NY∕T 3080-2017 大白菜抗黑腐病鉴定技术规程(农业).pdf
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1、ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3080一2017大白菜抗黑腐病鉴定技术规程Rule for evaluation of chinese cabbage resistance to black rot 2017 -06斗2发布2017 -10-01实施中华人民共和国农业部发布前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准rl,农业部种植业管理司提出.本标准由全国蔬菜标准化技术委员会CSAC/TC467)归口。本标准起草单位:中国农业科学院蔬菜花卉研究所。本标准主要起草人.杨字红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、i振J,、陈同华、凌键。NY/T 3
2、080- 2017 I NY/T 3080-2017 大白菜抗黑腐病鉴定技术规程范围本标准规定了大白菜抗摆脱病(Xanlhomollascanl.户eslnspv. cam卢eSlris)的鉴定方法和l评价方法.本标准适用于大白菜(BrassicaraL.ss年!主川is)抗黑腐病的室内鉴定及td1评价。2 规范性引用文件NY/ T 4 4. 1 4. 11 调至pJ-7. O.于121.C4. 2. 2 团体培养基.4 3 育茵基质-日期的版本适用于本文,酸碱皮切j搅拌均匀;)1溶化后,酸碱皮将1!(炭、怪石和l来回土按2 1 l(体积比)的比例混合均匀,于131.C同源蒸汽灭幽30min.
3、 5 仪器设备5. 1 恒温摇床回旋频率范fL 40r/ min-300 r/min;源控范阁。5.C-60.C。5. 2 恒温培养箱温度范围。.C-50.C;温度议动.士0.5.C.NY/T 3080-2017 5. 3 低温冰柜箱内泪I度,-15C-25Co5. 4 灭菌锅自拇温冒盟k度范围,OC13臼5C;灭菌H5. 5 超净工f伟乍台洁净等级,100级0.5m,平均风速,0.25 m/sO. 6 m/s, 5. 6 分光光度计波长范围200nml 000 nm;波段误差士1nm;透射比准确度土0.5%(D,6 黑腐病菌接种体制备6.1 病原菌分离、保存6. 11 病原菌分离取大白菜黑l
4、l病发病植株叶Jt病他交界组织,用常规稀释分离法或平板划线分离法分离黑II病病原菌。分离物鉴定参!l附录A,确认为野刘l莱黄单胞菌野前IJ菜致病变种(Xa1lthomollascam卢estrzsp认cam卢estris)后,采用稀释涂布平板法进行分离物纯化,经柯赫氏(Kochs Postulates)法则验证后,保存备用。6.12 病原菌保存将黑j何?芮1t-i精养子葡葡1IIi蛋白!国:或YDC液体踏养i!ili11 ,在(28士l)C、150r/ min下振荡蜡养24h 后取培养物于等体积的40%甘前11,混合均匀,分装在码:存笛内i1.(-20士l) C冰柜中保存;或将在葡萄糖蛋白j陈
5、或YDC培养基上培养的新鲜再豆腐病菌从斜面上洗下或挑下,放入灭菌水中,在室泪下保存,6个月重新消化转存1次.6.2 生理小种鉴定对用于抗病性鉴定接种的病原菌进行生理小种的鉴定,鉴定方法见附录,6. 3 接种体繁殖和制备根据育种目的,有创对性地选择优势小利:作为接利1病原菌.将保存在灭菌水中的菌种摇匀,移至葡萄糖蛋白l陈或YDC液体培养基中,在(28士l)C、150r/ min下振荡培养24h ,力11适盘元菌水调整至接种浓度,制成按手l液.7 室内抗性鉴定7.1 鉴定对照材料设北京小杂56或北京大牛心等易感病品种为感病对HHp1牵l , 7.2 鉴定材料育苗鉴定材料种子在50C热水中处理10m
6、in后,应于(25土j)C恒温培养箱中催芽。待种子发芽后惯于装有育苗基质的塑料育苗钵内,每钵捕利,1粒种子。在ffil室里育苗,室内温皮白天为22C25C,夜晚为17C20C。选择生辰住tt壮、一致的幼苗用于抗病性鉴定。7.3 接种7.3. 1 接种时期大向菜生育J归4叶期511I.J到.7.3.2 接种浓度约10CFU/mL(OD,=0.2)。7.3.3 接种方法接种前将植株移到鉴定室内,浇透水并盖膜于15C20C保湿一夜,相对湿度大于90%,使叫缘吐2 NY/T 3080-2017 馁,第2天早晨喷雾接种,以叶片布满菌液但无液滴滴落为度。鉴定材料随机或顺序IF列,每份鉴定材料重复3次,每一
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