生物选修1归纳.doc
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1、【选修一】 复习归纳一、培养基的成分:1、培养基概念:给生物 (植物、动物组织或细胞、细菌、真菌和病毒) 的生长、繁殖提供营养的液体或固体。2、微生物的培养基: 营养成分包括 碳源(供碳元素的有机物或无机物)、氮源(供氮元素的有机物或无机物)、水、无机盐二、微生物培养基的制作过程:根据培养对象的类型确定配方 称量并装入三角瓶中 调节好PH值 灭菌 60 0C三角瓶中培养基倒入培养皿中凝固成平板,或倒入试管中搁置斜面。 三、常见培养基的配方 ( 选修1+选修3)1、细菌培养基: (1)成分: 蛋白胨 + 酵母提取液 + NaCl + 水 (PH: 一般要求中性偏碱的环境)(2)类型: LB固体培
2、养基(加琼脂或琼脂糖) a、 培养皿中固体平板培养基:用于划线分离或稀释涂布分离微生物。 b、试管固体斜面培养基:用于保存菌种) LB液体培养基(不含琼脂):常用于菌种的扩增繁殖或工业生产。分离含脲酶的微生物培养基: 尿素、葡萄糖、氯化钠、K2HPO4、酚红(作为指示剂)、琼脂糖(不含氮)、水(要点:只能以尿素作为唯一的氮源)2、真菌培养基: 蔗糖+豆芽汁+无机盐 (PH: 一般要求中性偏酸的环境)。若要培养酵母菌,则可只要葡萄糖溶液即可3、生产果酒:(1)苹果果酒:苹果汁、蔗糖(加入蔗糖的目的有:有利于酵母菌的繁殖 能提高果酒的酒精浓度) (2)葡萄酒:葡萄、蔗糖溶液 (用于扩增酵母菌,标志
3、是排出气泡CO2 )4、生产果醋:果酒、水 (醋杆菌吸附在锯末上、通入空气、测PH 作为生产标志)5、生产泡菜:多种蔬菜均可、调味品、食糖、盐6、植物组织培养的培养基 ( MS培养基): 水分、大量元素、微量元素、有机成分(如蔗糖、甘氨酸、肌醇等)。 注意:蔗糖: 作为营养并维持渗透压 此时无植物激素和琼脂。(1) MS发芽培养基:MS培养基 + BA溶液(多)+ NAA溶液(少)+ 蔗糖 + 琼脂(2) MS生根培养基:MS培养基 + NAA溶液 + 蔗糖+琼脂(注意:此时不加入BA溶液是因为生根时所需的细胞分裂素少,丛状苗本身可产生少量的细胞分裂素)【说明: BA(苄基腺嘌呤)是细胞分裂素
4、类似物,NAA(萘乙酸)是生长素类似物。】四、微生物的无菌操作要领:(1)培养基要灭菌 (高压蒸汽灭菌) (2)所用的器皿要灭菌 (高压蒸汽灭菌) (3)操作环境 (超净台) 和双手要消毒 (70%酒精擦拭)(4)菌种的转移接种要在超净台中酒精灯的火焰旁进行(5)实验结束时,培养用过的培养基一定要经过高压蒸汽灭菌后才能倒掉。五、几种消毒或灭菌的方法:1、一般的培养基(耐高温)、器皿:高压蒸汽灭菌(121 0C、1 Kg/cm2 、15 min)2、培养基中含葡萄糖:为了防止葡萄糖高温分解碳化,要用500g/cm2 、90 0C、30min。3、尿素固体培养基: 培养基经121 0C下灭菌后,冷
5、却至60 0C时,再将尿素溶液通过G6玻璃漏斗过滤加入。G6玻璃砂漏斗过滤在使用前也要在121 0C下用纸包好灭菌。4、超净台灭菌: 打开紫外灯和过滤风,灭菌30min。5、双手用70%酒精擦拭消毒。6、无菌空气可以用通气管中塞上脱脂棉通入。7、制果酒的葡萄: 用高锰酸钾溶液消毒8、植物组织培养时的外植体消毒:先在70%乙醇中浸泡30秒,再放入5%次氯酸钠中浸泡5分钟,然后用另一5%次氯酸钠溶液浸泡5分钟,最后在超净台中用无菌水清洗。若外植体是取自进行过无菌培养的幼苗,则外植体不需要上述的消毒过程。9、接种环灭菌:在酒精灯外焰处灼烧10、涂布器(即玻璃刮刀)灭菌:保存在70%乙醇中,使用时放在
6、酒精灯火焰上,等到刮刀上的火焰熄灭。六、微生物的分离和计数问题:1、划线分离法(1)优点:操作方法简单(2)不足:菌落不容易分开,分离效果较差。(3)要领:划线前都要灼烧接种环灭菌(第一次灭菌是为了消灭接种环上原有的微生物、后面在每一区划线之前灼烧是为了保证接种的菌种只能来自前一次划线的末端。划线的第一区与最后一区不能相连。(4) 说明:此方法不能用于计数。2、稀释涂布分离法: (1)优点:单菌落更易分开,且可用于对微生物间接计数(2)不足:操作复杂(3)要领:将菌液稀释(10-4、10-5),取0.1mL不同稀释度的菌液,加在培养基的固体表面,用玻璃刮刀涂布在培养基平面上,然后进行倒置培养。
7、每种稀释度涂三个平板。通常以每个培养皿有20个以内的单菌落最为合适。(4)溶液中微生物数目的换算: 平板上菌落平均数稀释倍数(溶液的体积除以0.1mL)七、微生物分离的意义:单菌落的分离是消除杂菌污染的通用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简单方法之一。八、选修1相关微生物:1、大肠杆菌: 原核生物,革兰氏阴性、异养、兼性厌氧的肠道杆菌,二分裂方式增殖。2、含脲酶的细菌: 把尿素水解成氨和CO2。3、黑曲霉和苹果青霉: 真核生物,产生果胶酶,将果胶分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯4、枯草杆菌: 原核生物,产生-淀粉酶,该酶最适PH为5.57.5,最适温度50-75 0C。5、酵母菌: 真核生物
8、,异养、兼性厌氧型,无氧条件下利用糖类物质生产果酒。6、醋化醋杆菌: 原核生物,异养、需氧型,有氧条件下利用将乙醇氧化成醋酸。7、乳酸菌(原核生物,厌氧型) 、假丝酵母(真核生物): 在无氧条件下,利用菜中的糖和其他有机物进行发酵,产生有机酸和醇类物质,也有少量HNO2 。【练习】一、微生物的名称及培养的最适条件1、大肠杆菌培养的最适温度_2、有一些细菌含有_,可通过降解尿素作为其生长的氮源。取土样时,从_的地方取。3、有些微生物,如_等都可用于生产果胶酶。4、-淀粉酶可从_提取。其作用的最适pH为_,最适温度为_5、制作果酒时,_(微生物)在_条件下进行发酵,该过程会产生_6、制作果醋时,_
9、(微生物)在_条件下,将_氧化为_。7、腌制泡菜时,是在_条件下_(微生物)利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵,发酵产物有_等,其中也有少量的_。二、写出下列器具或物品灭菌的方法1、LB液体培养基_2、接种环_3、无菌水_4、玻璃刮刀_5、超净工作台_6、尿素固体培养基_7、外植体_,归纳:不同灭菌方法的适用对象 1、高压蒸汽灭菌法_2、灼烧灭菌法_3、紫外线灭菌_4、滤过除菌_三、判断下列操作是否需要在无菌环境下进行 1、外植体接种入培养基_ 炼苗_ 2、倒平板_ 搁置斜面_3、划线分离_ 涂布分离_ 4、果酒、果醋制作_ 5、制备固定化酶柱_6、泡菜的腌制_四、有关物质的组成及鉴定等1、果
10、胶起着_作用,是细胞壁的主要成分,由_和_组成。果胶可用_鉴定,因为_。2、-淀粉酶可将淀粉水解成_ ,该产物在遇_呈_色。该产物在_催化下水解成_,后者在_催化下水解成葡萄糖。3、果酒发酵过程中,若_,则说明发酵停止。4、若要监控醋酸发酵的情况,可用_检测流出液的pH。5、亚硝酸盐与对氨基苯甲酸发生重氮化反应,这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成_色产物,可用_法定量测定。6、在加入_的尿素培养基中,有脲酶的细菌菌落周围会观察到_色的环状区域。五、有关培养基及成分1. LB培养基(基础培养基,用于细菌培养)配方-P21LB液体培养基:成分_, 功能是_LB固体培养基: 成分_, 功能是_
11、尿素固体培养基: 成分_ _, 功能_ _醋化醋杆菌扩增培养基配方(成分P49):_2. MS培养基(植物组织培养)-P60 MS发芽培养基: 成分_,功能_MS生根培养基:成分_,功能_ 3.如何证明培养基上菌落来自菌种而不是培养基本身? 答:用相同的培养基不接种菌种(也叫空白培养基),在相同的条件下培养,以该培养基上是否有菌落为指标。1、下表为山楂法制作实验的步骤和结果记录表。请在下表的结果观察栏填上相应的实验现象,并回答有关问题:试管号黑曲霉提取液(mL)沸水浴(min)蒸馏水(mL)山楂匀浆(mL)37水浴缓慢振摇30min结果观察 95%乙醇(mL)结果观察1510051025005
12、1030055 10黑曲霉是一种核丝状微生物,其培养应在氧条件下进行。黑曲霉提取液中含有的酶将山楂匀浆中的水解,提高了出汁率和澄清度。上表中试管1在沸水浴中加热10min目的是,这一试管在实验中的作用是。2、近几年生物技术发展迅猛,和我们的生活越来越密切了。请回答下列问题:(1)利用植物组织培养可实现农作物的大规模快速繁殖,植物组培培养基的类型有 、发芽培养基和生根培养基。下图中,由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植物,这项技术利用了植物细胞具有全能性的原理。图中A代表 ;AB过程表示 。(2)在植物组织培养中关于消毒和灭菌操作的叙述,正确的是 A操作者的双手可以不消毒 B外植体可以用酒精
13、消毒C镊子等器械需用酒精灭菌 D接种后培养基需用高压蒸汽灭菌(3)通常用来分离菌种的方法有 和 。(4)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:第一步:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。第二步:制备选择培养基。在基本培养基的基础上,还要添加 ,加琼脂后灭菌,制成固体平板。第三步:将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。第四步:根据是否能在该培养基上生长筛选出突变菌。(5)土壤中有些细菌含有脲酶,这些细菌能够将 分解成氨,从而使培养基中加入的 指示剂产生红色透明环。 3、请回答下列与酵母菌有关的问题
14、。 (1)从生态系统的成分上看,酵母菌属于_,它的同化作用类型是_。培养酵母菌时,为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_。(2)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是_(不定项)。A制作果酒 B由果酒制作果醋 C制作泡菜 (3)酵母菌菌种A能耐高温,但产酒精率较低,而菌种B不耐高温,产酒精率却较高。为获得耐高温、产酒精率高的酵母菌(目的菌种),可以将两个菌种进行细胞融合,在融合前首先需要_,然后用PEG诱导融合,最后利用A、B两菌种对某一药物抗药性的差异,对融合子进行筛选。实验中,应将含有融合子的培养液利用_法接种到含有相关药物的基本培养基上。下表为A、B
15、两菌种在几种药物的作用下,生长状况的实验结果。由于A菌种不能独立在基本培养基上生长,所以,据表可以判断,加入_(药物),可以筛选出融合子。多菌灵三唑酮霜霉狂杀放线菌酮菌种A菌种B注:“”可以良好生长,“”不能生长。(4)上述(3)中筛选出的融合子还不一定符合生产要求,需要进行后续筛选,过程如下:将配制好的麦芽汁分装到若干个如图所示的装置中,再分别接种筛选出的融合子,在_条件下培养。一段时间后,观察比较并记录每个装置中_,可初步判断融合子的发酵能力;进一步做_条件下产酒精能力的测定,以获得所需的目的菌种。4、微生物与人类的生活有着密切的联系。请回答下列有关问题。(1)在果醋、泡菜和果酒的制作过程
16、中,均利用相应微生物的代谢特点进行条件控制,其中始终需要提供氧气的是 的制作;在杨梅酒的制备过程中,为了提高杨梅的出汁率,在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和果胶酶,其中果胶酶可来自 等微生物;泡菜腌制过程中 和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵。(2)根据微生物的特点,可以利用相应的培养基进行分离或培养,例如用仅以尿素为氮源培养基可分离能产生 酶的微生物,在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,其中尿素用 灭菌,经培养后菌落周围会出现 色环带。(3)与LB全营养培养基中的菌落相比,以尿素为氮源的培养基中的菌落数 。A. 多 B. 少C. 相等D. 几乎为零(4)利用固体培养基
17、可以进行微生物培养和植物组织培养,两者的培养基明显不同的是后者 A需要添加琼脂 B需要添加有机物 C需要添加激素 D需要灭菌处理5、我国水果生产发展迅速,由于收获的季节性强,易造成积压,腐烂变质,为了解决上述问题且满足不同人群的需求,可以将水果加工制作成果汁、果酒、果醋等。在果汁生产中要用到果胶酶,某生物研究小组为了探究果胶酶的某些特性,进行了如下实验:实验方法:按如图所示的顺序进行操作。实验结果:对照组与实验组进行了相同时间的实验,结果如下图所示:(1)图中自变量是温度,除此之外还可用_来表示。A酶的浓度 B苹果泥的量 C水的加入量 DpH图中的纵坐标还可用_来表示。实验小组改变了实验条件后
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