SN∕T 2977-2011 马腺疫检疫技术规范(出入境检验检疫).pdf
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1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 马腺疫检疫技术规范犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲狆 狉 狅 狋 狅 犮 狅 犾 犳 狅 狉 狊 狋 狉 犪 狀 犵 犾 犲 狊 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准马腺疫检疫技术规范 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码: 网址 电话: 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数 千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号: 定价 元书书书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位: 中华人
2、民共和国山东出入境检验检疫局、 中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人: 肖西志、 梁成珠、 邓明俊、 朱来华、 岳志芹、 高宏伟、 郑小龙、 孙敏、 王群、 徐彪。犛 犖犜 马腺疫检疫技术规范范围本标准规定了马腺疫的临床诊断和实验室诊断, 实验室诊断包括细菌分离、 生理生化鉴定、 分子生物学鉴定。本标准适用于进出口马、 驴、 骡等马属动物马腺疫( 参见附录) 的诊断和检疫。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件, 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于
3、本文件。 食品卫生微生物学检验染色法、 培养基和试剂临床诊断 临床症状 典型腺疫主要特征是发生急性鼻黏膜卡他和颌下淋巴结肿胀化脓。诊断要点如下: 体温升高达 ; 精神萎顿和食欲减退; 结膜稍潮红黄染; 心跳加快, 呼吸和脉搏增数; 鼻卡他, 出现鼻黏膜潮红, 流出浆液或黏液脓性鼻汁, 经 后变为黄白色脓性鼻汁; 咳嗽、 呼吸及吞咽困难; 颌下淋巴结热痛、 肿胀, 达鸡蛋大或拳头大, 并向周围迅速扩展, 使颌下间隙消失。随着病程发展, 淋巴结化脓变软形成脓肿, 并有波动。波动处被毛脱落、 皮肤变薄, 在皮肤表面渗出黄色黏液, 并很快破溃, 流出大量黄色粘稠的乳脂状的浓汁; 病程为周周, 可自愈。
4、 一过型腺疫诊断要点如下: 体温略升高; 流出浆液性或黏液性鼻液; 症状逐渐消失而自愈。 恶性型腺疫诊断要点如下: 体温升高, 反复出现发热;犛 犖犜 消化不良、 日见消瘦, 有时出现轻度腹痛; 多处淋巴结脓肿; 吞咽困难和呼吸困难; 当患畜低头、 咳嗽、 咀嚼或运动时, 由鼻孔流出大量浓汁, 有恶臭味; 可视黏膜苍白。 病理变化病理剖检应注意观察以下要点: 鼻咽、 喉、 额窦、 副鼻窦、 耳咽管及泪管黏膜上常有黏液 脓性分泌物覆盖, 并有多处出血斑; 颌下淋巴结和咽淋巴结肿大, 炎性充血, 可发展成脓肿, 内有大量黄色粘稠的浓汁; 其他部位的淋巴结亦可见肿大并发生脓肿, 如颈部、 胸纵膈、
5、支气管、 肠系膜等淋巴结; 腺疫性肺炎, 肺的尖叶和心叶稍隆起, 呈污秽暗红色或褐色的肝变。膈叶的前缘常可发现胶样浸润, 切开后, 中央部可见鸡蛋至拳头大小的化脓性坏疽; 支气管内常充满绿黄白色的黏液脓性液体; 脏器可见转移性化脓灶, 并有化脓性心包炎、 胸膜炎和腹膜炎。 流行病学本病多发生于春秋季节, 平均潜伏期 , 有的为。主要经消化道和呼吸道感染。马最易感, 驴、 骡次之,岁岁马属动物发病最多。实验室诊断 细菌分离 培养基与设备 血清肉汤、 血清琼脂平板、 绵羊血液琼脂平板及美蓝牛乳培养基, 配制方法见附录。高压灭菌锅, 生物安全柜, 光学显微镜, 恒温培养箱。 样品采集病马颌下淋巴结未
6、破溃的脓肿以碘酒及酒精消毒后, 用注射器吸取脓汁注入灭菌小试管中; 已破溃的脓肿, 以灭菌生理盐水浸湿的棉棒蘸取脓汁或鼻腔分泌液放于灭菌小试管中, 立即检查, 或放冰箱中保存待检, 待检样品应尽快检测, 在存放时间最长不得超过周。 直接镜检 操作方法将病料标本涂于载玻片上, 干燥、 固定按 中 规定进行革兰氏染色。 结果观察马腺疫链球菌的形态及染色特征是: 在脓球间散布着几个甚至上百个球菌组成的波浪状弯曲的长链条, 各菌大小不等, 多呈扁球状, 直径约。菌体着色不均, 革兰氏阳性( 参见附录 ) 。 分离培养 操作方法用接种环钓取病料, 接种于 血清肉汤做增菌培养, 接种于 血清琼脂平板及绵羊
7、犛 犖犜 血液琼脂平板做分离培养, 于 恒温培养箱中孵育 。培养基配制见附录。 结果观察观察到下述结果, 符合马腺疫链球菌培养特征:) 血清肉汤: 培养后, 生长成链条状, 后肉汤轻度混浊, 后长成长链条状的菌体缠绕一起, 呈棉絮状沉于试管底部, 以后上清液变清朗;) 血清琼脂: 形成圆形、 透明、 闪光、 中央微隆起、 表面光滑的露珠样小菌落。强毒株的菌落表面常呈颗粒状结构;)绵羊血液琼脂: 发生型溶血, 即在露珠状小菌落周围形成界限分明、 完全透明的溶血带,该带的宽度可达 以上。 生理生化鉴定 操作方法选 的可疑菌落的培养物, 接种糖发酵管和生化试验用培养基, 于 孵育 。 结果观察分别于
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