DB15∕T 2503—2022 捕食线虫性真菌捕食活性评价技术规范(内蒙古自治区).pdf
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1、 ICS 65.020.30 CCS B41 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 25032022 捕食线虫性真菌捕食活性评价技术规范 Specification for predatory activity of nematode-trapping fungi 2022-01-25 发布 2022-02-25 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 25032022 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 本文件由内蒙古畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC 19)归口。 本文件起草单位:内蒙古自治区农
2、牧业科学院、内蒙古农业大学、兴安盟科尔沁右翼前旗农牧业科学技术发展中心、中华人民共和国呼和浩特海关、通辽市科尔沁左翼中旗畜牧工作站、内蒙古自治区动物疫病预防控制中心。 本文件主要起草人:李军燕、罗晓平、王瑞、杨晓野、凤英、乔蕾、邵国玉、陈林军、王文蕊、樊凤娇、高娃、耿万恒、陈伟、刘阳、王鹏龙。 DB15/T 25032022 1 捕食线虫性真菌捕食活性评价技术规范 1 范围 本文件规定了捕食线虫性真菌捕食活性的评价方法及指标。 本文件适用于捕食线虫性真菌捕食活性的评价。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应
3、的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 捕食线虫性真菌 nematode trapping fungi 能够产生捕食性器官,将线虫幼虫捕获致死的一类杀线虫性真菌。 捕食性器官 trapping fungus 由捕食线虫性真菌菌丝营养细胞自发或在一定条件刺激下特化产生的一个或多个细胞,简称捕食器。 胃肠道线虫 gastrointestinal nematode 能够寄生在动物胃肠道内的线虫。 目标虫体 target parasite 为评价捕食线虫性真菌杀
4、线虫活性而使用的虫体。 本文件确定使用捻转血矛线虫三期幼虫 (捻转血矛线虫L3)。 捕食率 trapping rate DB15/T 25032022 2 被捕食线虫性真菌捕获的目标虫体占目标虫体总量的百分率。 4 目标虫体及捕食线虫性真菌培养 捻转血矛线虫三期幼虫培养与收集 取感染有捻转血矛线虫的羊只粪便样本,于28 条件下培养,收集感染性幼虫,实验用水应符合GB/T 6682的相关规定。详细步骤见附录A。 捻转血矛线虫三期幼虫的无菌处理 将收集的捻转血矛线虫L3用无菌蒸馏水、抗生素等反复洗涤,以达到无菌效果,实验用水应符合GB/T 6682的相关规定。详细步骤见附录A。 有孔玉米粉琼脂培养
5、基的制备 取商品化的玉米粉琼脂培养基,经高压后制备有孔固体培养基,实验用水应符合GB/T 6682的相关规定。详细步骤见附录B。 捕食线虫性真菌的培养 取待检捕食线虫性真菌,置于有孔玉米粉琼脂培养基中进行培养。详细步骤见附录B。 5 捕食线虫性真菌捕食活性评价方法 操作步骤 在显微镜下观察有孔玉米粉琼脂培养基上捕食线虫性真菌的生长情况,待其5个孔完全被菌丝覆盖后,取出培养皿,在生物安全柜中加入按4.2处理且活力正常、30 d内收集的捻转血矛线虫L3,每孔加入约50条。自加入虫体6 d后,于显微镜下观察并统计捕食率,捕食率以5个培养孔的平均捕食率计算。 捕食率统计 目标虫体被捕食线虫性真菌的捕食
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