DB21∕T 3257—2020 猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体酶联免疫检测方法(辽宁省).pdf
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1、ICS1 1.220一04DB21宁省地方标准DB21/T3257一2020猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体酶联免疫检测方法Me t h o do fELISAf o rPRRSVa n t i b o d yNEQ一30发布2020一05一30实施l-nU冈曰夕,乃乙4一JCn匕,尹八乙辽宁省市 场监督 管理局发布DB21/T3257一2020目次、,生幽目叮舀.1范围.”2规范性引用文件.3缩略语.4原理.5仪器和器材.6试剂.7操作步骤.8试验成立条件与结果判定9检测过程中防止交叉污染的措施10废弃物处理.附录A(资料性附录)试剂配制二DB21/T3257一2020士一口一Rl J本标准按照G
2、B/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由动物卫生标准化技术委员会(辽宁)提出,辽宁省农业农村厅归口管理。本标准起草单位:辽宁省农业发展服务中心。本标准协助单位:洛阳现代生物技术研究院有限公司、辽宁佰瑞生物科技有限公司。本标准主要起草人:周晨阳、魏澎、高志峰、魏园 园、王冰、董娜、刘金玲、刘耀川、杨作丰、高原、王连山、马亮亮、潘婷婷、杨嵘长、姜斌、杨太东、于春玲。本标准发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行反馈,我们将及时答复并认真处理,根据实际情况依法进行评估及复审。归口管理部门通讯地址:辽宁省农业农村厅(沈阳市和平区太原北街2号),联系电话:024
3、一23447862;标准起草单位通讯地址:辽宁省动物及产品检疫中心(沈阳市沈河区万柳塘路105号甲),联系电话:024一24229579。DB21/T3257一2020猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体酶联免疫检测方法范围本标准规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体酶联免疫检测方法的技术要求。本标准适用于在生物安全IT级(BSL一2)监测及流行病学调查,适用于猪血清或血浆样以上的实验室进行猪繁殖与 呼吸综合征病毒病的诊断、品中的猪繁殖与 呼吸综合征病毒抗体检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)仅所注日期的版
4、本适用于本文适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求GB/T19495.2一2004转基因产品检测 实验室技术要求3缩略语下列缩略语适用于本标准。EL1SA:酶联免疫吸附测定(e n z y m e1i n k e di m m u n o s o r b e n ta SSa y)PRRSV:猪繁殖与呼吸综合征病毒(Po r Ci n eRe p r o d u Ct i v ea n dRe s p i r a t o r ySy n d r o m eVi r u S)PBS:磷酸盐缓冲液(p h oSp h a t eb u f f e rSo l u t i o n)OD:
5、光密度,表示被检测物吸收掉的光密度(叩t i Ca ld e n s i t y)4原理本方法原理是包被板上色被的万絮殖与 呼吸综合征病毒(PRRSV)性抗体反应,形成抗原一抗体复合物,中含有PRRSV抗体,显色深,为阳性,抗原,可与待测样品中的特异1耳加尹入酶标记的二抗,则形成免疫复合物,洗涤后,如待测样品反一分为阴性。5仪器和器材5.1微量可调移液器:50林L一200林L。5.2s m L采血针管5.3冰箱:4士1冰箱,一20士1冰箱。5.4酶标仪5.537恒温培养箱5.6高速台式离心机(离心范围O一20OO0r/m i n)5.7洗板机5.8离心管:4m L离心管、2m L离心管和1.5
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