DB22∕T 3090-2019 绵羊幼畜超排技术规程(吉林省).pdf
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1、ICS 65.020 B 05 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 30902019 绵羊幼畜超排技术规程 Juvenile in vitro embryo transfer technology standards regulations on sheep 2019 - 12 - 25 发布 2020 - 02 - 01 实施吉林省市场监督管理厅 发 布 DB22/T 30902019 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。 本标准起草单位:吉林省农业科学院。 本标准主要起草人:王春昕、张明新、侯健、赵云辉、赵卓、翟博、
2、苑志宇、张莹、郭洋、闫凤祥、关宏、马骏、柴浩晨、吴翠玲、宗兴龙、刘克雄、田浩、张玉梅、齐琪、段增祎。 DB22/T 30902019 1 绵羊幼畜超排技术规程 1 范围 本标准规定了绵羊幼畜超排的技术流程图、卵母细胞采集、体外受精、胚胎鉴定和胚胎移植。 本标准适用于绵羊幼畜超排技术操作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 NY/T 826 绵羊胚胎移植技术规程 NY/T 1571 羊胚胎移植技术规程 NY/T 1674 牛羊胚胎质量检测技术规程
3、NY/T 1900 畜禽细胞与胚胎冷冻保种技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 幼畜超排 juvenile in vitro embryo transfer 从幼畜获取卵母细胞进行胚胎体外生产和移植的一套完整的综合技术体系, 包括性成熟前动物激素处理诱导卵母细胞发育、活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术的过程。 3.2 超数排卵 superovulation 在母羊发情周期的适当时间,施以外源促性腺激素,促使母畜比自然状态有更多卵泡发育并排卵。 3.3 同期发情 estrus synchronization 通过外源激素处理等人为手段调整
4、母羊的发情周期,使其在预定时间内集中发情的技术。 3.4 供体 donor 提供用于胚胎生产的卵母细胞的4-8周龄母羔羊。 3.5 受体 receptor 接受胚胎移植的成年母羊。 3.6 卵母细胞采集 oocytes collection 使用冲卵液将发育到一定时期的卵母细胞从卵巢中采集回收的过程。 DB22/T 30902019 2 3.7 胚胎移植 embryo transfer 将胚胎植入到同期发情的母羊输卵管或子宫内的过程。 3.8 精子体外获能 sperm in vitro capacitation 精子在体外经获能因子诱导,增加精子受精能力,改变膜的通透性,降低顶体膜稳定性,使精
5、子辨识卵子,穿入卵子受精的过程。 4 技术流程图 绵羊幼畜超排技术流程如图1所示。 获得的卵母细胞和胚胎在体外进行操作时, 应置于37 恒温台上,所用液体试剂应预热至38.5 再进行使用。 图1 绵羊幼畜超排技术流程图 5 卵母细胞采集 DB22/T 30902019 3 5.1 供体、受体选择 5.1.1 选择健康、繁育性能良好的成年母羊作为受体,将放置阴道栓当天记为第 0 天,第 13 天撤栓并注射 PMSG 400 IU/只,进行同期发情处理。 5.1.2 选择 4 周龄8 周龄,体重在 5 kg15 kg,有完整系谱档案的健康母羔作为供体。与母羊同圈饲养,适量补饲羔羊料。 5.2 超数
6、排卵 超数排卵操作应符合表1规定。绵羊幼畜超排技术实施计划见表1。 表1 绵羊幼畜超排技术实施计划表 周期 0 日 11 日 12 日 13 日 14 日 15 日 16 日 2022 日供卵羊 注射 1 次PMSG 330 IU/只 注射 FSH 30 IU/只。每天 2 次,间隔 12 h 注射 FSH 30 IU/只。每天 2 次,间隔 12 h注射 FSH 30 IU/只。每天 2 次,间隔 12 h手术采卵 受体羊 放置 阴道栓 撤栓, 注射PMSG 400 IU/只试请 试情 胚胎移植 胚胎移植卵母细胞、胚胎 卵母细胞体外成熟卵母细胞体外受精 24 细胞期 桑葚胚、囊胚 5.3 采
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