DB22∕T 973-2019 猪霉形体肺炎检测ELISA法(吉林省).pdf
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1、 ICS 11.220 B 41 DB22 吉林省地方标准 DB22/T 9732019 代替 DB22/T 973-2002 猪霉形体肺炎检测 ELISA 法 Detection of Swine enzootic pneumoniae by enzyme-linked immunosorbent assay method 2019 - 07 - 25 发布 2019 - 08 - 15 实施吉林省市场监督管理厅 发 布 DB22/T 9732019 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 和 GB/T 20001.4-2015 给出的规则起草。 本标准代替 DB22/T 973
2、-2002 猪霉形体肺炎微量全血酶联免疫吸附试验诊断技术规程,与 DB22/T 973-2002 相比,除编辑性修改外,主要技术变化如下: 名称变更; 增加了“规范性引用文件”(见 2); 修改了“原理”(见 3,2002 年版的 2); 修改“试剂”为“试剂或材料” (见 4,2002 年版的 4); 修改“仪器和材料”为“仪器设备” (见 5,2002 年版的 3) ; 增加了“样品”(见 6); 修改了“操作步骤”为“试验步骤”(见 7,2002 年版的 5); 修改了“结果判定”(见 8,2002 年版的 6); 增加了“附录 A”(见附录 A)。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口
3、。 本标准起草单位:吉林省畜牧兽医科学研究院。 本标准主要起草人:程荣华、邵洪泽、呼延含蓉、郭衍冰、丁世杰、李昱洁、尹德福、孙艺学。 DB22/T 973-2002 的历次版本发布情况为: DB22/T 973-2002。 DB22/T 9732019 1 猪霉形体肺炎检测 ELISA 法 1 范围 本标准规定了猪霉形体肺炎酶联免疫吸附试验(ELISA)的试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤和结果判定。 本标准适用于猪霉形体肺炎的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有
4、的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 吸附于固相载体表面的抗原或抗体与被检标本中相应的抗体或抗原结合形成抗原抗体复合物, 再加入酶标记的抗体(抗抗体),加入底物后,底物被酶催化成为有色产物,颜色反应的深浅与标本中相应抗原(抗体)的量呈正比,可根据呈色的深浅进行定性或定量检测。 4 试剂或材料 4.1 试剂 除有特殊说明外,所有试验用试剂均为分析纯,试验用水符合 GB/T 6682 中一级水的要求。 4.1.1 磷酸盐缓冲液(PBS)(见附录 A)。 4.1.2 PBST(见附录 A)。 4.1.3 猪肺炎霉形体可溶性抗原。 4.1.4 蒸馏水。
5、4.1.5 包被液(见附录 A)。 4.1.6 封闭液(见附录 A)。 4.1.7 猪霉形体肺炎阳性血清。 4.1.8 猪霉形体肺炎阴性血清。 4.1.9 辣根过氧化物酶(HRP)标记兔抗猪 IgG。 4.1.10 底物溶液(见附录 A)或等效物。 4.1.11 终止液(见附录 A)。 4.2 材料 4.2.1 采血针。 4.2.2 滤纸。 DB22/T 9732019 2 4.2.3 离心管(1.5 mL)。 4.2.4 96 孔酶标板。 4.2.5 封板膜。 4.2.6 吸头(200 L,1000 L)。 5 仪器设备 5.1 多通道可调移液器(20 L200 L)、单通道可调移液器(20
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