DB37∕T 1827-2011 猪圆环病毒2型荧光PCR检测技术(山东省).pdf
《DB37∕T 1827-2011 猪圆环病毒2型荧光PCR检测技术(山东省).pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《DB37∕T 1827-2011 猪圆环病毒2型荧光PCR检测技术(山东省).pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、TCS B41 65. 020. 30 DB37 山东省Eh巳tTJ 方标准DB 37/ T 1827一-2011猪圆环病毒2型荧光PCR检测技术Real-time PCR Assay for the Detection ofPorcine Circovirus Type 2 2011 - 04 -08发布2011 - 06 -01实施山东省质量技术监督局发布目IJ1=1 本标准按照GB!T1.1-2009给山的规则起草。本标准的附录A为规范性附录。本标准由山东省农业科学院提出。本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。本标准主要起草单位:山东省农业科学院畜牧兽民研究所。DB37/ T X
2、XXX-XXXX 本标准主要起草人:王金宝、李f瓷、吴家强、H寸建r.吴晓燕、丛晓燕、乎也文|尊、杜以军。猪圆环病毒2型荧光PCR检测技术1 范围;本标准规定了猪圆环病毒2型(PCV2)荧光PCR检测技术的要求。本标准适用于猪血洁和细织中猪圆环病毒2型的检测。2 材料2.1 器材2.1.1 微量移液器(最大量和为10L、20L、100L、1000L)2.1.2 20 OOOg高速冷冻离心机2.1.3 紫外分光光度il2.1.4 PCR仪2. 2 荧光定ltl:PCR仪试剂2.2.1 质粒提取试剂命2.2.2 SYBR Green 1核酸染料2. 2. 3 凝胶回收试剂盒2.2.4 蛋白酶K(见
3、附录A.1章)2. 2. 5 10%SDS液(见附录A.2章)2. 2. 6 70%乙醇(见附录A.3章)2. 2. 7 1%琼脂糖凝胶(见附录A.4章)2.2.8 DNA Marker 2000 2. 3寻|物Y1: 5 -GCTGATTTCTTTTGTTGTTTGGTT-3 , Y2: 5 -GAGTGGGCTCCAGTGCTGTTAT-3 , 3 方法3.1 质粒标准阳性模板的制备3.1.1 质粒的构建及鉴定DB37/ T XXXX-XXXX 利用普通PCR技术扩增出PCV2的ORF2基因702bp片段,凝胶回收日克隆到克隆载体。纯化质粒,并转化DH5a感受态细胞,挑选转化长出的菌落进行
4、培养,提取质粒进行PCR鉴定。3.1.2 重组质粒浓度的测定将阳性重细质粒作20倍稀释,用紫外分光光度计测定其浓度,并计算标准品的拷贝数。3.1.3 标准品制备将重要H质粒稀释至l.0 X 1010拷贝/L后再倍比稀释,分别以10、10e、10、106、100拷贝/L5个梯度作为标准品模板,-70oC保存备用。DB37/ T XXXX-XXXX 3. 2 病毒基因细的提取对病料用蛋白酶K裂解法提取总DNA。3.2.1 病料处理:取小块病料组织T研钵中,用剪刀剪碎,加入2mLPBS缓冲液,研靡。3.2.2 取研磨液500Jl L T 1. 5mL离心管中,加入50Jl g/mL的蛋白酶K.5L,
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- DB37T 1827-2011 猪圆环病毒2型荧光PCR检测技术山东省 DB37 1827 2011 圆环 病毒 荧光 PCR 检测 技术 山东省
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【曲****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【曲****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。