DB63∕T278-1996(2020) 野牦牛(含1∕2野血牦牛)冷冻精液(青海省).pdf
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1、ICS备案号:青海省地方标准DB63DB63DB63DB63DB63/T 2781996野牦牛(含 1/2 野血牦牛)冷冻精液1997-03-20 发布1997-06-20 实施青海省技术监督局青海省技术监督局发布发布发布发布DB63/T 2781996I目次前言.II1 范围.12 规格、质量.13 冷冻精液的检查方法:.14 冷冻精液的包装、标记、贮存、运输.2附录 A.3附录 B.5DB63/T 2781996II前言本标准自1997年8月1日实施。本标准的附录A、附录B均为标准的附录。本标准由青海省畜牧厅提出。本标准由青海省大通种牛场、青海省畜牧兽医总站负责起草。本标准主要起草人:李创
2、业、戴海琦。本标准主要审稿人:杨荣珍。DB63/T 27819961野牦牛(含 1/2 野血牦牛)冷冻精液1范围本标准规定了野牦牛(包括野血牦牛)冷冻精液的规格、质量、检查方法及包装、标记己贮存、运输等。本标准适用于野牦牛、含12野血牦牛冷冻精液的制作。2规格、质量2.1剂型:细管、颗粒。2.2剂量:细管,中型 0.5 毫升;微型 0.25 毫升;颗粒,0.10.0l 毫升。2.3活力解冻后活力不低于 0.3(指呈直线前进运动的精子百分率为 30%)。精子复苏率(下限)为 50.0%。2.4每一剂量中呈直线前进运动的精子数(下限)2.4.1细管:每支不应少于 1000 万个。2.4.2颗粒:每
3、粒不应少于 1000 万个。2.5解冻后的精子畸形率(上限为)20%。2.6解冻后的精子顶体完整率(下限)为 40%。2.7解冻后的精液无病原性微生物,每毫升精液中的细菌菌落数(上限)为 1000 个。2.8解冻后的精子存活时间在58贮存时下限为12小时,在20贮存时下限为6小时。野牦牛(含 1/2野血)冷冻精液必须符合上述各项指标,否则不得使用。3冷冻精液的检查方法:3.1活力检查3.1.1细管冻精投入到402温水中直接解冻,然后取一滴(0.40.5毫升)压片镜检。3.1.2颗粒冻精取一灭菌干燥的指形试管(或小安瓿瓶)注入2.9%二水柠檬酸钠液 1.62毫升,加热到402后快速投入冻精一粒(
4、一次一粒,多于一粒分别解冻)不停摇动,待冻精融化到1/3或1/2时即从温水中取出,轻轻摇动至完全融化,取一滴压片镜检。3.1.3评定精子活力的显微镜载物台温度保持 3540,放大倍数以 150600 倍为宜。3.1.4每批冻精应随机取样两份,分别解冻检查,每个精液样品应观察三个以上的视野,并注意不同液层内的精子运动状态,进行全面综合评定。3.1.5检查次数,应在冷冻后的当时检查一次,合格者贮存,在长期贮存期间应定期抽样检查(一般为一个月)。冻精发放前再抽样检查。3.2密度检查3.2.1检查用具:以血球计数器为基准,如用光电比色计则须用血球计数器校正。DB63/T 278199623.2.2每头
5、牛采出的精液应立即进行密度检查,以确定稀释比。一毫升稀释后的精液中最少要有 6 亿个活精子存在。3.3畸形率的检查取样精和解冻后精液样品各一小滴,分别按常规方法制成抹片,风干后用美兰或品红染色,置不低于 600 倍的高倍显微镜检查。检查精子总数不得少于 500 个,以求出所含畸形精子百分率。3.4解冻后精子顶体完整的检查3.4.1定期抽样检查。3.4.2采用姬姆萨染色法镜检,每个样品观察精子总数 500 个。3.5冻精细菌检查3.5.1定期抽样检查。3.5.2取 0.2 毫升解冻后的精液样品,放入血清琼脂平面上,在 37恒温箱中分别培养 24 小时或 48小时,统计出现的菌落数。3.6精子存活
6、时间的检查3.6.1定期把解冻后的精液置于 58、20C 环境中贮存,分别每 48 小时,24 小时检查次和1B 寸检查一次,直到全部失去直线前进状态,统计出存活时间及活率。3.6.2细管冻精解冻后不再稀释。4冷冻精液的包装、标记、贮存、运输4.1包装4.1.1细管冻精经过检查后严密封闭,按公牛品种、个体、牛号放入液氮容器内贮存。4.1.2颗粒冻精用无菌纱布小袋盛装,每一袋分别以 54 或 104 粒为一个标准单位,放入液氮容器中贮存。4.2标记4.2.1每头公牛、每批冻精均应分 51l 包装,细管和盛颗粒冻精的盛器外面均注明种牛品种、牛号、制作日期和制作单位、数量及活力的标记。4.2.2野牦
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