SN_T 5145.6-2019 出口食品及饲料中动物源成分快速检测方法 第6部分:牛成分检测 PCR-试纸条法.pdf
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1、书 书 书犐 犆犛 犆 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 出口食品及饲料中动物源成分快速检测方法第部分:牛成分检测犘犆犚 试纸条法犚犪 狆 犻 犱犐 犱 犲 狀 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犪 狀 犻 犿犪 犾犻 狀 犵 狉 犲 犱 犻 犲 狀 狋犻 狀犲 狓 狆 狅 狉 狋犳 狅 狅 犱犪 狀 犱犳 犲 犲 犱犘 犪 狉 狋:犇犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀狅 犳犅狅 狏 犻 狀 犲犐 狀 犵 狉 犲 犱 犻 犲 狀 狋犘犆犚 犔犪 狋 犲 狉 犪 犾犳 犾 狅狑犱 犻 狆 狊 狋 犻 犮 犽犿犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国海关总署发 布书 书 书前言
2、 出口食品及饲料中动物源成分快速检测方法分为以下 个部分:第部分:猫成分检测 试纸条法;第部分:貂成分检测 试纸条法;第部分:鹿成分检测 试纸条法;第部分:骆驼成分检测 试纸条法;第部分:狗成分检测 试纸条法;第部分:牛成分检测 试纸条法;第部分:绵羊成分检测 试纸条法;第部分:驴成分检测 试纸条法;第部分:狐狸成分检测 试纸条法;第 部分:鹅成分检测 试纸条法;第 部分:鸭成分检测 试纸条法;第 部分:火鸡成分检测 试纸条法;第 部分:鸽子成分检测 试纸条法;本部分是 的第部分。本部分按照 给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由
3、中华人民共和国海关总署提出并归口。本部分起草单位:中华人民共和国天津海关,天津师范大学,中国检验检疫科学研究院,北京华大蛋白质研发中心有限公司。本部分主要起草人:郑文杰、张霞、庞璐、刘培、赵良娟、李宗梦、张宏伟、陈颖、尹长城、孙金生。犛犖犜 出口食品及饲料中动物源成分快速检测方法第部分:牛成分检测犘犆犚 试纸条法范围本部分规定了食品及饲料中牛源性成分检测的 试纸条方法。本部分适用于肉、肉制品及饲料中牛源性成分的定性检测。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。分析
4、实验室用水规格和试验方法 饲料采样 实验室质量控制规范食品分子生物学检测术语、定义和缩略语 术语和定义下列术语和定义适应于本文件。牛犅狅 狏 犻 狀 犲属于哺乳纲,偶蹄目,牛科,牛属。本标准中牛成分即指牛特异性片段。缩略语下列缩略语适用于本文件。:,脱氧核糖核酸。:,脱氧核苷酸三磷酸。:,十六烷基三甲基溴化铵。:(),三羟甲基氨基甲烷。:,乙二胺四乙酸。:,异硫氰酸盐。方法原理利用裂解液破碎样本细胞,苯酚氯仿法抽提基因组,以提取的为模板,采用上游和下游引物分别经异硫氰酸盐(,)和生物素()标记进行扩增,获得两端分别带有异硫氰酸盐和生物素分子的产物。用含有金标记的抗异硫氰酸盐的兔多克隆抗犛犖犜
5、体和固定有链亲和素的通用核酸检测试纸条对产物进行筛选检测,并对阳性产物进行测序确证。试剂和材料除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂,实验用水符合 的要求。牛源性成分检测用引物(对)序列及标记物为:牛成分扩增引物详见表。表试验用引物物种名称引物序列()端标记物靶基因牛:异硫氰酸盐():生物素()犆犢犜犅 试剂 聚合酶(,)。:(,脱氧腺苷三磷酸)、(,脱氧胸苷三磷酸)、(,脱氧胞苷三磷酸)、(,脱氧鸟苷三磷酸)。缓冲液:(),。三氯甲烷(氯仿)。异丙醇。提取液:,。沉淀液:,。酚三氯甲烷异戊醇溶液:按照 饱和酚:三氯甲烷:异戊醇溶液体积比为 进行配制。三氯甲烷异戊醇溶液:按照三氯甲烷:异戊醇溶液
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