DB4201T540-2018重要动物疫病监测样品采集技术规范.docx
《DB4201T540-2018重要动物疫病监测样品采集技术规范.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《DB4201T540-2018重要动物疫病监测样品采集技术规范.docx(20页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、ICS 65.020.01B 41DB4201武汉市地方标准DB4201/T 540-2018重要动物疫病监测样品采集技术规范2018-08-28 发布2018-09-28 实施武汉市质量技术监督局 发 布DB4201/T 540-2018前言本规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本规范附录A、附录B为资料性附录。 本规范由武汉市动物疫病预防控制中心提出。本规范由武汉市农业委员会归口。 本规范起草单位:武汉市动物疫病预防控制中心、烟台出入境检验检疫局、蔡甸区动物疫病预防控制中心。 本规范主要起草人:张四化、尹伟力、阮征、刘开武、王雪、万云、赵静、吴建英、陈橙、吴颢、杜娜、宫时玉。
2、本规范首次发布。 IDB4201/T 540-2018重要动物疫病监测样品采集技术规范1 范围本规范规定了重要动物疫病监测样品采集的一般要求,包括采样原则和要求、样品类别和数量、采样前准备、样品采集、采样记录、样品的包装、样品的保存和运输等。本规范适用于本地动物防疫机构技术人员及养殖企业技术人员开展相关采样工作。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY/T541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T 3075 畜禽养殖场消毒技术 中华人民共和国农业
3、部农医发2017年第25号 病死及病害动物无害化处理技术规范 中华人民共和国农业部公告第503号 高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范 3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 3.1重要动物疫病被本地政府列入强制免疫范围的动物疫病,或需进行优先防治的动物疫病、人畜共患病及其他对畜禽生产影响较大被列入本地监测计划的动物疫病。3.2监测采用规定的标准和方法,持续对特定群体中疫病的发生、流行、分布及相关因素进行观察与检测的过程。3.3样品取自动物及其产品或环境,拟通过相关检测反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。3.4 采 样按照规定的程序和要求从动物及其产品或环境取得样
4、品的过程。3.514 采样原则和要求4.1 采样人员必须是兽医技术人员,具备动物传染病相关知识,熟练掌握各种采样技术。 4.2 个人安全防护和消毒隔离按照 NY/T 3075 的要求执行。 4.3 凡发现动物有急性死亡,在排除炭疽后方可剖检、取样。 4.4 解剖时先胸腔后腹腔,先取实质性器官,后取肠道等易污染的组织器官及内容物。 4.5 病死动物要在隔离区(下铺塑料布)或实验室剖检、取样,剖检后的动物尸体、废弃物等要按病死及病害动物无害化处理技术规范进行无害化处理。5 样品类别和数量5.1 样品类别5.1.1 抗体监测样品包括全血、血清、禽蛋等; 5.1.2 病原监测样品包括分泌物、组织、粪便
5、、精液、皮肤样品等。 5.2 样品数量根据本地监测计划,结合养殖场(户)实际情况,确定监测的具体比例和数量。可参考场群内个体抗体监测抽样数量表和场群内个体病原学监测抽样数量表(见附录B.1和附录B.2)。 6 采样前准备6.1 采样用品6.1.1 血液采集用品一次性注射器、镊子、碘酊、75%酒精棉、干棉球、采血针、采血管、保定动物专用工具等。 6.1.2 禽蛋采集用品格状专用盛蛋盘等。 6.1.3 拭子采集用品无菌棉拭子、剪刀等。 6.1.4 组织采集用品解剖刀、剪刀、镊子、扁桃体采样器、灭菌牙签、酒精灯等。 6.1.5 其他采集用品金属探杯(采集牛羊O-P液)、塑料桶、全棉绳(采集猪口腔液)
6、等。 6.2 存放用品2塑料离心管(2 mL、10 mL、15 mL、50 mL)、玻璃容器、自封袋、试管架、离心管存放盒、铝盒、封口膜、冷冻剂、防震材料、采样箱、保温箱、胶布等。 6.3 防护用品口罩、一次性PE手套或乳胶手套、防护服、防护帽、防护眼镜、胶靴、消毒液等。 6.4 样品保存液6.4.2 根据所采样品的种类和要求,准备不同类型并分装成适量的保存液。 6.4.3 pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS,配制方法见附录 A.1) 6.4.4 pH 7.4 甘油 PBS(配制方法见附录 A.2) 6.4.5 棉拭子保存液(配制方法见附录 A.3) 6.4.6 粪便保存液(配制方法见附录 A
7、.4) 6.4.7 30甘油 PBS(配制方法见附录 A.5) 6.4.8 50甘油 PBS(配制方法见附录 A.6) 6.5 记录用品不干胶标签、签字笔、圆珠笔、油性记号笔、采样登记表和样品编号表(见附录B.3、附录B.4、附录B.5)等。 7 样品采集技术7.1 血液7.1.1 采血部位7.1.1.1 应根据动物种类确定采血部位,不同动物的采血部位见附录 B.6。 7.1.1.2 采血部位的皮肤应先剃毛(拔毛)、清洁,用 12碘酊消毒后,再用 75酒精棉球由内向外螺旋式脱碘消毒,干燥后穿刺采血。 7.1.2 采血方法7.1.2.1 猪前腔静脉采血仔猪或中等大小的猪适用前腔静脉采血,参照NY
8、/T 541中6.1.2.2规定执行。7.1.2.2 猪耳缘静脉采血体型较大的猪适用耳缘静脉采血,参照NY/T 541中6.1.2.1规定执行。 7.1.2.3 牛尾静脉采血牛尾静脉位于牛尾腹侧面的中心线皮下位置,采血时将牛尾上提,在离尾根10 cm左右中点凹陷处, 将注射器针头垂直刺入约1 cm,见有血液回流时,把注射器活塞向外拉使血液流入针筒。 7.1.2.4 牛、羊、马颈静脉采血3DB4201/T 540-2018颈静脉位于颈部侧面颈静脉沟内,采血时将牲畜保定,手指压迫颈静脉近心端,使血管怒张,针头与皮肤呈45角由下向上刺入血管,见有血液回流时,把注射器活塞向外拉使血液流入针筒。 7.1
9、.2.5 禽翅静脉采血禽侧卧保定后,将禽翅翻开,暴露翅静脉,拇指按压翅静脉近心端,使之怒张,针头由近心端向远心端方向平行刺入静脉,放松对近心端的按压,缓慢抽取血液。 7.1.2.6 禽心脏采血参照NY/T 541中6.1.2.6规定执行。 7.1.3 血样的处理7.1.3.1 全血将采集的全血立刻注入装有抗凝剂的试管中,轻轻摇动,充分混匀。血液抗凝可选用以下四种方法: a) 5 mL 全血加入 0.1 mL10乙二胺四乙酸二钠溶液。 b) 5 mL 全血加入 0.5 mL 3.8枸椽酸钠(柠檬酸钠)溶液。 c) 5 mL 全血加入 0.1 mL 1肝素钠溶液。 d) 使用市售商品抗凝管。 7.
10、1.3.2 血清7.1.3.2.1 将采集的全血在室温下(2025)倾斜 30角放置 2 小时4 小时,待全血凝固并析出血清后,将血清注入无菌离心管,离心后取上清液备用。 7.1.3.2.2 采集动物血样时,注射器或采血管应保留 1/2 或 1/3 的空气,以便析出血清。 7.2 禽蛋7.2.1 采集方法随机采集规模化禽场、养禽专业户、散养农户的不同养殖单元的禽蛋,禽蛋要求无破损,置于洁净卫生的格状专用盛蛋盘中。 7.2.2 卵黄抗体的提取提取卵黄液,将卵黄液、生理盐水、氯仿按1:1:2比例混匀后静置30分钟,3 000r/min离心20分钟, 取上层清液备用(氯仿体积不计,待检样品按被稀释2
11、 倍计算)。 7.3 拭子7.3.1 禽咽喉-泄殖腔双拭子将一个棉拭子插入喉头口及上颚裂处来回刮3 次5 次取咽喉分泌液,将另一个棉拭子插入泄殖腔约1.5 cm2 cm,旋转2圈3圈取泄殖腔内容物,将两个拭子的样品端插入同一个含1 mL棉拭子保存液(配制方法见附录A.3,下同)的离心管中,剪下或折断尾部,盖上管盖并做好标记。 7.3.2 禽环境拭子7.3.2.1 禽内环境拭子4用棉拭子擦拭笼具表面、笼具周围、垫料、饲槽、饮水、粪便等禽舍内环境部位,分别置于含1 mL 棉拭子保存液的离心管中,剪下或折断尾部,也可用多个拭子充分擦拭后置于一个离心管中,盖上管盖并做好标记。 7.3.2.2 禽外环境
12、拭子用棉拭子擦拭禽舍外的地面、出入道路、污水、运送工具等处,置于含1 mL棉拭子保存液的离心管中,剪下或折断尾部,盖上管盖并做好标记。 7.3.3 羊口鼻拭子用棉拭子刮取羊口腔黏膜分泌物,取另一个棉拭子插入羊鼻腔约23 cm,旋转后沾上分泌物,将拭子样品端一并置于含有1 mL棉拭子保存液的离心管中,剪下或折断尾部,盖上管盖并做好标记。 7.4 分泌物7.4.1 牛、羊食道-咽部分泌物(O-P 液)7.4.1.1 采样前禁食12小时,适量饮水,避免采样时胃内容物反流污染O-P液。采样前将O-P液探杯置于23的氢氧化钠溶液浸泡5分钟消毒,再用清水冲洗后使用。每采完一头动物,探杯要重复消毒并充分清洗
13、。 7.4.1.2 采样时,动物站立保定,将探杯随吞咽动作送入食道上部10 cm15 cm处,轻轻来回抽动 2 次3次,再将探杯拉出,采集2 mL5 mL O-P液,倒入含有等量pH 7.4甘油PBS的离心管中,盖上管盖并做好标记。 7.4.2 猪口腔液将直径1.3 cm的全棉绳用于保育猪、直径1.6 cm的绳子用于生长育肥猪和生产公母猪口腔液采集。全棉绳上端固定在猪圈栏杆上,下垂高度与猪只的肩关节齐平,悬挂处应远离饲槽和猪排便区,任猪咀嚼,30分钟后收取棉绳,刮取和挤压口腔液至灭菌自封袋内,然后将自封袋内液体转入离心管,盖上管盖并做好标记。每份样品1 mL以上为有效采集量。 7.5 组织7.
14、5.1 扁桃体7.5.1.1 从活体采集扁桃体样品时,应使用专用扁桃体采集器。 7.5.1.2 采样前将采样器置于 23的氢氧化钠溶液浸泡 5 分钟消毒,再用清水冲洗后使用。每采完一头动物,采样器要重复消毒并充分清洗。 7.5.1.3 采样时,用保定绳将猪只固定,再用开口器撬开猪嘴,顶住上额、压住舌头,卡住下巴,看到突起的扁桃体后,迅速进枪,顶住腭扁桃体(切忌滑动或搅动,以免创口过大),迅速扣动扳机,拉出刀杆,用灭菌牙签将样品从刀槽中挑至灭菌离心管中,盖上管盖并做好标记。 7.5.2 脏器组织7.5.2.1 根据疑似病种选择优先采集的脏器组织,采集有病变的部分,或采集病变和健康组织交界处。动物
15、主要疫病病原监测采样部位见附录 B.7。 7.5.2.2 用消毒的器械切取所需脏器组织块,每取一份组织块,应用火焰消毒剪刀镊子等采样器械,防止组织间相互污染,采集的组织块分别放入灭菌的容器或自封袋内。57.6 粪便7.6.1 一般动物粪便7.6.1.1 少量采集时,以灭菌的棉拭子从直肠深处或泄殖腔黏膜上蘸取粪便,立即置于含1 mL粪便保存液(配制方法见附录A.4,下同)的离心管中,盖上管盖并做好标记。 7.6.1.2 多量采集时,可将动物肛门周围消毒后,用器械或戴上手套的手伸入直肠内取粪便,也可用压舌板插入直肠,轻轻用力下压,刺激排粪,收集粪便,装入灭菌容器内,封口标记。 7.6.2 野生动物
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- DB4201T540 2018 重要 动物 疫病 监测 样品 采集 技术规范
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【Fis****915】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【Fis****915】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。