DB4505∕T 0010-2023 岛礁石斑鱼生态增殖技术规范(北海市).pdf
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1、 ICS 65.150 CCS B 50 4505 北海市地方标准 DB4505/T 00102023 岛礁石斑鱼生态增殖技术规范 Technical specification for ecological enhancement of reef-inhabiting groupers 2023-03-08 发布 2023-04-08 实施 北海市市场监督管理局 发 布 DB4505/T 00102023 I 目次 前言.III 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 海域及容量选择.2 海域自然条件.2 增殖容量.2 5 种类选择.2 6 苗种繁育、规格及适应性驯化.
2、2 苗种繁育.2 规格.2 适应性驯化.2 7 苗种检验检疫.3 检验资质机构要求.3 抽检原则与数量要求.3 检验内容与方法.3 8 苗种原生性鉴定.3 用于微卫星标记检测的样品采集.3 样品采集、运输与保藏条件.3 DNA 提取.3 微卫星基因分型方法.3 统计分析.4 原生性判定.4 9 生态增殖.4 苗种类型.4 增殖放流方法.4 苗种比例及放流要求.4 10 增殖效果评估.4 基于标志石斑鱼的增殖效果评估.4 基于环境 DNA 调查的增殖效果评估.5 基于微卫星分子标记的增殖效果评估.5 11 管理.5 附录 A(规范性)石斑鱼生态增殖放流情况记录表.6 附录 B(资料性)环境 DN
3、A 的调查方法.7 B.1 抽样.7 DB4505/T 00102023 II B.2 运输.7 B.3 保藏.7 B.4 DNA 提取.7 B.5 鱼类物种鉴定.7 附录 C(资料性)基于微卫星分子标记的石斑鱼增殖放流群体回捕占比率计算.10 C.1 样本采集.10 C.2 样本保存.10 C.3 样本 DNA 提取.10 C.4 微卫星基因分型.10 C.5 石斑鱼回捕抽样样本的遗传区分.10 C.6 石斑鱼增殖放流群体回捕占比率计算.10 参考文献.11 DB4505/T 00102023 III 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规
4、则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由北海市海洋局提出并归口。本文件起草单位:中国科学院南海海洋研究所、中山大学、广东海洋大学、海南大学、广西科学院、广西精工海洋科技有限公司、湛江市东海岛东方实业有限公司。本文件主要起草人:胡超群、王学锋、李广丽、夏军红、周永灿、陈廷、吴小易、李文笙、孙彩云、陈偿、罗鹏、柯志新、田昌绪、李建龙、姜发军、宋建强、陈文林。DB4505/T 00102023 1 岛礁石斑鱼生态增殖技术规范 1 范围 本文件规定了岛礁石斑鱼生态增殖的海域选择、种类选择、苗种繁育、适应性驯化、检验检疫及增殖容量要求,描述了苗种原
5、生性鉴定、生态增殖及增殖效果的监测和评估方法,提供了石斑鱼生态增殖管理的指导意见。本文件适用于北海市辖区内岛礁石斑鱼的生态增殖。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 11607.3 渔业水质标准 第3部分:渔业水质要求 GB/T 18654.2 养殖鱼类种质检验 第2部分:抽样方法 GB/T 20361 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定 高效液相色谱荧光检测法 GB 31656.13 食品安全国家标准 水产品中硝基呋喃类
6、代谢物多残留的测定 液相色谱-串联质谱法 GB/T 34748.7 水产种质资源基因组DNA的微卫星分析 第7部分:分析步骤 NY 5070 无公害食品 水产品中渔药残留限量 SC/T 3018 水产品中氯霉素残留量的测定 气相色谱法 SC/T 9401.4 水生生物增殖放流技术规程 第4部分:水域条件 SC/T 9401.6 水生生物增殖放流技术规程 第6部分:放流物种质量 农业部公告第1125号 一、二、三类动物疫病病种目录(水生动物部分)3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。原生种 original species 在无人为干预的野生环境下自然演化而来的物种。生态增殖 ecolog
7、ical enhancement 采用放流、移植或栽培、底播等人工方式,在生态系统承载力范围内,利用天然生产力增加生物种群产量的过程。适应性驯化 adaptive domestication 增殖放流苗种适应野外海域环境的人工处理过程。DB4505/T 00102023 2 原位增殖 in-situ stock enhancement 在放流物种原本栖息的生境中,通过生态增殖手段,利用天然生产力增加放流种群产量的过程。环境 DNA environmental DNA 从环境样本中提取的所有DNA的集合,包括环境微生物以及从生物体上脱落下来的活细胞DNA和因生物死亡后细胞破碎而游离出的胞外DNA
8、。4 海域及容量选择 海域自然条件 应符合SC/T 9401.4的规定,且满足下列条件:a)岛礁为岩礁或人工鱼礁,水流较缓且附近底质起伏而又多石砾;b)溶解氧5 mg/L,盐度 2235,水温 22 33。增殖容量 增殖容量不超过拟增殖海域历史上最大捕捞产量的2倍。5 种类选择 选择生活史大部分时间主要栖息于珊瑚礁、岩礁或人工鱼礁且活动范围较小的石斑鱼原生种。禁止采用外来种、杂交种、转基因种以及其他不符合生态要求的石斑鱼物种进行生态增殖。适合生态增殖的石斑鱼种类主要有斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)、棕点石斑鱼(E.fuscoguttatus)和豹纹鳃棘鲈(Plectro
9、pomus leopardus)。6 苗种繁育、规格及适应性驯化 苗种繁育 人工繁育的苗种在培育过程中,水质应符合GB 11607.3规定的要求,病害检测按照SC/T 9401.6规定的方法进行,培育期间应做好培育过程的采样分析和观测数据记录,主要包括海水理化因子(水温、溶解氧、pH、盐度、氨氮和有机质等)、投喂的饲料类型(或活饵种类)、饲料粒径(饲料号数)、苗种数量、鱼苗活力及体形外观等。规格 增殖放流的石斑鱼全长宜在5 cm以上。适应性驯化 宜满足以下内容:a)苗种放流前 14 d28 d 宜模拟增殖海域的水温、盐度等环境条件对苗种进行驯化;b)在有条件的情况下开展行为驯化,不限于捕食和躲
10、避敌害生物等行为驯化,以增强放流苗种的野外适应能力;DB4505/T 00102023 3 c)有条件的情况下对石斑鱼苗种进行音响驯化,并在放流海域继续进行音响驯化,以提高增殖效果。7 苗种检验检疫 检验资质机构要求 由具备相应检验资质的单位进行检验,并出具正式报告。抽检原则与数量要求 随机取样,常规质量检验每次取样尾数不少于50尾。检验内容与方法 苗种质量的检验内容、检验方法与要求见表1。表1 苗种质量的检验内容、方法与要求 检验内容 检验方法与要求 感官质量 规格整齐、活力强,外观完整,体表光洁 可数指标 规格合格率90以上,死亡个体比例、伤残率、畸形率之和5 病害 参照SC/T 9401
11、.6方法检测,无病害,不得检出农业部公告第1125号规定的水生动物疫病病种药残 分别参照GB/T 20361、SC/T 3018、GB 31656.13方法检测孔雀石绿、氯霉素和硝基呋喃类代谢物。符合NY 5070的要求,不得检出药残 其它 对于苗种的特发病、易发病及新型药残,依照最新标准所规定的方法进行检测。检测结果达到无公害食品类标准 8 苗种原生性鉴定 用于微卫星标记检测的样品采集 8.1.1 原生种:在放流物种分布的海域内随机抽样,数量为 50 尾60 尾。8.1.2 待检苗种群体:随机抽样,每批次取样 50 尾60 尾。样品采集、运输与保藏条件 现场取1 cm1 cm的尾鳍样品,保存
12、于盛有5 mL无水乙醇的10 mL离心管中,常温运回实验室后,将10 mL离心管中的无水乙醇更换一次,放入-80 或-20 低温冰箱长期保存。DNA 提取 按常规酚-氯仿法提取总DNA,放入-80 或-20 低温冰箱长期保存。微卫星基因分型方法 按照GB/T 34748.7规定的方法进行。DB4505/T 00102023 4 统计分析 利用微卫星分子标记分析软件GeneMapper和Cervus进行遗传多样性和基因流分析。原生性判定 当待检苗种群体与原生种群体间不存在显著遗传差异(P0.05),可判定待检苗种群体与本地群体存在明显基因交流,属于同一种群来源。9 生态增殖 苗种类型 9.1.1
13、 未标志石斑鱼苗种 未进行过任何标志处理的石斑鱼苗种。9.1.2 标志石斑鱼苗种 采用挂牌、金属线码、被动式整合雷达标志、超声波标志或无线电标志等方法进行标志处理的石斑鱼苗种。增殖放流方法 9.2.1 原位增殖 根据岛礁自然礁体结构和生物资源、生态环境现状以及拟增殖石斑鱼种类的栖息习性等基础数据,直接将规模化培育的大规格苗种在石斑鱼原生种的栖息生境进行增殖。9.2.2 定点增殖 将石斑鱼苗种运送到适宜石斑鱼栖息的预设站位放流,进行增殖。苗种比例及放流要求 标志石斑鱼占石斑鱼总放流量的比例宜为510。标志石斑鱼群体与未标志群体应在同一海域、同一站点和同一时间进行放流。标志与未标志石斑鱼的数量比在
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