T∕NAIA 0121-2022 枸杞中枸杞多糖含量的测定 高效液相色谱法.pdf
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1、ICS 65.020.01B 38TB团团体体标标准准T/ NAIA 0121-2022枸杞中枸杞多糖枸杞中枸杞多糖含量的测定含量的测定高效液相色谱法高效液相色谱法Determination of polysacaride content in WolfberryHigh performance liquchid chromatograpHy2022-07-01发布2022-07-15 实施宁夏化学分析测试协会宁夏化学分析测试协会发发 布布全国团体标准信息平台I前 言本文件按照GB/T 1.1-2020 标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则规定编写。本文件由宁夏回族自治区药品检
2、验研究院(国家枸杞产品质量检验检测中心(宁夏)提出。本文件由宁夏化学分析测试协会归口。本文件起草单位:宁夏回族自治区药品检验研究院(国家枸杞产品质量检验检测中心(宁夏)、宁夏医科大学、宁夏沃福百瑞枸杞产业股份有限公司、宁夏中宁枸杞产业创新研究院有限公司。本文件主要起草人:马玲、马学琴、陈欢、杨玲玲、尚博杨、郭荣、马宗卫、余君伟、苏晓娟、刘淑瑛、臧娅妮、王迎利、徐波、李艳婷、赵小军、赵茜、任如如、撖志明、雷艳、梁建宁。本文件为首次发布。全国团体标准信息平台1枸杞中枸杞多糖含量的测定高效液相色谱法1 范围本文件规定了枸杞子及其制品中甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖
3、、阿拉伯糖、岩藻糖含量的高效液相色谱测定方法。本文件适用于枸杞子及其制品中上述 10 种多糖类物质单个或多个成分含量的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 原理试样中的枸杞多糖先用乙醚和80%的乙醇脱脂和脱色素,经热水提取后用无水乙醇沉淀多糖,醇沉多糖用水溶解后,用4 mol/L三氟乙酸溶液水解为单糖,再加0.5 mol/L的PMP(1-苯基-3-甲基-5-
4、吡唑啉酮)衍生化,溶液用微孔滤膜过滤后,用高效液相色谱法测定,内标法定量。5 试剂与材料除另有说明外,在分析中使用分析纯试剂和 GB/T 6682中规定的一级水。5.1 甲醇:色谱纯。5.2 乙腈:色谱纯。5.3 磷酸二氢钾。5.4 氢氧化钠。5.5 无水乙醇。5.6 乙醚。5.7 甲苯。5.8 盐酸。5.9 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)。全国团体标准信息平台25.10 三氟乙酸。5.11 pH6.5磷酸盐缓冲液:取0.8 g氢氧化钠,用水溶解并稀释至200 mL,即得0.1 mol/L氢氧化钠溶液;称取6.8 g 磷酸二氢钾,加0.1 mol/L氢氧化钠溶液152 ml,用水稀
5、释至1000ml,即得pH6.5磷酸盐缓冲液。5.12 80%乙醇溶液:取400 mL无水乙醇,加水稀释至500 mL,即得。5.13 4 mol/L三氟乙酸溶液:准确量取29.7 mL三氟乙酸于100 mL容量瓶中,用水稀释至刻度,即得。5.14 4 mol/L氢氧化钠溶液:取16 g氢氧化钠,用水溶解并稀释至100 mL,即得。5.15 0.4 mol/L氢氧化钠溶液:取4 mol/L的氢氧化钠溶液10 mL,加水稀释至100 mL,即得。5.16 0.5 mol/L的PMP甲醇溶液:精密称取PMP 0.87 g,置10 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,即得。5.17 0.4 mol/
6、L盐酸溶液:取0.36 mL盐酸加水稀释至10 mL,即得。5.18 标准品:D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-葡糖糖醛酸、D-一水合半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、D-阿拉伯糖、L-岩藻糖、2-脱氧-D-核糖等物质的CAS号及纯度见附录A。5.19内标使用溶液精密称取2-脱氧-D-核糖标准品适量(精确至0.00001g),用水溶解并配制成质量浓度为1.3mg/mL的溶液,作为内标使用溶液。5.20单标储备溶液分别准确称取经真空干燥至恒重的甘露糖、岩藻糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、木糖、半乳糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖适量(精确至0.00001g),用水溶解并配制成质量浓
7、度为10mg/mL 的单标储备溶液,贮存于密闭容量瓶中避光于4下储存。5.21混合标准储备溶液分别精密量取(5.20)项下的单标储备溶液适量,用水溶解并稀释制成含甘露糖50 g/mL、岩藻糖30 g/mL、核糖20 g/mL,鼠李糖70 g/mL、葡萄糖醛酸70 g/mL、木糖140 g/mL、半乳糖醛酸440 g/mL、半乳糖400 g/mL、阿拉伯糖330 g/mL、葡萄糖500 g/mL的溶液,作为混合标准储备溶液。5.22微孔滤膜0.45 m,有机相。6 仪器与设备6.1高效液相色谱仪(配紫外检测器)6.2 分析天平,感量 0.00001g。6.3 旋转蒸发仪。6.4 离心机。6.5
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