实验五-白细胞分类计数-PPT.ppt
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1、实验五 白细胞分类计数一、实验目的掌握显微镜外周血白细胞分类计数(DLC)的方法;掌握外周血各类白细胞的正常形态。二、实验原理 将血液制成细胞分布均匀的血涂片,用瑞氏染液染色,根据各类细胞的形态特点和颜色差异将白细胞区别并进行计数。通常计数100个白细胞,计算得出各种白细胞所占的百分率。三、实验器材与试剂 器材:显微镜,香柏油,擦镜纸,清洁液 试剂:Wright 染液。四、实验标本:制备良好的血涂片 五、操作步骤1.制备血涂片:按照正确的操作方法制备血涂片2.染色:用Wright染液对血涂片染色,冲洗干净,自然干燥后备用。3.低倍镜观察:低倍镜下观察全片,包括白细胞飞分布和染色情况。4.油镜观
2、察:选择血涂片体尾交界处细胞分布均匀、着色良好的区域,滴加1滴香柏油,按一定的方向顺序对所见到的每个白细胞进行分类,并用白细胞分类计数器做好记录,共计数100个白细胞。5.计算:求出各类白细胞所占的百分率。6.报告方式:百分率(%)。大家应该也有点累了,稍作休息大家有疑问的,可以询问和交流大家有疑问的,可以询问和交流大家有疑问的,可以询问和交流大家有疑问的,可以询问和交流8六、参考区间 WBC 百分率(%)绝对值(109/L)中性杆Nst 15 0.040.50中性分Nsg 5070 2.007.00嗜酸性 E 0.55 0.050.50嗜碱性B 01 00.10淋巴 L 2040 0.804
3、.00单核M 38 0.120.80 七、注意事项1.1.计数区域:以体尾交界处最佳。计数区域:以体尾交界处最佳。2.2.分类方法:遵循一定的方向,以分类方法:遵循一定的方向,以“城垛式城垛式”连续连续进行,避免主观选择视野;结果的记录可采用计数进行,避免主观选择视野;结果的记录可采用计数器、手工画器、手工画“正正”字或字或“+”“+”。3.3.计数的白细胞数:白细胞总数在计数的白细胞数:白细胞总数在(3.03.015.015.0)10109 9/L/L之间者,分类计数之间者,分类计数100100个白细个白细胞;总数在胞;总数在15.015.010109 9/L/L以上时,计数以上时,计数20
4、0200个;总数个;总数低于低于3.0103.0109 9/L/L时,应选用两张血涂片计数时,应选用两张血涂片计数5050100100个白细胞个白细胞。4.4.计数结果:用各类白细胞的百分率乘以白细胞总数,计数结果:用各类白细胞的百分率乘以白细胞总数,即可求得每升血液中各类白细胞数量的绝对值。即可求得每升血液中各类白细胞数量的绝对值。5.5.血涂片中有有核红细胞时,应逐个计数,但不计入血涂片中有有核红细胞时,应逐个计数,但不计入100100个白细胞内,以分类个白细胞内,以分类100100个白细胞过程中见到的有个白细胞过程中见到的有核红细胞个数来报告,并注明其所属阶段。核红细胞个数来报告,并注明
5、其所属阶段。6.6.分类中还应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、分类中还应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及其分布情况,注意有无寄生虫(如疟原虫)及染色及其分布情况,注意有无寄生虫(如疟原虫)及其他异常所见。其他异常所见。外周血各类白细胞的正常形态白细胞粒细胞淋巴细胞单核细胞一、白细胞的组成中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞 白细胞是机体抵抗病原微生物等异物入侵的主要防线全能干细胞髓系干细胞淋巴系干细胞粒-单核系祖细胞T淋巴系祖细胞B淋巴系祖细胞原粒细胞T原淋巴细胞B原淋巴细胞分叶核粒细胞单核细胞T淋巴细胞B淋巴细胞浆细胞GM-CSFT幼淋巴细胞B幼淋巴细胞早幼粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞
6、杆状核粒细胞幼单核细胞原单核细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞中性粒细胞(Neutrophil,N)具有趋化、变形、黏附、吞噬、杀菌作用,防御和抵抗病原菌侵袭二、白细胞的功能淋巴细胞(Lymphocyte,L)B细胞 浆细胞 生成Ab 体液免疫T细胞 免疫活性物质 细胞免疫单核细胞(Monocyte,M)吞噬,杀灭病原体 清除损伤或已死亡的细胞 处理抗原嗜碱性粒细胞(Basophil,B)通过释放嗜碱性颗粒(组胺、肝素、慢反应物质等)参与超敏反应嗜酸性粒细胞(Eosinophil,E)抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞合成和释放活性物质,吞噬其释出颗粒,破坏组胺,限制过敏反应 参与对寄生虫的免疫反应1.中性
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