T∕FJCA 003-2024 特殊食品和化妆品 减脂功效测试 秀丽隐杆线虫法.pdf
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1、ICS19.020CCS C04FJCA团体标准T/FJCA 0032024特殊食品和化妆品 减脂功效测试 秀丽隐杆线虫法Special foods and cosmeticsAnti-obesity testCaenorhabditis elegans method2024-03-29 发布2024-04-01 实施福建省特殊食品与化妆品协会发 布全国团体标准信息平台T/FJCA 0032024I前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由福建上源生物科学
2、技术有限公司提出。本文件由福建省特殊食品与化妆品协会归口。本文件起草单位:福建上源生物科学技术有限公司、安发(福建)生物科技有限公司、广东丸美生物技术股份有限公司、福建省食品药品质量检验研究院。本文件主要起草人:张壬辉、高益槐、刘涵、刘用国、赵培、郑春源、孙怀庆、张熠、陈岚彬。全国团体标准信息平台T/FJCA 00320241特殊食品和化妆品 减脂功效测试 秀丽隐杆线虫法1范围本文件规定了运用秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,以下简称“线虫”)对特殊食品和化妆品进行减脂功效测试的方法。本文件适用于特殊食品和化妆品减脂功效的测试,特殊食品和化妆品的原料可参考本方法执行。
3、2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。DB35/T 21322023实验用秀丽隐杆线虫 饲育技术T/GDCA 0132022化妆品 抗氧化活性的评价 秀丽线虫法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4符号和缩略语下列符号和缩略语适用于本文件。CAS:CAS登录号(CAS Registry Number)CI:空白对照组平均总强度值(Intensity of Blank Control Group)IL:脂质抑制率(Inhibit
4、ion Rate of Lipid)LB:溶菌肉汤(Luria-Bertani)NGM:线虫生长培养基(Nematode Growth Medium)OP50-NGM:含有尿嘧啶合成缺陷型大肠杆菌的线虫生长培养基(Escherichia coli OP50 onNematode Growth Medium)P:P值(P value)SI:样品组平均总强度值(Intensity of Sample Group)t-test:T检验(Students t test)5检测原理油红O是一种脂溶性二唑染料,可与线虫的中性脂质和胆固醇酯特异性结合而着色。线虫通身透明,可以通过观测油红O在线虫体内的着色水
5、平来判断其脂肪含量。利用 ImageJ2 软件处理线虫的油红着色样图即可进行定量分析。6材料与试剂6.1材料所需材料如下:线虫、尿嘧啶合成缺陷型大肠杆菌(Escherichia coli OP50,E.coli OP50);挑虫器;培养皿;全国团体标准信息平台T/FJCA 00320242移液枪。6.2试剂除非另有说明,化学试剂使用符合国家标准的分析纯试剂。配制方法见附录A及DB35/T 21322023。油红O(C26H24N4O)、氯化钠(NaCl)、氯化钙(CaCl2)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钾(KCl)、磷酸氢二钾(K2HPO4)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、二甲基亚砜(DMSO)
6、、无水乙醇、胆固醇、琼脂粉(Agar)、LB、蛋白胨、异丙醇、免疫染色通透液(Triton X-100)、磷酸缓冲盐溶液(PBS缓冲液)。6.3阳性对照品奥利司他标准品(Orlistat),纯度 98,CAS:96829-58-2。7实验仪器与设备所需仪器与设备如下:体视显微镜,放大倍数 5 倍50 倍;恒温培养箱,精度 1;洁净工作台;万分之一天平,精度 0.1 mg;高压灭菌锅;高速离心机;恒温摇床;旋转混匀仪;20冰箱;光学显微镜,物镜变倍不小于 10 倍。8测试方法8.1受试样品处理配制受试样品测试母液时,若受试样品为水溶性物质,则使用无菌双蒸水作为溶剂;若受试样品为非水溶性物质,可选
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