SN∕T 3579-2013 大豆疫病菌活性检测方法(出入境检验检疫).pdf
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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3579-2013 大豆疫霉病菌活性检测方法Viability detecion of PhytophthorsOJe Kaufmann & Gerdemann 2013-03-01发布2013-09-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局SN/T 3579-2013 目。昌本标准按照GB/T1. 1-2009给出的规则起草o请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布结构不承担识别这些专利的责任。本标准1111叶家认111:认可监督怦理委员会捉11并川门。本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院
2、、广东省微生物研究所、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人:章桂明、程颖慧、王颖、陈枝楠、仲建忠、李秋枫、向才玉、代京莎、汪莹、陈洪俊。SN/T 3579-2013 大豆疫霉病菌活性检测方法1 范围本标准规定了应用激光扫描共聚焦显微镜对大豆疫霉病菌(Phyt吵hthorasojae Kaufmann &-Gerdemann)的活性进行检测的方法O本书J*适川JT大时及土壤rlr抗们的大日疫霉病菌的沾性检测。2 原理应用荧光染料对大豆疫霉病菌的卵子包子进行染色处理,根据大豆疫霉病菌不具活性的卵子包子染色后卵质体断裂、边集,呈致密浓染绿色和具有活性的卵子包子染色后卵质体呈均匀绿色的染色效果差异
3、,运用激光扫描共聚焦显微镜对病菌于包子进行检测,分析其活性情况。3 仪器用具和试剂3. 1 仪器用具激光扫描共聚焦显微镜、显微镜、高压灭菌锅、生物安全柜、生化培养箱、冰箱C3.2 试剂四丫定橙、磷酸缓冲液(PBS,O.lmol/f1-L,pH7. 0)、水琼脂培养基O4 活性检验方法4. 1 病原菌子包子获取在显微镜下,将发现并鉴定为大豆疫霉病菌卵于包子挑到灭菌水中,配制成浓度大于1个子包子/L的子包子悬浮液,镜检,备用O4.2 子包子染色使用质量浓度为100f1-g/mLC溶剂为PBS)的日丫定橙染色剂与面子悬浮液以1: 20体积比均匀混合,室温下避光染色15min,16 OOOg离心1mi
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