CTC在肿瘤诊疗中的应用ppt课件.pptx
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1、循环肿瘤细胞(CTC)在液体活检中的特殊意义Circulating Tumor Cells韩世强Cancer Res.2003;63:3805-11.Breast Cancer Res.2009;11:R46.Am J Pathol.2011;178:989-96.循环肿瘤细胞(CTC)1869年 Aust Med J,Ashworth最早 在转移性癌症患者血液中观察到;存在于外周循环的各类肿瘤细胞统称;来自原发灶、转移灶或不明部位。大多数CTC在外周血循环中会发生凋亡,只有少数CTC才能够形成转移 循环肿瘤细胞指从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞。CTC形成、播散及转移的模式图原
2、发肿瘤血管生成侵润侵入血管内侵入血管外(CTC)血管内增殖(CTM)转移转移移播散肿瘤细胞(DTC)微转移休眠灶循环肿瘤细胞(CTC)循环肿瘤微栓(CTM)凋亡的CTC侵润肿瘤细胞扩增血管生成上皮间质转化(EMT)间质上皮转化(MET)转移到骨髓和其他器官 “液态活检”的标记物CTCctDNA(cfDNA)主要指来自于抗凝的外周血全血,完整的肿瘤细胞主要指来自于抗凝血外周血的血浆,片段化的DNA片段一般认为来源于肿瘤原发灶/转移灶肿瘤瘤细胞凋亡/坏死释放的DNA片段活细胞,一般不宜长期保存提取纯化后的核酸,可以保存可以用于细胞学形态、结构分析;也可以分析细胞DNA、RNA、蛋白质等各类标志物一
3、般用于DNA突变监测、甲基化等DNA修饰相关分析用于病情评价、预后判断,肿瘤早期诊断潜力不明确用于个体化治疗,肿瘤早期诊断潜力相对明确还有还有miRNAs,Peptides,Exosomes(外泌体),(外泌体),Secretomes(分泌物质组)等。(分泌物质组)等。组织活检的局限性很多肿瘤患者无法进行手很多肿瘤患者无法进行手术术穿刺受检者严重的不合适穿刺受检者严重的不合适穿刺自身的临床风险穿刺自身的临床风险某些肿瘤解剖位置不便进某些肿瘤解剖位置不便进行穿刺行穿刺肿瘤的异质性肿瘤的异质性阿拉伯医生Albucasis(936-1013)及其发明的外科手术器械Folia Histochem Cy
4、tobiol.2009年47卷2期191-7页 但但我我的的一一些些病病友友只只是是定定期期做做CT检查,并并不不抽抽血,是怎么回事呢?血,是怎么回事呢?如果您朋友的如果您朋友的肿瘤瘤对常常见标志物志物都不敏感,那我就没都不敏感,那我就没办法抽血法抽血查肿瘤了,只能等瘤了,只能等肿瘤瘤长到直径到直径0.5 cm以上再借助以上再借助CT或或MRI检查发现。但。但等等肿瘤瘤长大到肉眼能看到大到肉眼能看到时,治,治疗效果就很差了。效果就很差了。CTC“液体活检”Breast Cancer:N Engl J Med 351:781-791,2004Prostate Cancer:Lancet Onco
5、l 10:233-239,2009Colorectal Cancer:J Clin Oncol 26:3213-3221,2008获取取CTC需要解决的技需要解决的技术问题从从红细胞和白胞和白细胞中胞中富集富集恶性性肿瘤瘤细胞胞将将恶性性肿瘤瘤细胞与胞与红细胞、白胞、白细胞、正常上皮胞、正常上皮细胞、造血干胞、造血干细胞胞等等区分区分开来开来每10mL血液中可能仅含有几个到几十个循环肿瘤细胞,而10mL血液中含有的白细胞约有1亿个,红细胞有500亿个。三种技三种技术过滤法法ISET:Isolation by Size of Epithelial Tumor cells8m孔径孔径过滤膜,漏膜,
6、漏检体体积较小的小的肿瘤瘤细胞胞敏感性低敏感性低梯度密度法梯度密度法肿瘤瘤细胞和胞和单核核细胞密胞密度小于度小于1.077g/mlCTC纯度低,混入度低,混入较多多白白细胞胞肿瘤瘤细胞会迁移至血胞会迁移至血浆层,而聚集后容易下沉,而聚集后容易下沉聚蔗糖聚蔗糖-泛影葡胺泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)对细胞有毒性胞有毒性免疫磁珠法免疫磁珠法肿瘤瘤细胞表面抗原胞表面抗原CTC纯度低,混入较多纯度低,混入较多白细胞白细胞不能有效排除细胞碎片不能有效排除细胞碎片假阳性和假阴性高假阳性和假阴性高Cell Search-免疫磁珠免疫磁珠+流式流式细胞分析胞分析+化学化学发光光CTC检测的临床应用通
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