DB2310∕T 007-2019 黑木耳液体菌种生产技术规程(牡丹江市).pdf
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1、ICS 65. 020. 20 B 05 DB2310 牡丹江市E抽出TA万标准DB 231 O/T 007-2019 黑木耳液体菌种生产技术规程2019 -12 -02发布2019 -12 -02实施牡丹江市市场监督管理局发布目IJ1=1 本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。本标准由黑龙江省食用菌标准化技术委员会牡丹江分委员会提出并归口。本标准起草单位:黑龙江省农业科学院牡丹江分院。D82310/T 007-2019 本标准主要起草人:王延锋、于海洋、张运岐、罗连富、贾利阳、杨峰山、丁仕波、史磊、张荣芳、高天一、董雪梅、王金贺、刘姿胖、谷维、i番春磊、盛春鸽、张鹏、宋佳鑫、赵鹤
2、、赵静。I D82310/T 007-2019 黑木耳液体菌种生产技术规程1 范围本标准规定了黑木耳但uriculariaheimuer)液体菌种生产的生产条件、菌种选择、液体菌种生产技术要求、菌种保藏及运输、记录与档案。本标准适用于黑木耳液体菌种的生产。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的寻|用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 150 压力容器GB 3095 环境空气质量标准GB 5749 生活饮用水卫生标准GB/T 11165 实验室pH计GB!T 12728 食用菌术语GB/T 1
3、3554 高效空气过滤器GB 15618土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准GB 22207容积式空气压缩机安全要求GB 50073 洁净厂房设计规范NY/T 528 食用茵茵种生产技术规程NY!T 2375 食用菌生产技术规范3 术语和定义F列术语和定义适用于本文件。3. 1 品种经不同方法选育出来的具有特异性、遗传型、稳定性,适用于液体发酵、固体栽培的食用菌菌种。3. 2 黑木耳液体菌种用液体培养基,在生物发酵罐中,通过深层培养(液体发酵)技术生产的液体形态的黑木耳菌种。3.3 液体菌种发酵罐也称之为食用菌液体菌种培养器,是指进行食用菌液体菌种培养的专用设备。要求不锈钢材质,符D8231
4、0/T 007-2019 合GB150要求。3.4 起始pH液体培养基配制后尚未灭菌的pHo3. 5 终止pH液体菌种达到放罐指标时的培养基pHo3. 6 发酵罐空消对尚未投料的空发酵罐进行高压蒸汽灭菌。3. 7 发酵罐实消对投料后的发酵罐及发酵罐内培养基进行高压蒸汽灭菌。3. 8 接种量接入发酵罐中的食用茵茵种的数量,以菌种体积与培养基体积的百分比表示。3.9 通风量发酵罐培养液体菌种过程中每分钟通入培养基的无菌空气的量,以培养基体积/通入空气体积表示。3.10 液体菌种菌龄指菌种接入培养基后,液体菌种的生长发育时间。3. 11 放罐液体菌种菌丝生长旺盛,达到生长对数期时结束培养,在无菌条件
5、下从发酵罐通过传送管在o.15MPa 压力T,注射接种到栽培袋中。3. 12 镜检指通过显做镜观察液体菌种的菌丝生长发育状态以及是否有杂菌污染。4 生产条件4.1 厂址选择2 D82310/T 007-2019 应建立在交通便利,地势干燥,通风良好,水源充足,远离禽畜舍、垃圾堆积场,无污水、废气、废渣和粉尘等污染源。水质应符合GB5749的规定;大气应符合GB3095的规定:土壤环境质量应符合GB15618的规定O4. 2 厂房设置和布局液体发酵间和接种间按照GB50073洁净厂房设计规范执行,应按液体菌种生产工艺流程合理安排布局,无菌区与有菌区有效隔离。4. 3 基础设备菌种配制室、灭菌室、
6、无菌净化操作室、恒温培养室、发酵罐培养室、化验室和菌种室,要有调温设施,排水系统,排气设备,进入无菌区缓冲间,规模要配套,布局合理。4.4 生产仪器和设备发酵罐应符合GB150的规定。空气过滤器应符合GB/T13554的规定。空气压缩机应符合GB19153的规定。高压蒸汽灭菌锅应符合GB150的规定净化工作台、冰箱、磅秤、天平、液体菌种接种枪、恒温回旋式振荡器应符合相关的使用规定。4.5 检验设备恒温培养箱、显微镜、天平、酸度计等、玻璃三角瓶、试管、培养皿、定量定性1纸、精密pH试纸等。5 菌种选择应选用适于当地栽培、发菌出耳及转潮快、抗逆性强、优质、高产、商品性好,经省级以上农作物品种审定委
7、员会审(认)定的品种。菌种生产应符合NY/T528的规定。6 液体菌种生产技术要求6. 1 工艺流程按照国1的工艺流程进行黑木耳液体菌种的生产。3 D82310/T 007-2019 琦挥5-d,醒主拴在唱王i号!i:l:.|培抨蜒的E制|ZS;器、自Hi | 寸川暗悻菌种| | 气| 昂此处理I . . I 图1液体菌种生产工艺流程6. 2 母种制备6.2. 1 母种培养基的制作按照附录A.1配方配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基CPDA)或附录A.2配方配制综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基CCPDA),分装至试管长度五分之一处,使用棉塞或胶塞封住试管口,放入高压蒸汽灭菌锅中,温度1210C,灭菌30mi
8、n,灭菌结束摆放斜面冷却凝固。6. 2. 2 接种与培养无菌条件下,用接种钩取黄豆粒大小的原始菌种接种在母种培养基上恒温培养箱中培养,培养温度25oc:!:rc,相对湿度50%-70%,避光培养10d-15do6. 3 摇瓶菌种制备6.3. 1 摇瓶培养基的制作按照附录B.1配方配制培养基,用水应符合GB5749要求。将配方中的原料煮沸20min-30min,宜用三层纱布过滤,将滤液分装入500mL-1000mL三角瓶中,装液量为三角瓶容积的70%,放入15-20个玻璃珠,用封口膜封口,灭菌压力为0.125Mpa,灭菌时间40mino灭菌时加盖牛皮纸防潮。6. 3. 2 接种与培养无菌条件T,
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