DB63-T 1692-2018八眉猪细管冻精生产技术规程-(高清版).pdf
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1、 ICS 65.020.30 B 43 备案号:60856-2018 DB63 青海省地方标准 DB 63/T 16922018 八眉猪细管冻精生产技术规程 2018-09-25 发布 2018-12-01 实施 青海省质量技术监督局 发 布 DB 63/T 16922018 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由青海省农牧厅提出并归口。本标准起草单位:青海省家畜改良中心。本标准主要起草人:马元梅、张楠、冯宇诚、张晋青、常永梅、赵春川、王芳、郭占泽、赵青山、许发芳、莫常山、王朝风、何得仓、李景、刘于刚。DB 63/T 16922018 1 八眉猪细管冻精生产技
2、术规程 1 范围 本规程规定了种公猪的选择和调教、采精前准备、采精、精液处理、精液冷冻、细管冻精解冻和镜检、包装、标记和贮存、细管冻精质量评价等内容。本规程适用于八眉猪细管冻精的生产。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 4143 牛冷冻精液 GB/T 5458 液氮生物容器 NY/T 2823 八眉猪 3 种公猪的选择和调教 3.1 种公猪的选择 种公猪应符合NY/T 2823要求,三代系谱清楚。3.2 种公猪的饲养管理 种公猪单圈饲养。定时定量饲喂
3、,以精料为主,满足其营养需要,消化能需要量为28.45 MJ,体重90 kg以下的公猪粗蛋白需要量为14%,90 kg以上为12%,每千克饲料含维生素A 3531 IU,维生素E 11 IU。供给充足清洁饮水。经常刷拭猪体,保持清洁。每天适度运动1 h2 h。3.3 种公猪的调教 选择发情旺盛的母猪并固定,引诱公猪爬跨,待其爬上母猪后,将公猪阴茎导入空拳内进行采精,反复训练2 次3 次。4 采精前准备 4.1 器械 4.1.1 仪器设备 37 恒温箱、17 车载恒温箱、水浴锅、移液枪、密度仪、显微镜、离心机、冰箱、低温柜、细管封装一体机、程控冷冻仪、液氮生物容器、干燥箱。4.1.2 器具 DB
4、 63/T 16922018 2 保温集精杯、过滤膜、比色皿、锥形瓶、载玻片、盖玻片、离心管、烧杯、量筒、0.25 ml细管、提筒、试管、细管剪。4.2 器械的清洗 4.2.1 仪器设备的清洗和消毒 各仪器设备应定期用紫外灯照射消毒。使用结束后,应用洁净、柔软的布将残留的精液、水、污物擦拭干净。4.2.2 器具的清洗和消毒 各器具使用后浸泡在自来水中。洗涤时,先在加有洗涤剂的温热水中刷拭,然后用清水反复冲洗干净,最后用蒸馏水冲洗。载玻片和盖玻片洗净后用柔软的布擦干备用,其他玻璃器皿将水晾干后放入干燥箱,加热至160 恒温60 min,自然冷却后待用。0.25 ml细管应置于紫外灯下消毒,其他非
5、玻璃材质的器具洗净后自然晾干,用75%酒精棉球擦拭消毒。4.3 采精场所的卫生和消毒 采精场所保持安静,地面保持清洁卫生,采精前应喷洒0.1%高锰酸钾进行消毒。4.4 稀释液配制 4.4.1 常温保存稀释液配制 向锥形瓶中加入1000 ml双蒸水,分别称取葡萄糖37 g、乙二胺四乙酸1.25 g、二水柠檬酸钠0.6 g、碳酸氢钠1.25 g、氯化钾0.075 g,溶解于双蒸水中,搅拌均匀,用定性滤纸过滤至另一锥形瓶中,滤液煮沸15 min,待温度降至常温,称取青霉素钠0.6 g、硫酸链霉素1 g加入滤液中并混匀。4.4.2 冷冻基础液配制 向锥形瓶中加入1000 ml双蒸水,分别称取葡萄糖11
6、 g、柠檬酸14.8 g、三羟甲基氨基甲烷24.2 g,溶解于双蒸水中,搅拌均匀,用定性滤纸过滤至另一锥形瓶中,滤液煮沸15 min,待温度降至常温,称取青霉素钠0.6 g、硫酸链霉素1 g加入滤液中并混匀。4.4.3 冷冻稀释液 I 液配制 向锥形瓶中加入800 ml冷冻基础液、200 ml新鲜卵黄,搅拌均匀,置于17 备用。4.4.4 冷冻稀释液 II 液配制 向锥形瓶中加入940 ml冷冻稀释液I液、60 ml甘油,搅拌均匀,置于5 备用。4.4.5 解冻液配制 向锥形瓶中加入1000 ml双蒸水,分别称取葡萄糖50 g、二水柠檬酸钠3 g、乙二胺四乙酸1 g,溶解于双蒸水中,搅拌均匀,
7、用定性滤纸过滤至另一锥形瓶中,滤液煮沸15 min,待温度降至常温。5 采精 5.1 台猪和种公猪的准备 DB 63/T 16922018 3 选择健壮、大小适中、性情温顺的母猪做台猪。采精前用清水冲洗台猪的外阴、臀部和公猪阴茎、包皮及其周围腹壁,然后用0.01%高锰酸钾溶液对公猪被清洗过的部位消毒,再用温水冲洗干净。5.2 采精频率 后备种公猪每周采精一次,成年种公猪每周可采精两次。5.3 采精方法 从37 恒温箱中取出保温集精杯,杯口覆盖过滤膜。采精员戴乳胶手套,蹲在台猪的一侧,诱导公猪爬跨台猪,按摩公猪睾丸,待公猪阴茎伸出后导入空拳内并握紧,当阴茎充分勃起后顺势向前牵拉,手指有弹性并具有
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