DB4106∕T 90-2022 种鸡场禽白血病净化技术规范(鹤壁市).pdf
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1、ICS65.020.30CCS B 414106鹤壁市地方标准DB 4106/T 902022种鸡场禽白血病净化技术规范2022 - 09 - 26 发布2022 - 10 - 16 实施鹤壁市市场监督管理局发 布DB 4106/T 902022I前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由鹤壁市农业农村局提出并归口。本文件起草单位:鹤壁市农业农村发展服务中心、淇县动物防疫检疫中心、淇县农业农村发展服务中心、淇县农业综合行政执法大队、鹤壁市农产品检验检测中心。本文件主要起草人:郭瑞英、王瑞平、张燕芳、路绪玲、张梅山、高娟玉、孙文波
2、、王永鹏、程宝娟、高强、来淑云、周云飞。DB 4106/T 9020221种鸡场禽白血病净化技术规范1范围本文件规定了种鸡场禽白血病净化检测、净化周期与终止、净化状态维持等技术要求。本文件适用于原种鸡群(核心群)各生长阶段的净化检测技术,其他类型鸡群可参照执行。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 26436禽白血病诊断技术NY/T 680禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3、种鸡breeding chicken经过不断选种、选育,按育种组织制订的文件鉴定承认的鸡品种。根据其经济用途,分为蛋鸡系和肉鸡系。禽白血病avian leukosis, AL由禽白血病病毒 (ALV)引起的以造血细胞恶性增生为主的禽类多种肿瘤性疾病的总称。 特点是呈渐进性发生和持续性死亡。禽白血病病毒感染鸡群后,导致鸡群生产性能下降,免疫失败,死淘率增加,尤其是产蛋率和蛋的品质下降,鸡苗的品质下降等。ALV 既可通过种蛋垂直感染,也可以水平传播,因此该病一直是种鸡和蛋鸡生产中危害严重的疫病。禽白血病病毒avian leukosis virus, ALV归属于反转录病毒科反转录病毒属。病毒粒子为
4、一直径为80 nm120 nm,平均是90 nm的球状物,其外周是囊膜糖蛋白,其中gp85基因是囊膜蛋白表面的主要成分,主要决定了病毒亚群的特性,内部病毒子核心有一主要的群特异性抗原p27蛋白,其为核衣壳蛋白,主要用于群特异性抗原的检测。动物疫病净化animal disease eradication在特定区域或场所对某种或某些重要动物疫病有计划的通过监测、检验检疫、隔离、扑杀、生物安全等一系列综合措施,最终达到在该范围内动物个体不发病和无感染状态的根除消灭疫病病原的过程,目的是消灭或清除传染源, 从而达到并维持动物个体和群体健康。 这个特定区域或场所是人为确定的一个固定范围,可以是一个养殖场
5、、一个自然区域、一个行政区,也可以是一个国家。本文件所指净化主要指在种鸡群中(通常为一个种鸡场),通过雏鸡胎粪检测、不同日龄鸡血液病毒分离、公鸡精液中病毒分离等方法,发现并淘汰鸡群中感染禽白血病的鸡只,最终达到鸡群消除该病的过程。DB 4106/T 90202224净化检测程序出壳雏鸡胎粪检测与淘汰4.1.1将种蛋置于出壳纸袋(纸盒)中隔离孵化,每只种鸡所产种蛋单独使用一个出壳纸袋(纸盒),以免出雏时发生横向传播。4.1.2出壳后将雏鸡胎粪挤压于灭菌的 2 mL 离心管中,离心管中预先加入 0.6 mL 样品稀释液(商品化试剂盒中专用稀释液),充分震荡混匀。对每只雏鸡采集完胎粪后,要更换一次性
6、手套或对双手酒精消毒,然后再采集下一只雏鸡的胎粪。4.1.3将雏鸡胎粪样品置入液氮中快速冷冻后取出,放入 25 37 水浴中融化,反复冻融三次,离心,取上清液用于检测胎粪中禽白血病病毒 p27 抗原。4.1.4禽白血病病毒 p27 抗原检测,按照 NY/T 680 的规定或采用等效的商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒进行,也可采用针对禽白血病病毒 p27 抗原的单克隆抗体建立的胶体金试纸条等快速检测方法。4.1.5同一只母鸡所产的雏鸡中, 若有一只雏鸡胎粪检测为禽白血病病毒 p27 抗原阳性, 则该纸袋 (纸盒)中所有雏鸡视为阳性,相应雏鸡及其对应母鸡应全部淘汰。4.1.6阴性鸡作为育
7、种选留进行隔离饲养,来源于同一母鸡的阴性雏鸡放于同一笼中。在育雏期间每个笼具之间应采取阻隔措施以避免水平传播。 为避免笼间直接接触和直接气流的对流, 可在每个笼具之间用纸板阻隔,在不影响通风的情况下纸板高度应尽量高。开产初期的检测与淘汰4.2.1每只母鸡取开产后的初产蛋 2 枚3 枚采集蛋清,蛋清反复冻融三次,按照 4.1.4 规定的方法逐个检测禽白血病病毒 p27 抗原。也可无菌采集母鸡抗凝血,按照 GB/T 26436 的规定接种 DF-1 细胞进行病毒分离,培养 7 d9 d 后取细胞培养上清,按照 4.1.4 规定的方法检测禽白血病病毒 p27 抗原。4.2.2公鸡分别采集抗凝血和精液
8、同时接种 DF-1 细胞, 按照 4.2.1 规定的方法进行禽白血病病毒分离鉴定。精液病毒分离检测可按附录A的规定进行,也可无菌采集血清、精液或肛拭子进行 PCR-HRM 检测。4.2.3检测为阳性的鸡应淘汰,不再作为育种选育个体。对检测为阴性的选留后备种鸡,继续维持小群隔离饲养。留种前的检测与淘汰4.3.1取每只母鸡所产种蛋 2 枚3 枚采集蛋清,按 4.2.1 的规定进行检测。4.3.2公鸡按 4.2.2 的规定进行检测。4.3.3检测为阳性的鸡应淘汰,不再作为育种选育个体。对检测为阴性的选留后备种鸡,继续维持小群隔离饲养。种蛋的选留和孵化按照本文件4.14.3的要求淘汰所有阳性鸡后,每只
9、母鸡仅选用1只检测为阴性公鸡的精液进行人工授精。按育种规定时间留足种蛋,每只母鸡的种蛋均标号。将每只母鸡的种蛋置于写有该母鸡标号的专用孵化纸袋(纸盒)中,防止不同母鸡的种蛋直接接触,置于出雏箱中出雏。不同世代的持续检测经检测合格的种蛋孵出的雏鸡作为净化后第二世代鸡, 按照本文件4.14.4的要求实施第二世代的检测和净化。 后续世代按此程序继续循环进行, 直至评估 动物疫病净化示范场评估标准 (试行) (2021版)的要求。DB 4106/T 90202235净化周期与终止净化周期确定净化可根据种鸡所处育种时期, 对照本文件4.14.4的任何一个时间节点启动净化程序。 不同种鸡场可根据其技术条件
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