T∕SDNY 036-2022 韭菜中腐霉利快速检测 胶体金免疫层析法.pdf
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1、ICS65.020.01CCS B17团体标准T/SDNY 0362022韭菜中腐霉利快速检测 胶体金免疫层析法Rapid detection of procymidone in leekColloidal gold immunochromatography method2022-09-28 发布2022-11-01 实施全国团体标准信息平台T/SDNY 0362022I目次前言 . II1范围 . 12规范性引用文件 . 13术语和定义 . 14第一法 检测卡(试纸条)法 . 14.1原理 . 14.2试剂或材料 . 14.3仪器和设备 . 24.4分析步骤 . 24.5结果判定 . 35第
2、二法 光热读卡仪法 . 45.1原理 . 45.2试剂与材料 . 45.3仪器和设备 . 45.4分析步骤 . 45.5结果的表述计算 . 56性能指标 . 56.1检出限 . 56.2灵敏度 . 56.3特异性 . 56.4假阴性率 . 56.5假阳性率 . 57其它 . 6附录 A(资料性)腐霉利中英文名称、CAS 号及分子式信息 . 7附录 B(资料性)快速检测方法性能指标计算方法 .8全国团体标准信息平台T/SDNY 0362022II前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机
3、构不承担识别专利的责任。本文件由山东省农药检定所提出。本文件由山东省农药行业协会归口。本文件起草单位:山东省农药检定所、山东师范大学、山东省现代农业化学产业技术研究院、聊城市产品质量监督检验所。本文件主要起草人:张耀中、张震、于淼、吴新、周力、韩帅兵、马腾、邢冰寒、薛雯、王海燕、宿培萌、宋朋、马明、王方、张萍、张保建。本标准首次发布日期:2022年9月28日。全国团体标准信息平台T/SDNY 03620221韭菜中腐霉利快速检测 胶体金免疫层析法1范围本文件规定了蔬菜中腐霉利胶体金免疫层析法。本文件适用于韭菜中腐霉利的快速测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必
4、不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4第一法 检测卡(试纸条)法4.1原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。 样品中的腐霉利与胶体金标记的特异性抗体结合, 抑制了抗体和检测卡中检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线(T线)与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中待测组分进行定性判定。4.2试剂或材料4.2.1试剂4.2.1.1
5、甲醇(CH3OH,CAS 号:65-56-1)。4.2.1.2氯化钠(NaCl,CAS 号:7647-14-5)。4.2.1.3氯化钾(KCl,CAS 号:7447-40-7)。4.2.1.4磷酸二氢钾(KH2PO4,CAS 号:7778-77-0)。4.2.1.5十二水合磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O,CAS 号:10039-32-4)。4.2.1.6水(H2O,CAS 号:7732-18-5,GB/T 6682,三级)。4.2.2标准品腐霉利标准品:纯度95%,化合物中英文名称及 CAS 号等信息参照附录 A。4.2.3溶液配制全国团体标准信息平台T/SDNY 036202224.2
6、.3.1磷酸盐缓冲液(20mmol/L,pH=7.4):分别称取 16.0g 氯化钠、0.4g 氯化钾、0.4g 磷酸二氢钾、5.8g 十二水合磷酸氢二钠,于 1000mL 烧杯中,加水充分搅拌溶解后,转移定容至 1000mL。4.2.3.2甲醇磷酸盐(1+9)溶液:准确量取 10mL 甲醇,加入 90mL 磷酸盐缓冲液(4.2.3.1)中,混匀。4.2.4标准溶液配制4.2.4.1标准储备液(1000mg/L):准确称取腐霉利标准品约 10mg(精确至 0.1mg),用甲醇溶解,定容至 10mL,避光-18C 及以下条件保存,有效期为 12 个月。4.2.4.2标准中间液(100mg/L):
7、准确吸取一定量标准储备溶液(4.2.4.1),用甲醇稀释,定容至10mL,避光-18C 及以下条件保存,有效期为 1 个月。4.2.4.3标准工作液(10mg/L):准确吸取一定量标准中间液(4.2.4.2),用甲醇稀释,定容至 10mL,0C 5C 冷藏避光保存,有效期为 23 周。4.2.5材料腐霉利胶体金免疫层析试剂盒/检测卡(条)。4.3仪器和设备4.3.1电子天平:感量为 0.01g 和 0.01mg。4.3.2组织粉碎机。4.3.3涡旋混合器。4.3.4移液器:量程分别为 100L、200L、1mL 和 5mL。4.3.5离心机:转速4000r/min。4.4分析步骤4.4.1试样
8、制备韭菜样品取样部位按GB2763的规定执行,将适量(约200g)待测样品切碎混匀均一化制成匀浆,-18及以下条件保存。4.4.2试样提取准确称取制备后试样2g (精确至0.01g) 于15mL离心管中, 加入3mL甲醇磷酸盐 (1+9) 溶液 (4.2.3.2) ,涡旋振荡1min,4000r/min室温离心2min,取上清液即为待测液。4.4.3测定步骤吸取120L上述待测液于金标微孔中,上下抽吸58次至微孔的颗粒完全溶解,室温孵育3 min 5min。将试纸条插入金标微孔中反应8min。从微孔中取出试纸条,去掉试纸条下端的样品垫,观察显色情况,进行结果判定。4.4.4质控试验4.4.4.
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