DB37∕T 4484—2021 小麦种子活力测定 加速老化法、干旱胁迫法、盐胁迫法(山东省).pdf
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1、 ICS 65.020.20 CCS B 21 37 山东省地方标准 DB 37/T 44842021 小麦种子活力测定 加速老化法、 干旱胁迫法、盐胁迫法 Wheat seed vigour test by accelerated ageing test, drought stress test, salt stress test 2021 - 12 - 29 发布 2022 - 01 - 29 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB 37/T 44842021 I 目次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 缩略语 . 2 5 测定原理
2、 . 2 加速老化法 . 2 5.1 干旱胁迫法 . 2 5.2 盐胁迫法 . 2 5.3 6 测定方案 . 2 总则 . 2 6.1 样品 . 2 6.2 测定平台 . 2 6.3 测定条件 . 2 6.4 7 试材和设备 . 3 试材 . 3 7.1 设备 . 3 7.2 8 试验步骤 . 3 加速老化法 . 3 8.1 干旱胁迫法 . 4 8.2 盐胁迫法 . 5 8.3 9 试验数据处理 . 6 加速老化法 . 6 9.1 干旱胁迫法 . 7 9.2 盐胁迫法 . 7 9.3 重新试验 . 8 9.4 10 结果计算和表示 . 9 11 结果报告 . 9 附录 A(资料性) 小麦种子活
3、力测定发芽试验原始记录表 . 11 附录 B(资料性) 小麦种子活力测定结果报告单 . 12 参考文献 . 13 DB 37/T 44842021 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。 本文件由山东省农业标准化技术委员会种植业分技术委员会归口。 DB 37/T 44842021 1 小麦种子活力测定 加速老化法、干旱胁迫法、盐胁迫法 1 范围 本文件规定了小麦(Triticum aestivum L.)种
4、子活力测定干旱胁迫法、加速老化法、盐胁迫法的测定原则、测定方案、测定程序和结果报告。 本文件适用于冬小麦和春小麦品种的种子活力测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示与判定 GB/T 26462 种子发芽纸 3 术语和定义 GB/T 3543.2界定的以及下列术语和定义
5、适用于本文件。 3.1 种子活力 seed vigour 在广泛的田间条件下,决定种子迅速整齐出苗和长成正常幼苗潜在能力的总称。 3.2 种子批 seed lot 同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、在规定数量之内的种子。 来源:GB/T 3543.21995,3.1 3.3 送验样品 submitted sample 送到种子检验机构检验、规定数量的样品。 来源:GB/T 3543.21995,3.4 3.4 试验样品(简称“试样”) working sample 在实验室中从送验样品中分出的部分样品,供测定某一检验项目之用。 来源:GB/T 3543.21995,3.
6、5 3.5 加速老化测定 accelerated ageing test 将试样置于高温高湿条件下进行人工老化处理,处理后进行标准发芽试验,统计正常幼苗数,计算发芽率。 3.6 干旱胁迫测定 drought stress test DB 37/T 44842021 2 将试样置于含高渗溶液的发芽床上进行干旱胁迫发芽试验,定期统计正常幼苗数,计算发芽率。 3.7 盐胁迫测定 salt stress test 将试样置于含高盐溶液发芽床上进行盐胁迫发芽试验,定期统计正常幼苗数,计算发芽率。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 AAT: 加速老化测定(Accelerated Ageing Test
7、) DST: 干旱胁迫测定(Drought Stress Test) SST: 盐胁迫测定(Salt Stress Test) 5 测定原理 加速老化法 5.1 采用高温高湿处理种子, 加速种子老化, 其劣变程度在几天内相当于数月或数年之久的自然劣变程度。 高活力种子经一定条件的老化处理后仍能正常发芽, 低活力种子则产生不正常幼苗甚至丧失生活力。因此,加速老化法能较好地预测田间出苗率和种子耐贮藏性。 干旱胁迫法 5.2 小麦播种常遇干旱等逆境胁迫,将种子置于干旱胁迫环境中,模拟田间逆境条件,观察种子发芽成苗的能力。高活力种子耐旱、抗旱能力强,经一定条件的干旱胁迫下仍能正常发芽,而低活力则产生不
8、正常幼苗甚至丧失生活力。因此,干旱胁迫法能较好地预测田间出苗率。 盐胁迫法 5.3 小麦播种常遇到盐碱等逆境胁迫,将种子置于一定条件的盐胁迫环境中,模拟田间逆境条件,观察种子发芽成苗的能力。高活力种子细胞膜系统完整且修复快,抗盐、耐盐能力强,盐胁迫下仍能正常发芽,而低活力种子则产生不正常幼苗甚至丧失生活力。因此,盐胁迫法能较好地预测田间出苗情况。 6 测定方案 总则 6.1 在严格控制条件下,对试样按模拟逆境处理、标准发芽、数据分析的程序(加速老化法)和模拟逆境发芽、数据分析的程序(干旱胁迫法、盐胁迫法)进行测定。 按规定要求填报测定结果,测定报告应注明测定方案所规定的条件。 样品 6.2 送
9、验样品为小麦种子,重量应不低于1 000 g。 测定平台 6.3 人工气候箱、光照培养箱、发芽室或其它能够精准控温的发芽环境。 测定条件 6.4 DB 37/T 44842021 3 种子活力测定应在有利于正确实施测定的控制条件下进行,包括但不限于下列条件: 种子检验员具备熟悉所使用测定方法的知识和技能; 所有仪器与使用的技术相适应,并已经过定期维护、验证和校准。 7 试材和设备 试材 7.1 7.1.1 老化盒:100 mm100 mm30 mm 等规格。 7.1.2 尼龙网袋:150 mm100 mm、400 mm150 mm 等规格。 7.1.3 置种板:可辅助小麦种子置床,每次可平行或
10、交错置种 50 粒或 100 粒。 7.1.4 数种板:可辅助数取一定数目的小麦种子。 7.1.5 自封袋:12 号(450 mm340 mm)等规格。 7.1.6 发芽盒(盘):120 mm120 mm50 mm 等规格。 7.1.7 发芽纸:GB/T 26462,110 mm110 mm、380 mm255 mm 等规格。 7.1.8 试剂药品:次氯酸钠溶液、聚乙二醇 6000(Polyethylene Glycol-6000,PEG-6000)、氯化钠(NaCl)等。 7.1.9 其它:其它发芽装置、温湿度计、玻璃棒、三角瓶、镊子、蒸馏水、标签纸、纱布、油性记号笔、酒精等。 设备 7.2
11、 7.2.1 人工老化处理设备:种子老化箱等。 7.2.2 发芽设备:人工气候箱、光照培养箱、发芽室、恒温循环槽或其它能够精准控温发芽的设备。 7.2.3 消毒干燥设备:高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱等。 8 试验步骤 加速老化法 8.1 8.1.1 试样准备 启封后,随机数取试样净种子100粒,4次重复,共400粒。种子老化处理前用1.0 %的次氯酸钠溶液浸泡消毒5 min,消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍,拭去种子表面浮水,备用。包衣种子可先柔性清洗然后消毒,或无须消毒处理。 8.1.2 试验材料准备 发芽纸:将发芽纸121 1 高压蒸汽灭菌20 min后,烘干备用。 发芽盒:将发芽盒清洗干净后
12、,用75 %的酒精溶液擦拭消毒,风干备用。 8.1.3 加速老化测定 将种子放入老化盒或尼龙网袋中,放入种子老化箱内,控制温度在41 0.3 ,相对湿度不低于98 %,加速老化处理72 h,取出,薄摊,回干(自然晾干或在不高于60 的条件下烘干),备用。 纸上发芽:取2张发芽纸(110 mm110 mm),叠放入发芽盒(120 mm120 mm50 mm)内,加入蒸馏水, 充分润湿, 用无菌纱布轻拭床面, 除去余液和纸间气泡后, 置种板辅助置种, 纸边距1 cm1.5 cm。DB 37/T 44842021 4 种子置床后,盖上发芽盒盖,贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基
13、本信息,后,放入人工气候箱。按照GB/T 3543.4,20 0.5 标准发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。 盖纸发芽:取2张发芽纸(110 mm110 mm),叠放入发芽盒(120 mm120 mm50 mm)内,加入蒸馏水, 充分润湿, 用无菌纱布轻拭床面, 除去余液和纸间气泡后, 置种板辅助置种, 纸边距1 cm1.5 cm。种子置床后,加盖1张润湿的发芽纸, 盖上发芽盒盖, 贴好标签并标注品种名称、样品编号、 重复次数、置床时间等基本信息, 放入人工气候箱。 按照GB/T 3543.4, 20 0.5 标准发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。 卷纸发芽:用75 %的酒精溶液消毒操
14、作台,将2张发芽纸(380 mm255 mm)叠放好,用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息(或备样品信息防水条),如:样品名称、重复编号等。发芽纸用蒸馏水充分润湿, 用无菌纱布轻拭床面, 除去余液和纸间气泡后, 置种板辅助交错置种, 种孔朝向一致,纸边距5 cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸,将纸床(或夹样品信息防水条)卷起,纸卷两端整平,并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好(朝向一致),在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后,垂直放入人工气候箱(纸卷种孔端朝下)。按照GB/T 3543.4,20 0.5 标准发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。 同时按照GB/T 354
15、3.4,对未老化处理的试样种子进行标准发芽测定。20 0.5 发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。 8.1.4 检查管理 在种子老化处理和发芽期间,应进行适当的检查管理,以维持原有老化处理及发芽条件。老化36 h和发芽4 d分别检查1次老化和发芽环境,若有问题及时进行相应维护。 老化处理:温度保持在41 0.3 范围内,相对湿度不低于98 %。 发芽床检查:发芽床始终保持湿润。 发芽温度检查:温度保持在20 0.5 范围内。 种子检查:发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5 %时,应更换发芽床,以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子,应及时去除并做好相应记载。 8.1.5
16、 数据记录 按照GB/T 3543.4中正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计,根据正常幼苗数,计算发芽率。 干旱胁迫法 8.2 8.2.1 试样准备 启封后,随机数取试样净种子100粒,4次重复,共400粒。种子置床前用1.0 %的次氯酸钠溶液浸泡消毒5 min, 消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍, 拭去种子表面浮水, 备用。 包衣种子可先柔性清洗然后消毒,或无须消毒处理。 8.2.2 试验材料准备 发芽纸:将发芽纸121 1 高压蒸汽灭菌20 min后,烘干备用。 发芽盒:将发芽盒清洗干净后,用75 %的酒精溶液擦拭消毒,风干备用。 配制够量的15 %的PEG-
17、6000溶液。参考配制方法:称取PEG-6000溶质150 g,溶于蒸馏水中,定容至1 000 mL,备用。 8.2.3 干旱胁迫测定 DB 37/T 44842021 5 采取纸上或纸间(盖纸和卷纸)置床方式对小麦种子进行干旱胁迫测定。 纸上发芽: 取2张发芽纸 (110 mm110 mm) , 叠放入发芽盒 (120 mm120 mm50 mm) 内, 加入PEG-6000溶液, 充分润湿, 用无菌纱布轻拭床面, 除去余液和纸间气泡后, 置种板辅助置种, 纸边距1 cm1.5 cm,盖上发芽盒盖,贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基本信息,放入人工气候箱,20 0.5
18、发芽8 d(12 h光暗交替)统计正常幼苗数,计算发芽率。 盖纸发芽: 取2张发芽纸 (110 mm110 mm) , 叠放入发芽盒 (120 mm120 mm50 mm) 内, 加入PEG-6000溶液, 充分润湿, 用无菌纱布轻拭床面, 除去余液和纸间气泡后, 置种板辅助置种, 纸边距1 cm1.5 cm。种子置床后加盖1张PEG-6000溶液润湿的发芽纸, 盖上发芽盒盖, 贴好标签并标注品种名称、 样品编号、重复次数、置床时间等基本信息,放入人工气候箱,20 0.5 发芽8 d(12 h光暗交替)统计正常幼苗数,计算发芽率。 卷纸发芽:用75 %的酒精溶液消毒操作台,将2张发芽纸(380
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