DB13∕T 1090-2009 饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定 分光光度法(河北省).pdf
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1、ICS 65.120 B 46 DB13 河北省地方标准DB13/T 1090-2009 饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定分光光度法2009-06-17发布2009-07-02实施河北省质量技术监督局发布DB 13fT 1090-2009 前言本标准由河北省畜牧兽医局提出。本标准起草单位:河北省饲料产品质量监督检验站、石家庄市畜产品质量监测中心、河北省畜牧站。本标准主要起草人:武英利、王萍、左晓磊、闰超、王作艳、李广东。1 范围饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的测定一一分光光度法本标准规定了饲料用酶制剂中木聚糖酶活力的单位定义和测定方法。DB 13fT 1090-2009 本标准适用于饲料用酶制剂中
2、木聚糖酶活力的测定,不适用于饲料中木聚糖酶活力的测定。2 规范性引用文件下列文件通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GBrr 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1 木禀糖酶活力单位在50t:、pH5.5的条件下,1 min水解木聚糖生成1mol木糖所需的酶的量,规定为一个酶活力单位。4 原理木聚糖酶水解木聚糖生成木糖和木二糖等低聚糖
3、,生成的木糖在沸水浴条件下还原3,5-二硝基水杨酸,生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,溶液颜色与酶解产生的木糖量成正比,而木糖的生成量与酶的活力成正比,用分光光度计测定其吸光度值,依据吸光度值计算其酶活力。5 仪器和设备5.1 分析天平:感量0.01g。5.2研钵。5.3 容量瓶50mL、100mL。5.4 电炉:温度可调。5.5 恒温水浴摇床:温控范围30t:l:0.2吧60t:土0.2t:。5.6 烧杯200mL, 250 mL。5.7砂芯玻璃滤器:孔径。.45p.mo 5.8 酸度计:精确至0.01。5.9秒表。5.10 离心机6000r/min。5.11 移液器:精度10削。5.1
4、2 分光光度计。5.13 比色管25mL。6 试荆DB13/T 1090-2009 方法中所用试剂,除另有规定外均为分析纯试剂,所用水应符合GBrr6682-28三级以上用水要求。6.1 氢氧化铀。6.2 冰乙酸。6.3 三水乙酸纳(CH3COONa3H20)。6.4 3, 5-二硝基水杨酸。6.5 四水酒石酸押铀(CJI406.4H20)。6.6 苯酣。6.7 元水硫酸饷。6.8 木糖:含量大于99%。6.9 木聚糖。7 溶渡7.1 氢氧化纳溶渡,浓度200g/L 称取20.0g氢氧化俐,加水溶解,用水定容至1mL。7.2 Z酸溶液,浓度0.1mol/L 吸取冰乙酸0.60mL,加水溶解,用
5、水定容至1mL。7.3 Z酸纳溶渣,浓度0.1mol/L 称取三水乙自我铺1.36g,加水溶解,用水定容至100mL。7.4 乙酸-z酸锵缰冲液,pH5.5 称取三水乙酸铀23.14g,加冰乙酸1.70mL用水溶解,并定容至2omL,用乙酸潜液或乙酸饷溶液调pH值至5.5。7.5 DNS试剂(3,5-二硝墓水杨酸试1fl1)称取3,5-二硝基水杨酸3.15 g,溶解于5mL水中,搅拌5s,水洛加热至45(;。缓缓加人100 mL氢氧化铀榕液,同时不断搅拌,直到榕液澄清(此过程温度不要超过48(;)。再依次加入四水酒石酸饵铀91.0g,苯酣2.50g,无水硫酸铀2.50g,继续45(;水浴保温,
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