DB3715∕T 41-2025 羊肚菌液体菌种制备技术规程(聊城市).pdf
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1、 ICS 65.020 CCS B 05 3715 聊城市地方标准 DB 3715/T 412023 羊肚菌液体菌种制备技术规程 2023-10-7 发布 2023-11-7 实施 聊城市市场监督管理局 发 布 DB 3715/T 412023 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由聊城市农业农村局提出、组织实施并归口。本文件起草单位:聊城市农业技术推广服务中心、莘县农业农村综合服务中心、聊城市东昌府区农业技术推广服务中心、聊城市农业科学院、临清
2、市青年路街道办事处农技站、阳谷县农业技术推广服务中心、山东蒙恩现代有限公司。本文件主要起草人:李莉、刘芳、吴怀英、宋凌云、王泽奇、姜新、张静、杨红燕、申铜飞、刘晶、张素芳、王远亮、赵岑、何小春、苏静、王凤改、王光勇、付成龙。DB 3715/T 412023 1 羊肚菌液体菌种制备技术规程 1 范围 本文件规定了羊肚菌液体菌种制备的术语和定义、生产要求、生产技术和档案管理等要求。本文件适用于羊肚菌液体菌种的制备。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改
3、单)适用于本文件。GB 150 压力容器 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 50073 洁净厂房设计规范 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1935 食用菌栽培基质质量安全要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 液体菌种发酵罐 liquid strain fermentation tank 食用菌液体菌种培养的专用发酵设备,设备应符合 GB 150 要求。3.2 接种抢 inoculation gun 将液体菌种按无菌操作要求由发酵罐接种到固体培养机物料上的工具。4 生产要求 4.1 人员要求 工作人员应该保持个人卫生,进液体菌种发酵车间必须穿戴经灭
4、菌处理的工作服、口罩、鞋、帽。4.2 产地环境要求 4.2.1 场所要求 生产场所应场地开阔、路面硬化、卫生清洁,符合 NY/T 528 的环境卫生要求,水源水质符合 GB 5749要求。4.2.2 厂房要求 DB 3715/T 412023 2 厂房设计应符合 NY/T 528 要求,发酵罐菌种培养室应符合 GB 50073 要求。冷却区应卫生干净、接种区应正压无菌、培养室应能控温、通风。4.3 生产设备与设施 4.3.1 生产设备与用具 磅秤、天平、高压蒸汽灭菌锅、发酵罐、水净化处理设备、恒温摇床、超净工作台、调温设备、除湿设备、恒温培养箱、冰箱、显微镜等及常规用具。压力容器,应经政府有关
5、部门检验合格,符合 GB 150要求。应具有备用电源。4.3.2 基本设施 发酵罐菌种培养室应有调温、通风设施,空间洁净度应达到百级。菌种检验室有相应的实验检测设备、制种用的灭菌设施和常规用具。5 生产技术 5.1 工艺流程 母种制备 摇瓶液体菌种制备 发酵罐液体菌种生产 放罐接种 5.2 母种制备 母种制备应符合 NY/T 528 的规定。5.3 摇瓶液体菌种制备 5.3.1 培养基制备 培养基按下列配方配制,豆粕 0.5%,葡萄糖 2%,磷酸二氢钾 0.3%,硫酸镁 0.15%,原料应符合NY/T 1935 的规定。取定量的纯水放入烧杯,煮沸后将上述原料按比例依次倒入烧杯中完全溶解,制成培
6、养液,冷却备用。5.3.2 摇瓶装液量 采用 1 000 mL 三角瓶,装液量为 500 mL 用纱布和牛皮纸封口。5.3.3 灭菌 采用高温高压灭菌,在 121,压力约 1.5 g/m2条件下保持 30 min。5.3.4 接种 培养基冷却至常温,在无菌条件下将 34 块 2 cm3的母种菌块接入摇瓶内。5.3.5 培养 静置 48 h 后置于恒温摇床,24 25、140 r/min160 r/min,培养 4 d6 d。摇瓶液体菌种培养液应澄清透明,无杂菌、无异味;镜检无杂菌、菌丝浅白色且色泽均匀、形态正常;菌丝球密度达70%80%,菌丝球较小且均匀(菌球直径小于 0.5 cm),菌丝体生
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