DB15∕T 1517-2018 从红豆草中提取纯化缩合单宁的方法(内蒙古自治区).pdf
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1、ICS 65.020.01 B 04 备案号:61229-2019 DB15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 15172018 从红豆草中提取纯化缩合单宁的方法 Method for Extraction and Purification of Condensed Tannins from Sainfoin(Onobrychis viciifolia Scop.) 2018-12-20 发布 2019-03-20 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 15172018 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 材
2、料与试剂 . 2 5 仪器与设备 . 2 6 材料的准备 . 3 7 溶液的配制 . 3 8 缩合单宁的提取 . 3 9 缩合单宁的纯化 . 3 10 注意事项 . 4 DB15/T 15172018 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本标准由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。 本标准起草单位:内蒙古自治区农牧业科学院兽医研究所、中国农业科学院草原研究所。 本标准起草人:刘秀丽、侯勇跃、李锋、裴乐、李元恒、卢岩、阿木古楞。 DB15/T 15172018 1 从红豆草中提取纯化缩合单宁的方法
3、1 范围 本标准规定了红豆草中缩合单宁提取和纯化的方法。 本标准适用于实验室研究和提取阶段的中型试验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 15686 高粱 单宁含量的测定 3 术语和定义 下列术语定义适用于本文件。 3.1 单宁 tannins 又称单宁酸、鞣酸,是植物以碳为基础的复杂酚类次生代谢产物,分子量在5003000 Da。普遍存在于植物茎,叶,树皮,花和种子的细胞壁和液泡之中。
4、 3.2 缩合单宁 condensed tannin,CT 又称原花青素,是由黄烷-3-醇通过碳-碳双键连接构成的缩合物。 3.3 提取 extraction 选择适当的溶剂和方法将所要的目标成分溶解出来, 并同原材料分离的过程。 本方法是利用相似相溶原理通过有机溶液浸提法将红豆草中缩合单宁分离出来。 3.4 纯化 purification 利用凝聚过滤法根据分子筛原理按分子物质大小进行分离。 DB15/T 15172018 2 3.5 凝胶活化 gel activation 干燥的商品凝胶颗粒,使用前在欲使用的洗脱液中进行浸泡溶胀。 3.6 凝胶过滤 gel filtration 利用凝胶的
5、三维网状结构分子筛的过滤作用,将化合物按分子量大小不同进行分离。 4 材料与试剂 4.1 材料 红豆草(Onobrychis viciifolia Scop.):红豆草所含缩合单宁主要集中于叶片内且随着红豆草物候期的成熟缩合单宁含量逐渐下降,建议采集孕蕾期的红豆草材料,人工齐地刈割,适量置于保温箱内。 4.2 试剂 4.2.1 除非另有说明,在方法中使用的试剂均为分析纯,实验室用水应符合 GB/T 6682 中三级水的要求。 4.2.2 丙酮。 4.2.3 无水乙醇。 4.2.4 抗坏血酸。 4.2.5 乙醚。 4.2.6 葡聚糖凝胶 Sephadex LH-20(吸水率为 2.5 mL/g)
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