HJ 1215-2021 水质 浮游植物的测定 滤膜-显微镜计数法(环境保护).pdf
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1、J 中华人民共和国国家生态环境标准水质浮游植物的测定滤膜-显微镜计数法HJ 1215-2021 Water quality-Determination of phytoplankton-Filtration membrane-Microscope counting method 本电子版为正式标准文本,由生态环境部环境标准研究所审校排版。2021-11-29发布2022-06-01实施主仨在三五有三走完音庐发布HJ 1215-2021 目次前言.l 适用范围.12 规范性引用文件.13 术语和定义.1 4 方法原理.15 试剂和材料.26 仪器和设备.27样品.38 分析步骤.49 结果计算与
2、表示.610 精密度.611 质量保证和质量控制.712 废物处置.7附录A(规范性附录)方法检出限计算方法.8附录B(资料性附录)惠普尔目镜分划板标定.9附录c(资料性附录)丝状体、似球形群体浮游植物细胞数量估算.12参考文献.13HJ 1215-2021 目IJ1=1 为贯彻中华人民共和国环境保护法)(中华人民共和国水污染防治法),防治生态环境污染,改善生态环境质量,规范水中浮游植物的测定方法,制定本标准。本标准规定了测定地表水中浮游植物的滤膜.显微镜计数法。本标准的附录A为规范性附录,附录B和附录C为资料性附录。本标准为首次发布。本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准可组织制订。本
3、标准主要起草单位:浙江省生态环境监测中心。本标准验证单位:上海市环境监测中心、浙江省海洋监测预报中心、浙江省杭州生态环境监测中心、浙江省宁波生态环境监测中心、江苏省常州环境监测中心和自然资源部第二海洋研究所。11 本标准生态环境部2021年11月29日批准。本标准白2022年6月1日起实施。本标准由生态环境部解释。HJ 1215-2021 水质浮游植物的测定滤膜-显微镜计数法1 适用范围本标准规定了测定水中浮游植物的滤膜-显微镜计数法。本标准适用于地表水中浮游植物的快速测定。当样品最大过滤体积为1000m1时,方法检出限为40cellslL。方法检出限计算方法详见附录Ao2 规范性引用文件本标
4、准引用了下列文件或其中的条款。凡是注明日期的号|用文件,仅注日期的版本适用于本标准。凡是未注日期的号|用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。GB/T 14581 水质湖泊和水库采样技术指导HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范HJ 494 水质采样技术指导3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 浮游植物phytoplankton 在水中营浮游生活的微小藻类植物,通常浮游植物就是浮游藻类,包括原核的蓝藻和其它各类真核藻类。3.2 3.3 3.4 计数单位counting unit 显微镜视野下选择计数的最小单元,如细胞。浮游植物密度density of phytopl
5、ankton 单位体积内浮游植物的细胞数,cells/L。显微镜计数视野microscope counting field 显微镜视野中限定一定面积的区域,用来定量计数浮游植物。4 方法原理样品通过一定孔轻的滤膜,群体、丝状体及单细胞浮游植物截留在滤膜上,滤膜经透明处理后在显微镜下镜检。HJ 1215-2021 5 试剂和材料除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂,实验用水为新制备的去离子水或茶馆水。5. 1腆(h)。5.2 腆化伺(KI)。5.3 甲醒溶液w(HCHO)=37%40%o5.4 鲁哥氏腆液:称取60g腆化tl甲(5.2)榕解在100ml水中,再加入40g腆(5.1)
6、,充分搅拌使其完全溶解,力口水定容至1000mL转移至棕色磨口玻璃瓶,室温避光保存。5.5 显微镜浸没油nif=1.515或ni3=1.518,配透明玻璃滴棒。5.6 滤膜:混合纤维素醋膜,直径25mm,孔径0.45m3mo注:每批次滤膜应进行水化测试和油透明测试,满足可水化和可透明要求后方可使用。将l张未使用的滤膜放入盛水的烧杯中,若滤膜被水完全浸润,则滤膜可水化。取1张未使用的滤膜,置于滴有显微镜浸没泊的载玻片上,若滤膜被浸没油完全浸润,则滤膜可透明。6 仪器和设备6. 1 25号浮游生物网:网孔直径0.064mm,网呈圆锥形,网口套在铜环上,网底端有出水开关活塞。6. 2 定性采样瓶30
7、ml100 ml广口聚乙烯瓶。6. 3 采水器:不锈钢或有机玻璃材质,圆柱形。容量和深度规格要满足采样要求。6.4 定量采样瓶lL2L广口聚乙烯瓶。6.5 冷藏箱。6. 6 真空抽滤装置:包括漏斗(直径25mm,容积200ml)、多孔聚醋滤膜支撑板、收集瓶、真空泵(相对真空度运一17Ia,可调)。6. 7 载玻片25mmX76 mm。j主:载玻片和盖玻片使用前应用浓盐酸和乙醇浸泡。若条件允许,选择可直接使用的载玻片或盖玻片。6.8 盖玻片25mmX25 mmo 6.9 无齿组织摄子。6.10 载玻片晾片板:适配同规格载玻片。6. 11 烘箱70oC:!:2 oC,温度可调。6.12 正置生物显
8、微镜或倒置生物显微镜:物镜4X、10X、20X、40X;目镜10X或15X。6.13 载物台测微计:又称镜台测微计,1 mml100 DIV,分划值为0.01mmo 注DlV指等分格,1 mm/lOO DlV即1mm等分成100格。6.14 惠普尔目镜分划板(Whipplegrid);边长为7mm10mm的正方形大格,划分为100个相同的正方形中格,位于中央的1个中格进一步划分为25个相同的正方形小格。j主:不具备惠普尔目镜分11J板时,亦可使用同规格的网格型目镜分划板(即中央的中格未细分为25小格的网格型目镜分划板)0 6.15 计数器。6.16 一般实验室常用设备。2 HJ 1215-20
9、21 7样品7. 1 样晶采集7. 1. 1 定性样晶点位布设及采样频次按照、GB/T14581、HJ/T91和HJ494的相关规定执行。使用25号浮游生物网(6.1)采集定性样品。关闭浮游生物网底端出水活塞开关,在水面表层至0.5 m水深处以20cm/s30 cm/s的速度做形往复,缓慢拖动约1min3 min,持网中明显有浮游植物进入,i夺浮游生物网(6.1)提出水面,网内水自然通过网孔滤出,待底部剩少许水样(5ml 10mD时,将底端出口移入定性采样瓶(6.2)中,打开底端活塞开关收集定性样品。采集分层样品时,用25号浮游生物网(6.1)过滤特定水层样品,其他步骤同采集表层样品。定性样品
10、采集完成后及时将浮游生物网清洗干净。样品采集后放入冷藏箱(6.5)冷藏避光运输。如有定性样品采集技术规范,按技术规范有关要求执行。7.1.2 定量样品按照GB/T14581、HJ/T91和HJ494的相关规定采集定量样品。使用采水器(6.3)采集lL2L样品至定量采样瓶(6.4)中。若水体透明度较高,浮游植物数量较少时,应酌情增加采样体积。定量样品采集完成后,定量来样瓶(6.4)不应装满,以便摇匀。注1:有些浮游植物(如蓝藻)常上浮在水面或成片、条带分布,可在此水华密集区域采样作为峰值参考。注2:定量样品采集应在定性样品采集之前。应保持固定时间段采样,以便结果之间可相互比较。7. 2 样品保存
11、7.2.1 定性样品定性样品采集后应立即加入鲁哥氏腆液(5.4)固定,用量为水样体积的1.0%1.5%。镜检活体样品不力日鲁哥氏腆液(5.4)固定。定性样品在室温避光条件下可保存3周1oc 5 oc冷藏避光条件下可保存12个月。活体样品4oC10 oC冷藏避光条件下可保存36ho 7. 2. 2 定量样品定量样品采集后立即加入鲁哥氏腆液(5.4)固定,用量为水样体积的1.0%1.5%。也可将鲁哥氏腆液(5.4)提前加入定量采样瓶(6.4)中带至现场使用。定量样品在室温避光条件下可保存3周;1 oC5 oC冷藏避光条件下可保存12个月。样品在保存过程中,应每周检查鲁哥氏腆液(5.4)的氧化程度,
12、若样品颜色变浅,应向样品中补加适量的鲁哥氏腆液(5.4),直到样品的颜色恢复为黄褐色。注:若样品需长期保存,应加入甲醒溶液(5.3),用量为水样体积的4%。3 HJ 1215-2021 8 分析步骤8. 1 试样制备8. 1. 1 预检按照8.1.28.1.5的要求完成预检装片,判断样品浮游植物密度,便于样品的后续分析。8.1.2 混匀样品每次取样前,采用上下颠倒至少30次的方式充分混匀样品,混匀动作要轻。8.1.3 过洁、体积根据预检估算浮游植物密度,调整样品过滤体积,最终使滤膜上约有40个105个浮游植物细胞。不同预检估计密度水平下推荐的样品过滤体积见表L表1推荐选用的样品过滤体积预估浮游
13、植物细胞密度水平(cells/L)推荐的样品过滤体积仇(m)108及以上0.5户2107 510 106 525 105 IOr50 104 5r100 103 50200 102 500 40 1000 注1:样品过滤体积大于漏斗容量时,应保证后续样品加入时不扰动滤膜上的浮游植物。注2:样品过滤体积小于5ml时,以实验用水再悬浮样品。首先用移液器(6.16)量取一定体积的样品至10ml50 ml规格的离心管中,再加入一定体积的实验用水,使悬浮后样品总体积在5ml及以上即可,最后用胶头滴管(6.16)加入2滴3滴鲁哥氏腆液(5.4)固定。8.1.4 样品过洁、用量筒或移液器(6.16)快速量取
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