DB64∕T 1632-2019 茖葱种苗组培操作技术规程(宁夏回族自治区).pdf
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1、ICS 65.020.20B 31DB64宁夏回族自 治区地方标准DB 64/T16322019菩葱种苗组培操作技术规程2019-02-12 发布2019-05-12 实施宁夏回族自治区市场监督管理厅发布DB64/T16322019前言本标准的编写格式符合GB/T1.1-2009标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写的规定。本标准由宁夏农林科学院提出。本标准由宁夏回族自治区农业农村厅归口。本标准起草单位:宁夏农林科学院种质资源研究所,宁夏农林科学院农业生物技术研究中心。本标准主要起草人:张丽娟、曲继松、窦云萍、朱金霞、唐铭、朱倩楠、李些。IDB64/T16322019落葱种苗组培操作技术规程
2、1范围本标准规定了茗葱种苗组培快繁的材料的采集、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、穴盘苗生产及 管理、穴盘苗质量标准等技术要素。本标准适用于茗葱种苗的组培快繁技术管理的全过程。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。NY/T 2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程3术语与定义下列术语和定义适用于本文件3.1一葱(Allium victorialis L.)别名寒葱、鹿耳葱、隔葱等,为百合科(Liliaceae)葱属(Allium)多年生草本植物,地上部植株可供 食用,为一种药食兼用的珍稀山野菜。4培养基制作方法4.1准备根据培养基成分准备好去离子水、琼脂、蔗糖和各类母液以及容器
3、、器材、设备等,培养基主要成 分和化学试剂的质量,以及所用容器、器材和设备的技术参数符合NY/T 2306-2013的要求。4.2 定容在1L的容器中,按照附录A中要求分别加入MS培养基、琼脂、蔗糖,再根据要求加入激素,然后加 入700 mL800 mL去离子水,边加热边搅拌至均匀,加去离子水至1 L。4.3 pH值测定充分搅拌后,用pH试纸测pH值,用0.1 mol/L的HC1或0.1 mol/L的NaOH调节pH值至5.8。4.4 分装将培养基分装在350 mL的培养瓶中,每升分装20瓶25瓶,每瓶分装约40 mL50 mL。4.5 封口1DB64/T16322019盖好带透气膜的瓶盖。4
4、.6 灭菌用立式压力蒸汽灭菌器在0.11 Mpa0.12 Mpa下,121 灭菌15min。4.7 贮存灭菌后的培养基放在干净、卫生的接种室内,温度20 以内避光贮存时间不应超过15 d。5材料采集5.1母株选择选择无病虫害,生长健壮的茗葱植株为母株。5.2试验材料采集5.2.1采集时间茗葱早春萌发后(3月中旬萌发)1个月内挖取茗葱全株,或秋冬休眠后挖取地下根茎,放入4 冰箱保存2个月后移植至温室内,出苗后20 d25 d再取样,选择晴天天气采集外植体。5.2.2采集方法挖取茗葱全株,抖掉大部分泥土,用保鲜袋密封带回实验室。5.3 外植体消毒先用自来水冲去茗葱植株上的灰尘和泥土,用软毛刷配合洗
5、洁精溶液刷洗植株表面,除去附着在表 面的杂菌,剪去叶和鳞茎盘上的须根,留下带鳞茎盘的鳞茎1.0 cm1.5 cm,流水冲洗30 min40 min,再用洗洁精或洗衣粉水浸泡并放于振荡器中振荡清洗30 min,用去离子水冲洗5次。在超净工作台中,用75%酒精将外植体消毒30 s,无菌水漂洗1次2次。之后转入0.1%HgC12(升汞)中消毒8 min,再用无 菌水漂洗5次6次,每次1 min2min,最后转移至消毒后的无菌滤纸上,吸干表面水分。5.4 外植体切割在无菌滤纸上,用消毒灭菌后的手术刀、镜子等用具切除与消毒液接触的伤口部位,剥掉茗葱鳞茎 的外层,只留内部1层2层嫩茎,切割成5mm8mm的
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