8部分:镰抱穗腐病Technical specification on evaluation of maize resistance to pests-Part 8: Fusarium and gibberella ear rot 2016-10-26发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T 1248.8-2016 . 刚昌学寸坠14万仲1林农省北所河究帆附梅州阳刚肌士且旷拗术件技业分业农部农省个同林LU全吉荆州所所晋轧究究出bw栩叫他明阳科范现现L科
2、保洁利肋胆湖山时石技分制并翩翩贤辑部时赳学学附80甘京叶T牛吁伊性批批庇病;第m局MM阵啦病病腐腐腐哺际栅际附土问问农农晓抗病病穗叶膜茎茎穗病抱斑黑缩M1子同情长斑斑黑花米霉抱抱枯叫大小丝矮玉腐镰镰纹奇戒陆相U归附Mm即队什此处处热热热热热处处分分分分盯muMU剧所缸M部部部部部部部部部哺呻硝呻N照农草究要11234567891111为按由起研主T第第第第第第第第第第第第第分分分分护分盯一一一一一一一一一一一一一部部部部保部N一一一一一一一一二一-一本本本本物本中且i,E 院I 1 范围本部分规定了玉本部分适用于栽培缘种对镰抱穗腐病抗性2 术语和定义2. 1 2. 3 辈子采用粗3.1 病原菌
3、分离以常规组织分离菌(Fusariumspp. ) 3. 2 致病种鉴定玉米抗病虫性鉴定技术规范第8部分:镰抱穗腐病由于多种镰抱菌可以引起玉NY/ T 1248.8-2016 品种以及野生玉米和玉米近菌所引起的粒腐烂或全态学鉴定确认为镰抱鉴定采用形态学方法并结合分子鉴定技行特异性检测;若病原菌为禾谷镰抱复合种,还应对病原菌的翻译延伸因子(translationelongation factor 1 alpha, TEF -1 a)等基因进行序列测定,通过基因序列比对,确定病原菌的种(参见附录A)。通过玉米幼苗根系接种,明确病原菌的致病性。3.3 病原菌繁殖在接种前需要进行病原菌的繁殖。3.3.
4、1 拟轮枝镰抱分生于包子的产生将病原菌接人液体培养基中,在250C、自然光下静置培养10d15 d。以双层纱布过滤培养物并获得分生抱子悬浮液,用无菌水将分生于包子悬浮液浓度调至2X106抱子/mL,即可用于接种。1 NY/T 1248.8-2016 3. 3. 2 禾谷镰抱分生于包子的产生将病原菌接入分生抱子诱导培养基中,在250C、自然光条件下振荡(120rpm)培养7d。以双层纱布过滤培养物并获得分生于包子悬浮液,用无菌水将分生于包子悬浮液浓度调至2X 106抱子/mL,即可用于接种。分生抱子悬浮液可在20C40C下保存3周4周。3. 3. 3 拟轮枝镰抱/禾谷镰于包带菌牙签的培养在马铃薯
5、葡萄糖琼脂平板培养基或倒有培养基的100mL容量烧杯中接种拟轮枝镰抱或禾谷镰抱。培养7d后,将元菌牙签捅人长满镰抱菌的培养基中,250C下黑暗培养7d10d,待菌丝生长至牙签1/3处后即可用于接种。4 抗病性鉴定圃4. 1 鉴定圃设置鉴定圃应具备良好的自然发病环境,能够进行自主灌溉。4. 2 鉴定设计鉴定材料随机排列或顺序排列。在进行选育品种抗病性鉴定时,每30行鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料(参见附录B)。在进行种质资源抗病性鉴定时,每50行鉴定材料设l组已知抗病和感病对照材料。4. 3 种植要求鉴定材料播种时间与生产播种时间相同。鉴定小区行长5.00m,行距0.60m或0.65m,条
6、播或穴播,确保每行留苗25株30株,低于25株时视为该品种/材料鉴定无效。鉴定种质资源时,每份鉴定材料种植l行;鉴定选育品种时,每份材料种植2行。土壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同。5 接种5. 1 接种时期接种时期为玉米雌穗吐丝后4d7 d(Rl) ,接种可全天进行。5. 2 接种方法5.2. 1 花丝通道接种接种采用注射法,器具为可进行连续定量注射的连动注射器。将注射器吸液管置于病原菌的分生于包子悬浮液中,金属的注射针管从雌穗顶端上方的花丝通道部位侧边插入至花丝通道中间,定量注人2mL接种液。注人的菌液沿花丝向雌穗的籽粒方面流淌,分生于包子萌发,菌丝生长,完成对籽粒的侵染。每株仅接种第一
7、个雌穗。5. 2. 2 籽粒伤口接种5.2.2. 1 针刺接种方法一为用空心金属钊连接有注射接种液的器具在雌穗中上部苞叶外进行穿刺,当金属针刺人籽粒时,同时进行注射接种。方法二为用端部钉有2个5个金属钉的木棒穿刺雌穗中上部苞叶,深度约5mm,直至籽粒中部;穿刺前,金属钉先在镰子包菌分生抱子悬浮液中浸蘸,以使病原菌附着在钉子上,穿刺时即完成对籽粒的接种。5.2.2.2 牙签接种将经过培养后带有大量病原菌菌丝的牙签直接在雌穗中上部苞叶外刺人井达到籽粒中部。为确保菌丝被带人籽粒,接种采用双牙签法,也可用尖的金属器具先在雌穗上钻孔,然后捕人带菌牙签。5. 3 接种前后的田间管理接种鉴定田不应特殊管理。
8、玉米接种后适度保持田间大气湿度即可满足发病要求。2 NYj T 1248.8-2016 6 病情调查6. 1 调查时间在玉米生理成熟后(R6)进行调查。6. 2 调查方法采收接种的雌穗,去除苞叶后逐穗调查并对雌穗籽粒被病菌雯染的面积进行分级记载。6. 3 病情分级依据表1中的描述,逐个记载调查雌穗的发病级别。图l为雌穗发病面积的模拟图。表1玉米对穗腐病抗性鉴定的病情级别划分病情分级描述发病丽和、占雌穗总面积0%-1%3 发病面积占雌穗总面积2%-10%5 发病面积占雌穗、总面积11%-25% 7 发病面积占l挂在穗总面积26%-50%9 发病面积占雌穗总面积51%-100%0% 1% lOO!
9、o 25% J 50% 100% 注:左为经花丝通道接种后的发病模拟.右为苞叶穿刺接种后的发病模拟。图1玉米雌穗发病面积模拟图(仿Reidet al. 1996) 7 抗性评价7.1 鉴定有效性判别当设置的感病对照材料平均病情级别注5.6时,该批次鉴定视为有效。7. 2 抗性评价标准计算每份鉴定材料雌穗的平均病情级别,并依据平均级别确定该鉴定材料对穗腐病的抗性,抗性的划分标准见表203 NY/T 1248,8-2016 表2玉米对镰子包穗腐病抗性评价标准平均病情级别抗性=二1.5高度抗病Highlyresistant(高抗HR)1. 63, 5 抗病Resistant(抗R)3, 65, 5
10、中度抗病Moderatelyresistant(巾抗MR)5, 67, 5 感病SusceptibleC感S)7, 69, 0 高度感病Highlysusceptible(高感HS)7, 3 重复鉴定若鉴定材料初次鉴定时表现为7, 4 抗性评价对初次鉴定结果和重鉴定材料进行抗性评价。编号4 A. 1. 1 拟轮枝镰抱(无无性态学名:F异名:约140m250m;(34)m。A. 1.3 燕麦镰抱(无性态)无性态学名:Fusarium avenac 附录A(资料性附录)玉米镰抱穗腐病病原菌有性态学名:Gibberella avenacea Cook NY/ T 1248.8-2016 3)m;大型
11、分有性态特征:较子囊抱子大小隔的分生抱子大小为:子囊壳卵圆状,直径燕麦镰于包无性态特征:大型分生于包子镰刀状,有隔膜1个3个,大小变化较大,(850)m X (3. 54. 5)m;无小型分生于包子和厚垣抱子。有性态特征:子囊壳球形或梨形;子囊棒状,(70100)mX (9 12)m,内含8个子囊子包子;子囊子包子无色,近镰刀状,中间具1隔,(l3 19)mX (45)m。A. 1.4 亚蒙古团镰抱(无性态)/亚薪团赤霉菌(有性态)元性态学名:Fusarium subglutinans(Wollenweber &. Reinking)Nelson, Toussoun and Marasas 异
12、名:Fusarium moniliforme var. subglutinans Wollenweber &. Reinking Fusarium s阳charivar. subglutinans(Wollenw巳ber&. Reinking)Nirenberg 3 NY / T 1248.8-2016 有性态学名:Gibbel-ella subglutinans (Edwards) Nelson, Toussoun &. Marasas 异名:Gibberella fujikuroi (Sawada) Wollenw. var. subglutinans Edwards 亚站团镰子包无性态特
13、征:小型分生于包子较小,长卵形或拟纺锤形,多元隔或1隔2隔,(6.4 12.7)mX (2. 54. 8)m,聚集成假头状勃抱子团;大型分生抱子镰刀形,较直,顶胞渐尖、足胞较明显,2个6个分隔,以3隔者居多2隔者大小(14.025.5)mX (2. 8 5.0)m; 3隔者大小(24. 244. 6)mX(3.55.0)m;4隔者大小(42.1 51. 0)mX (4. 85. 4)m;5隔者大小(43. 356. 1)mX (4. 85. 9)m。有性态特征:子囊壳球状;子囊长棒状,内含8个子囊抱子;子囊于包子大小(l215)mX(4. 55)m。A. 1.5 黄色镰抱(无性态)无性态学名:
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