DB36∕T 1654-2022 饮用菊花脱毒原种苗繁育技术规程(江西省).pdf
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1、ICS 65.020.20 CCS B 35 DB36 江西省地方标准 DB36/T 16542022 饮用菊花脱毒原种苗繁育技术规程 Technical regulations of breeding of chrysanthemum virus-free seed seedlings 2022 - 09 - 26 发布 2023 - 04 - 01 实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 16542022 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 基本要求 . 2 5 网室建造与隔离 . 2 6 原原种繁殖 . 2 7
2、原原种鉴定 . 3 8 原种网室繁殖 . 3 9 质量检测 . 4 附录 A(规范性)RNA 病毒的反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 . 5 DB36/T 16542022 II 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及本专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由江西省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位:江西省农业科学院蔬菜花卉研究所。 本文件主要起草人:汤泳萍、叶艳英、胡文亭、张冰冰、周劲松、尹玉玲、程正新、谢启鑫、罗绍春。 DB36/T 16542022 1 饮用
3、菊花脱毒原种苗繁育技术规程 1 范围 本文件规定了饮用菊花(Chrysanthemum morifolium (Ramat.) TzveL.)脱毒原种苗的范围、规范性引用文件、术语和定义、基本要求、网室建造与隔离、原原种繁殖、原原种鉴定、原种网室繁殖、质量检测等要求。 本文件适用于饮用菊花脱毒原种苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 8321(所有部分) 农药合理使用准则 GB/T 51057 种植塑料大棚工程技术规范 GB/T 5
4、1183 农业温室结构荷载规范 NY/T 391 绿色食品 产地环境质量 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY/T 525 有机肥料 NY/T 1224 农用塑料薄膜安全使用控制技术规范 NY/T 1591 菊花切花种苗等级规格 NY/T 1657 花卉脱毒种苗生产技术规程 香石竹、菊花、兰花、补血草、满天星 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 饮用菊花 Drinkable Chrysanthemum 用于泡饮的多年生草本植物菊的头状花序。 3.2 脱毒种苗 (virus-free seedlings) 经RT-PCR检测方法鉴定,确认脱除了菊花B病毒 (CVB)
5、、番茄不孕病毒 (TAV) 、黄瓜花叶病毒 (CMV)等的脱毒核心材料(或脱毒苗)在隔离条件下生产的原原种、原种。 3.3 原原种 (breeder seed) DB36/T 16542022 2 育种家选育的性状稳定纯正的用于繁殖原种的材料或种苗。 3.4 原种 (foundation seed) 由原原种繁殖的用于繁育生产用种的材料或种苗。 4 基本要求 4.1 产地环境 产地环境符合NY/T391的规定。 4.2 场地要求 选择排灌方便,地下水位较低,土层深厚、肥沃、疏松,3年内未种过茄科作物、5年内未种过菊科植物的中性或微酸性土壤地块,且周围800m范围内无其它菊科和茄科植物种植。 4
6、.3 化学农药使用 应符合GB/T 8321(所有部分)的要求。 4.4 肥料要求 应符合NY/T 496和 NY/T 525的要求。 5 网室建造与隔离 大棚所有通风处安装60目防虫网。大棚搭建应符合GB/T 51057 和GB/T 51183要求,大棚覆盖薄膜应符合NY/T1224要求。大棚入口处宜配套缓冲间,田间操作人员进入防虫大棚温室、网室应更换工作衣和鞋具。 6 原原种繁殖 6.1 材料和培养基准备 选具有繁育品种典型性状、生长健壮的植株,至光照培养箱中采用变温升温的方式进行热处理,在日温/夜温分别为26 /20 下培养2d,每2d昼/夜温度分别升高2 、直至38 /30 下培养40
7、d,取高温培养长出的茎段,剪去叶片,留取心叶或腋芽,放在烧杯中,用肥皂水冲洗干净,再用自来水冲洗1h。滤干,移入无菌操作台,用20%的次氯酸钠灭菌8min10min,取出后用无菌水冲洗35次待用。 将制备好的MS+6-BA0.1mg/L培养基溶液分装于培养瓶,每瓶30ml,瓶口盖紧瓶盖。在121 ,1.1 MPa条件下灭菌20min,冷却后放入无菌操作台待用。 6.2 分化和继代培养 在无菌条件下,在解剖镜下剥取已灭菌材料的生长点0.3mm0.5mm,接种到已灭菌的培养基上,置于26,光强2000lx3000lx,光照时间16h/d条件下培养,一周左右茎尖转绿并萌动,20d30d形成带芽茎段。
8、 DB36/T 16542022 3 在无菌条件下将已分化的带芽茎段剪成小段,每段带12个腋芽,转入培养基(MS+6-BA0.1mg/L)中进行增殖,34周后获3040个带腋芽芽段。 6.3 病毒检测 取继代培养壮芽或叶片提取RNA,经RT-PCR检测方法鉴定,没有病毒宜继续培养,脱毒不彻底应弃之不用。具体操作见附录A。 6.4 生根培养、炼苗及移栽管理 6.4.1 生根培养 将继代培养的茎段转入生根培养基(MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L)诱导生根,培养温度2526,34周后95%均生根。 6.4.2 炼苗 瓶苗株高6cm7cm,56片平展叶,生根5条以上3cm4cm长的根
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