T∕AFFI 039-2023 鲜葡萄及葡萄干中黑曲霉的测定.pdf
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1、ICS 65.020B 20团体标准T/AFFI 039-2023鲜葡萄及葡萄干中黑曲霉的测定2023-04-11发布2023-04-11施阿拉尔果业行业联合协会 发布T/AFFI 0392023目录前言.11范围.22规范性引用文件.23术语和定义.24原理.25培养基与试剂.26标准菌株.37仪器和设备.38检测程序.39生化实验.410菌落计数.411结果与报告.511.2报告.5T/AFFI 03920231前言本文件按照 GB/4789.15食品微生物学检验 霉菌和酵母计数的规定起草。本文件由新疆兵团第一师阿拉尔市果业行业联合协会提出。本文件由新疆兵团第一师阿拉尔市果业行业联合协会归
2、口。本文件起草单位:新疆维吾尔自治区产品质量监督检验研究院、新疆维吾尔自治区标准化研究院、新疆天科博创科技有限公司、新疆兵团第一师阿拉尔市果业行业联合协会、新疆艾旗斯德检测科技有限公司本文件主要起草人:孙蕾、范田丽、祁来芳、文红梅、丁煜玮、付晓静、周皓、廖毅凡、何军、陈晨本文件实施应用中的疑问,请咨询新疆维吾尔自治区产品质量监督检验研究院(乌鲁木齐市河北东路 188 号)。新疆维吾尔自治区产品质量监督检验研究院:联系电话:0991-3191180;邮编:830011本文件为首次发布。T/AFFI 03920232鲜葡萄及葡萄干中黑曲霉的测定1范围本标准适用于葡萄中黑曲霉的测定。本标准规定了葡萄
3、中黑曲霉的检验方法。本文件适用于新疆地区鲜葡萄、葡萄干中黑曲霉的检测。2规范性引用文件本文件中引用的文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用规定的一级水。3术语和定义3.1鲜葡萄 fresh grapes选用新鲜、洁净,经过一定加工或保鲜处理的葡萄。3.2葡萄干 Raisins经自然风干或人工加热等方式使葡萄果实脱水而成。3.3黑曲霉 Aspergillus niger黑曲霉属于半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、丛梗孢科、曲霉属真菌中的常见种。在高温、高湿
4、环境下易大量生长繁殖,多生于多汁的果实上,引起腐烂变质。4原理被感染葡萄中的黑曲霉可在马铃薯葡萄糖琼脂上于 28条件下培养 5d,检测霉菌,从中分离黑曲霉,通过生化鉴定确定黑曲霉菌并计数,算出每毫升检验中黑曲霉菌数。5培养基与试剂5.1 培养基5.1.1 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)。5.1.2 2%淀粉查氏培养基。T/AFFI 039202335.2试剂5.2.1 无菌生理盐水。5.2.2 I2-Ki 试剂(花粉活力染色液)。6标准菌株6.1 黑曲霉标准菌株7仪器和设备7.1 培养箱:28士 1。7.2 拍击式均质器及均质袋。电子天平:感量 0.1 g。7.3 无菌锥形瓶:容量 500 mL。
5、7.4 无菌吸管:1 mL(具 0.01 mL 刻度)、10 mL(具 0.1 mL 刻度)。7.5 无菌试管:18 mmx180 mm。7.6 旋涡混合器。7.7 无菌平皿:直径 90 mm。7.8 恒温水浴箱:46 士 1。7.9 显微镜:10 倍100 倍。7.10 微量移液器及枪头:1.0 mL。7.11 郝氏计测玻片:具有标准计测室的特制玻片。盖玻片。7.12 测微器:具标准刻度的玻片。7.13 电子天平:感量 0.01 g。7.14 振荡器8检测程序见图 1。样25g 样品+225mL 无菌稀释液,均质10 倍系列稀释选择 2-3适宜稀释度的样品匀液,平皿加入 1mL,稀释度做两平
6、行皿中加入20mL25mL马铃葡萄糖琼脂菌落计数2815d报T/AFFI 03920234图 1 黑曲霉菌数测定验程序8.1检测步骤:8.1.1 称取 25g 样品置盛有 225mL 生理盐水的无菌均质袋内,用拍击式均质器拍打 1min2min,制成 1:10 的样品匀液。8.1.2 取 1 mL 1:10 样品匀液注入含有 9mL 无菌稀释液的试管中,另换一支 1mL 无菌吸管反复吹吸,或在旋涡混合器上混匀,此液为 1100 的样品匀液。8.1.3 按 5.1.3 操作,制备 10 倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用 1 支 1 mL无菌吸管。8.1.4 根据对样品污染状况的估计,
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