免疫组化结果判断及常见问题的分析.ppt
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1、免疫组化结果判断免疫组化结果判断及常见问题分析及常见问题分析2021/3/29 星期一12021/3/29 星期一2肝脏:肝脏:CK8理想着色,胆管上皮细胞强阳性,理想着色,胆管上皮细胞强阳性,肝细胞呈不同层次阳性。肝细胞呈不同层次阳性。2021/3/29 星期一3 pan CK(AE1/AE3)在肝脏理想的染色,采用了热修复。在肝脏理想的染色,采用了热修复。肝细胞膜、胆管强而清晰的着色。背景干净。肝细胞膜、胆管强而清晰的着色。背景干净。2021/3/29 星期一4一、特异性染色的判断一、特异性染色的判断1.特定的定位特定的定位 细胞阳性细胞阳性根据靶抗原不同而呈现胞膜型、胞浆型根据靶抗原不同
2、而呈现胞膜型、胞浆型 或胞核型或胞核型 间质阳性间质阳性表现为细胞外着色,局限性或弥散性表现为细胞外着色,局限性或弥散性2.染色的不均一性染色的不均一性 阳性细胞的染色分布不均,片状或点状散在分布阳性细胞的染色分布不均,片状或点状散在分布 染色强弱不等,颜色深浅反映抗原量的多少染色强弱不等,颜色深浅反映抗原量的多少 3.排除人为造成的非特异性染色排除人为造成的非特异性染色 切片的折叠、刀痕,色素沉着,组织细胞坏死。切片的折叠、刀痕,色素沉着,组织细胞坏死。4.颗粒性显色颗粒性显色 DAB显色在高倍镜下呈颗粒状而非均匀着色。显色在高倍镜下呈颗粒状而非均匀着色。2021/3/29 星期一5免疫组化
3、标准化照片免疫组化标准化照片CK10CD44v6ER2021/3/29 星期一62021/3/29 星期一72021/3/29 星期一82021/3/29 星期一92021/3/29 星期一102021/3/29 星期一11合格合格的免疫组化染色切片的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提是正确判断染色结果的基础和前提不合格不合格的免疫组化染色切片的免疫组化染色切片容易导致误判容易导致误判2021/3/29 星期一12C-erbB-2优优良良中中差差2021/3/29 星期一134321ER2021/3/29 星期一14子宫内膜子宫内膜PR染色,修复不足染色,修复不足 子宫内膜子宫内膜
4、PR染色,修复良好染色,修复良好 PR2021/3/29 星期一15编号编号阳性片阳性片待检片待检片阴性对照阴性对照结论结论12345 操作失误,抗体失效操作失误,抗体失效非特异性着色非特异性着色阳性片不含靶抗原阳性片不含靶抗原待检片不含定位抗原待检片不含定位抗原待检片含定位抗原待检片含定位抗原二、染色结果的判断二、染色结果的判断2021/3/29 星期一16PCNA S-P400S-P4001-day CM4-day CM阳性强度阳性强度2010视野下,随机选视野下,随机选取取5个视野,测个视野,测100个阳性个阳性细胞的平均光密度即为此细胞的平均光密度即为此片的阳性强度。片的阳性强度。三、
5、结果分析三、结果分析2021/3/29 星期一17P53阳性细胞百分比阳性细胞百分比 计数计数100个瘤细胞,其中个瘤细胞,其中阳性细胞的比例:阳性细胞的比例:5%()()5%30%()()30%50%()50%()2021/3/29 星期一18PCNABarnes法法A:瘤细胞显色有无及深浅瘤细胞显色有无及深浅 0(不着色)(不着色)1(浅黄色)(浅黄色)2(棕黄色)(棕黄色)3(棕褐色)(棕褐色)B:显色细胞的比例显色细胞的比例 1(1%10%)2(11%50%)3(51%80%)4(80%)评分评分=AB 0分:阴性分:阴性 14分:弱阳性分:弱阳性 4分:强阳性分:强阳性2021/3/
6、29 星期一19胶原染色胶原染色阳性面积百分比阳性面积百分比4010视野,选取视野,选取5个视野,计算阳性区域面积占整个参考个视野,计算阳性区域面积占整个参考面积的百分率。面积的百分率。2021/3/29 星期一20CD34Weidner法(法(MVD计数)计数)1.孤立的棕黄色细胞族代表一条孤立的棕黄色细胞族代表一条微血管。微血管。2.低倍镜下找到组织内密度最高低倍镜下找到组织内密度最高区域。区域。3.4010视野下计数微血管数目。视野下计数微血管数目。2021/3/29 星期一21K-rasVEGF2021/3/29 星期一22附:定量分析图象处理系统图象处理系统 1、图象处理、图象处理:
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