NY∕T 3785-2020 葡萄扇叶病毒的定性检测 实时荧光PCR法(农业).pdf
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1、ICS 65.020.01 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准NY /1 3785-2020 葡萄扇叶病毒的定性检测实时荧光PCR法Qualitative detection of grapevine fanleaf virus- Real time fluorescence PCR method 2020-11-12发布2021-04-01实施二号中华人民共和国农业农村部发布NY / T 3785-2020 前NY / T 3785-2020 葡萄扇叶病毒的定性检测实时荧光PCR法范围本书IfIJ( H萄t-f中和l离休3居民1材料1份j稍j,j111出415的实1J.j生U;PCl
2、检测Mk。-1吨,I!UJl川刊ti萄t;f;j开11肉体策的(tjJf.o帽翼事蜀,回灿灿dl扮圳IJ0 2 规范性引用文件、15(11)(川、文件.昵附灿昂地pl川儿A占4、t11 JWIjlJ+1 Gllj丁66823 缩赂i吾下纠纷icJ)N , PCR,段DN八j悦M MI.V, dNTPs,4 。l二PC,JN Tm/ INsc, Tri到I-JCI4 原理5 仪器与设备5. 1 JJI.t尖);PCR检测仪。5. 2 iI1微+;t紫外核阪蛋jJ检由1)仪。5.3 Il!.子大、|:!t1甘为0.01go 5. 4 i:j J革冷冻FI心机,转速在12000r/min以L5 5们
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4、夜,121 .C:jJf灭的15min . 洼111+ I)/:I气、有剌激tl刷,:ti.1叫此处J1!II.II,i!1油风I!.I迸行.也可购买商品化的DEPC处J11l7/z.6.4 10%二炕基JUl氮I!i俐,;f;年月k5.00日二炕基JUl氨酸例.I谷丁二DEPC处理的灭的双;if:水中容军50 Il1L。6.5 随机寻1itlJ, 吁有6个liliJMI甘lli机序列。6.6号1itlJ 5 71物5TCTAGGG丁IC八GAAGGACCG-3; : I引物,5AGGAGGAGGCGAAGGAATC-3. 6. 7 裂仰7在:分到1称i仅f;k(n主l脱H.20 g、阿il主
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6、NTP挝、RNascjl)It;,剂和1M-MI.V反转iE酶,配iliI1HI、!A.l咐-*/0 6. 11 )光PCR扩JrY1tM1斗液介1T2XSYI:lR G,巳enqPCI混合反应液、5号|物和13习|物,配1;11H去.!h.1咐SRA。6. 12 RN八.JitJ&1败问I村放套价。6. 13 走)(;PCR检测IjJTI 8 1m竹和IX子。7 操作步骤与方法7 1 样品击J备叶片样JJIe垠tf:i则仍I萄IIj-J: ,川火I泊双茶水冲洗、UE纸擦拭千净。枝条样AItl将1j检枝条似JIii5 cm- IO cm.币i取其切JJi.;,j组织,)k人样Alf袋中。组t1
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